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不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉病的抗性鑒定及SSR分子標(biāo)記的篩選

發(fā)布時(shí)間:2021-10-28 15:57
  研究不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉。≒lasmopara viticola)的抗性差異,旨在為葡萄霜霉病的抗病育種提供理論依據(jù)。本研究以120份葡萄種質(zhì)資源為試材,采用室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉病的抗性,以實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(q RT-PCR)分析關(guān)鍵抗性基因在6個(gè)野生葡萄株系中的表達(dá)差異。同時(shí)篩選SSR分子標(biāo)記進(jìn)行葡萄霜霉病的抗性鑒定,為葡萄分子輔助育種提供依據(jù)。主要結(jié)果如下:(1)通過(guò)室內(nèi)離體葉圓片接種鑒定發(fā)現(xiàn)不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉病的抗性存在較大差異。120份供試樣品中的病情指數(shù)為078.70。其中,普萊德、朱姆博、弗萊、薩米特和里尤木夫5份圓葉葡萄均表現(xiàn)為免疫,病情指數(shù)均為0;云南-元謀2、云南-2、木扎嶺-3等3份野生資源為高抗株系,病情指數(shù)分別為1.81、4.40和1.62;摩爾多瓦、Palmata、蘡薁-林縣、DVIT2437 cinerea Barrett等38份為抗病品種(株系),病情指數(shù)為5.3225.00;涅布蓋、哈桑葡萄、Rupestris等71份為感病品種(株系),病情指數(shù)為25.934

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉病的抗性鑒定及SSR分子標(biāo)記的篩選


霜霉病的生命周期Fig.1-1ThelifecycleofPlasmoparaviticola

霜霉病菌,葉盤(pán),清水,葉圓片


萄葉片上長(zhǎng)出新的孢子囊時(shí),用無(wú)菌的軟毛刷將孢子囊輕輕刷進(jìn)無(wú)菌蒸餾水中,搖利用血球計(jì)數(shù)板計(jì)算孢子囊數(shù)量,調(diào)至濃度為 1×105個(gè)/mL 的孢子囊懸浮液備用接種及病情調(diào)查:用移液槍將稀釋好的孢子囊懸浮液滴加在每個(gè)葉圓片中央,盤(pán)接種 30 μL(約 300 個(gè)孢子囊)葡萄霜霉菌懸浮液,對(duì)照培養(yǎng)皿內(nèi)的葉圓片上 μL 的無(wú)菌蒸餾水。接種之后,把培養(yǎng)皿用封口膜密封,放于人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)濕度(90%),保溫(22℃),光照黑暗各 12 h 交替培養(yǎng)。待接種霜霉病菌 24 ,用無(wú)菌濾紙吸去葉盤(pán)上的接種懸浮液,在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)。接種霜霉病菌 1,拍照并計(jì)算各處理的病情指數(shù)。.2 葡萄霜霉病的抗性等級(jí)劃分對(duì)接種霜霉病菌 168 h 后的葉盤(pán)進(jìn)行數(shù)碼相機(jī)拍照(圖 2-1),用 Photoshop CS發(fā)病面積(Liu et al. 2015)。按照葉圓片上感病的面積占整個(gè)葉圓片的百分比可 6 級(jí),其中 0 級(jí):無(wú)病斑;1 級(jí):感病面積占整個(gè)葉圓片的 0.1%~5%;3 級(jí):感占整個(gè)葉圓片的 6%~25%;5 級(jí):感病面積占整個(gè)葉圓片的 26%~50%;7 級(jí):感占整個(gè)葉圓片的 51%~75%;9 級(jí):感病面積占整個(gè)葉圓片的 76%~100%。病情Disease index)=Σ(各級(jí)病葉數(shù)×相應(yīng)病害級(jí)別)/調(diào)查總?cè)~數(shù)×9×100。

葡萄,云南,霜霉病,元謀


圖 2-2 高抗霜霉病的葡萄株系Fig.2-2 Grape strains highly resistant to downy mildew表 2-2 不同葡萄種質(zhì)資源對(duì)霜霉病的發(fā)病程度Table 2-2 Results of different grape germplasm resources to Plasmopara viticola號(hào)ode種類Species發(fā)病率(%)Incidence病情指數(shù)Diseaseindex抗性等級(jí)Resistancegrade抗性類別Resistancecategory 摩爾多瓦 Moldova 4.97 21.30 3 抗病 R 卡托巴 Catawba (1199) 9.07 22.22 3 抗病 R 甜冬葡萄 Cinerea 14.31 34.32 4 感病 S LN33 13.41 33.33 4 感病 S 麥可達(dá)木斯 Mcadam 13.15 33.33 4 感病 S Rupestris 9.41 30.86 4 感病 S 貝達(dá) Beta 13.02 33.33 4 感病 S云南葡萄-2云南-元謀 2 木扎嶺-3

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào):3463028

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