家蠶脂肪酶I（Bmlipase-1）作為在家蠶中已經(jīng)證明表現(xiàn)出抗家蠶核型多角體病毒（Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV）活性的蛋白質(zhì),但關(guān)于該蛋白具體如何發(fā)揮抗病毒功能的機(jī)制還沒(méi)有研究報(bào)道。本研究對(duì)Bmlipase-1在病毒復(fù)制增殖過(guò)程中對(duì)病毒復(fù)制相關(guān)基因的影響做了初步的探討,以期解析Bmlipase-1的抗病毒機(jī)制,得出如下研究結(jié)果:1、成功構(gòu)建了重組病毒:經(jīng)構(gòu)建可以同時(shí)表達(dá)病毒多角體基因和家蠶脂肪酶I基因（實(shí)驗(yàn)組）、病毒多角體基因和綠色熒光蛋白基因（對(duì)照組）的重組載體,再由Bac-to-Bac桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)制備重組桿狀病毒。在對(duì)照組中利用顯微鏡觀察到綠色熒光和病毒多角體;在實(shí)驗(yàn)組中除了觀察到病毒多角體外,Western Blot驗(yàn)證了家蠶脂肪酶I基因的表達(dá)。2、Bmliapse-1對(duì)BmNPV病毒復(fù)制相關(guān)基因dbp的表達(dá)有影響:將構(gòu)建的重組病毒擴(kuò)大培養(yǎng)并測(cè)量病毒滴度后,將等量病毒感染家蠶BmN細(xì)胞并在感染后不同時(shí)間收集細(xì)胞,將收集到的細(xì)胞提取RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA后,通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR（quantitative real-ti... 

【文章來(lái)源】：江蘇科技大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BV和ODV的表型[6]

I型BV感染過(guò)程

桿狀病毒經(jīng)口感染過(guò)程

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]家蠶脂肪酶1（Bmlipase-1）的原核表達(dá)和抗體制備及在轉(zhuǎn)基因增量表達(dá)系統(tǒng)中的檢測(cè)[J]. 金盛凱,蔣亮,林平,孫薇,程廷才,夏慶友.  蠶業(yè)科學(xué). 2012(06)
[2]家蠶脂肪酶基因Bmlipase-1在不同BmNPV抗性水平家蠶品種間的表達(dá)差異[J]. 張婷婷,夏定國(guó),趙巧玲,裘智勇,唐順明,沈興家.  蠶業(yè)科學(xué). 2012(04)
[3]中國(guó)野桑蠶抗病毒蛋白基因（Lipase）的克隆與活性鑒定[J]. 姚慧鵬,何芳青,郭愛(ài)芹,曹翠平,魯興萌,吳小鋒.  蠶業(yè)科學(xué). 2008(03)
[4]家蠶基因組研究對(duì)蠶業(yè)學(xué)科和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的影響[J]. 向仲懷,楊煥明.  世界科技研究與發(fā)展. 2003(06)

博士論文
[1]家蠶BmNPV ODV-E56/BmP95的生物學(xué)功能及多角體包埋外源蛋白的研究[D]. 相興偉.浙江大學(xué) 2013
[2]基于轉(zhuǎn)基因工程的家蠶核型多角體病毒（BmNPV）抗性素材創(chuàng)新及抗性機(jī)制研究[D]. 蔣亮.西南大學(xué) 2013

碩士論文
[1]增量表達(dá)抗病毒蛋白Bmlipase-1的家蠶轉(zhuǎn)基因系統(tǒng)的建立[D]. 陳杰.西南大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3524048