稻瘟病作為影響水稻的主要病害之一,對水稻的生產帶來了極大的威脅。為了達到控制和防治稻瘟病的目的,育種家將抗稻瘟病基因導入水稻中,對水稻進行抗性改造,使得它自身就能夠抵抗稻瘟病的侵害。但是由于稻瘟病菌的生理小種很容易變異,新推廣的抗病品種常常在種植不久之后就喪失了抗病性,導致失去了其使用的價值。因此,快速、有效地發(fā)掘和利用優(yōu)良的抗稻瘟病品種一直是國內外研究重點。本研究以前期已經進行了對應抗病基因遺傳定位的10個稻瘟病菌株和水稻品種窄葉青8（ZYQ8）、京系17（JX17）及其雙單倍體（DH）群體的103個株系作為實驗材料,結合遺傳定位、群體遺傳學分析以及生物信息學分析3種方法來定位和篩選抗稻瘟病候選基因,隨后進行水稻轉化,驗證其抗病功能。本研究的主要結果如下:1.分布在10個抗稻瘟病菌QTL定位區(qū)域中的NBS-LRR基因有254個,NBS-LRR總基因數為468個,占了NBS-LRR總基因數的54.3%。這10個QTL定位區(qū)域的總長度為46,526,191bp,占水稻全基因組總長度的10.8%,說明我們所定位的10個QTL定位區(qū)域是NBS-LRR基因的富集區(qū)。2.位于ZYQ8抗JX17感... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

植物抗病基因的結構

圖 2.1 水稻組織培養(yǎng)過程Fig. 2.1 Rice tissue culture process2.3.5 CTAB 法大量提取植物葉片 DNA（1）配制質量分數為 2%的 CTAB 提取緩沖液，放于 65℃的水浴鍋中加熱；（2）取需要提取 DNA 的水稻葉片，稍微剪碎放至 2ml 的 EP 管中，并放入一顆潔凈的鋼珠；（3）在 EP 管中加 700ul 已預熱的 2% CTAB；（4）將已加入CTAB的EP 管置于高通量球磨儀中，兩邊對稱放置，研磨3-6min；（5）將研磨好的 DNA 樣品放入 65℃的恒溫水浴鍋中，30-60min，每隔 10min取出上下顛倒幾次；（6）放于室溫下冷卻 2min 后，加入與樣品等體積的氯仿-異戊醇（24:1），上、下緩慢顛倒 2-3min，不能劇烈振蕩，使兩者充分混合；（7）12000rpm 離心 10min，然后小心的吸取上清液至另一個已寫好標記的干凈

第三章 結果與分析3.1.2 真、假基因情況分析位于 ZYQ8 抗 JX17 感的 6 個 QTL 區(qū)域中的基因共有 119 個，（如表 3.2 所示）按照真、假基因的情況我們把它們分成 3 類，第 1 類為秈稻中為真基因，粳稻中為假基因的基因有 33 個，第 2 類為秈稻和粳稻中均為真基因的有 69 個，第3 類為秈稻和粳稻中均為假基因的有 17 個。一般的我們認為假基因為沒有功能的基因，為了進一步的驗證，我們對 NBS-LRR 基因家族中的所有的在秈稻和粳稻中真、假基因差異的基因其真基因 Pi 值和假基因 Pi 值比值的對數值作圖（圖3.1），圖中的每一條豎線代表一個基因，不同的顏色代表不同染色體上的基因，從圖中我們可以看出，大部分基因其真基因的 Pi 值比假基因的 Pi 值高，說明真基因與假基因相比更有可能為有功能的基因，對于秈稻和粳稻中均為假基因的這部分基因我們認為它們不具有抗病功能。因此第三類基因我們不再考慮。

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