社會(huì)性昆蟲白蟻可以采用類似“人痘接種”的主動(dòng)免疫方式來(lái)抵御致病真菌的感染,但是白蟻主動(dòng)免疫的分子調(diào)控機(jī)制并不十分清楚。在黑胸散白蟻Reticulitermes chinensis Snyder的主動(dòng)免疫過(guò)程中,同伴白蟻與直接染菌白蟻接觸1 d后,其體內(nèi)硒蛋白T（selenoprotein T,Sel T）基因的表達(dá)量顯著降低（P<0.05）,暗示Sel T基因可能與白蟻主動(dòng)免疫相關(guān)。昆蟲免疫蛋白轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶（transglutaminase,TG）促進(jìn)血凝塊形成,在白蟻抵御致病菌侵染的免疫過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用。鑒于此,本文以黑胸散白蟻和金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae（Metchnikoff）Sorokin為研究材料,利用“宿主—病原真菌”系統(tǒng)（直接染菌白蟻和受菌同伴白蟻一起培養(yǎng)接觸）,開展了Sel T與TG基因調(diào)控黑胸散白蟻防御綠僵菌侵染的主動(dòng)免疫機(jī)制研究。主要結(jié)果如下:（1）抑制Sel T基因表達(dá)量打破黑胸散白蟻主動(dòng)免疫首先,克隆得到黑胸散白蟻Sel T基因片段572bp,并設(shè)計(jì)合成ds Sel T注射入白蟻體內(nèi),3d后顯著降低了Sel T基因表達(dá)量... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同處理組的白蟻RNA質(zhì)量條帶1~3代表綠僵菌處理組，4代表2000bp的marker，5~7代表Tween80處理組

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文14反向引物（Reverse,10μM）0.5μLddH2O2μLcDNA模板2μL離心后體系在實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀中反應(yīng)：95oC預(yù)熱3min；95oC解鏈10s，60oC退火加延伸30s，共計(jì)40個(gè)循環(huán)。2.5數(shù)據(jù)分析采用IBMSPSSStatistics20.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)基因表達(dá)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。首先使用Shapiro-Wilktest檢測(cè)數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布。分析發(fā)現(xiàn)SelT基因表達(dá)數(shù)據(jù)與SepSecS基因表達(dá)數(shù)據(jù)均不符合正態(tài)分布，因此使用Wilcoxontest法。3結(jié)果與分析3.1受菌同伴白蟻SelT基因的表達(dá)量如圖2.2所示，與直接染菌白蟻接觸1d后的受菌同伴白蟻體內(nèi)的SelT基因表達(dá)量顯著低于0.1%Tween80對(duì)照組無(wú)菌同伴白蟻的SelT基因表達(dá)量（n=6,P=0.028）。圖2.2受菌同伴白蟻體內(nèi)SelT基因的表達(dá)量柱形圖數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（*,P<0.05;Wilcoxontest）。Fig.2.2ExpressionofSelTgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(*,P<0.05;Wilcoxontest).

SelT和TG基因調(diào)控黑胸散白蟻防御綠僵菌的主動(dòng)免疫機(jī)制153.2受菌同伴白蟻SepSecS基因的表達(dá)量如圖2.3所示，與直接染菌白蟻接觸1d后的受菌同伴白蟻體內(nèi)的SepSecS基因表達(dá)量與0.1%Tween80對(duì)照組無(wú)菌同伴白蟻的SepSecS基因表達(dá)量相比無(wú)顯著差異（n=6,P=0.753）。圖2.3受菌同伴白蟻體內(nèi)SepSecS基因的表達(dá)量柱形圖數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（Notsignificant;Wilcoxontest）。Fig.2.3ExpressionofSepSecSgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(Notsignificant;Wilcoxontest).4討論已有研究表明，同伴白蟻與直接染菌白蟻接觸1d后，其體內(nèi)游離硒元素的含量顯著降低（趙星穎2017），而硒的生物學(xué)作用主要取決于硒蛋白的生理功能（Kvicala1999）。硒蛋白是一類含有硒的蛋白質(zhì)，以非標(biāo)準(zhǔn)氨基酸硒半胱氨酸（Sec）的形式存在。硒半胱氨酸是第21種氨基酸，類似于半胱氨酸（Cys），只是將硫取代為硒（ChappleandGuigó2008）。硒蛋白在生命的各個(gè)領(lǐng)域皆可被發(fā)現(xiàn)，例如真核生物、真細(xì)菌和真菌（Lobanovetal2009;Marcoetal2019）。研究表明脊椎動(dòng)物基因組可編碼的硒蛋白基因高達(dá)25個(gè)（Kryukovetal2003;Castellanoetal2004），無(wú)脊椎動(dòng)物與之相比則少之又少（Castellanoetal2001）。意大利蜜蜂（Apismellifera）和岡比亞按蚊（Anophelesgambiae）僅保留1-3個(gè)硒蛋白（Lobanovetal2009）；黑腹果蠅（D.melanogaster）中僅存3種硒蛋白基因，即硒磷酸合成酶（SPS2）、硒蛋白H（SelH）和硒蛋白K（SelK），SPS2參與硒蛋白的生物合成，SelH和SelK似乎涉及抗氧化作用以及胚胎的存活（Castellanoetal2001;Morozovaetal2003;Luetal2006;Dikiyetal2007）。本文在黑胸散白

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]昆蟲免疫致敏研究進(jìn)展[J]. 張鶴,黃舒寧,蒲宇辰,石章紅,侯有明.  昆蟲學(xué)報(bào). 2019(04)
[2]基于PI3K/Akt通路的中藥治療糖尿病研究進(jìn)展[J]. 劉培,王鵬飛,王科,葉花,董晨虹,郭宇航,段秀俊.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2019(05)
[3]昆蟲天然免疫相關(guān)基因研究進(jìn)展[J]. 劉小民,袁明龍.  遺傳. 2018(06)
[4]昆蟲共生微生物在病蟲害和疾病控制上的應(yīng)用前景[J]. 魏舸,白亮,曲爽,王四寶.  微生物學(xué)報(bào). 2018(06)
[5]微量元素硒與腎臟疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 張夏明,徐剛.  浙江醫(yī)學(xué). 2018(05)
[6]硒與自身免疫性甲狀腺病關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 董清,郭雷.  臨床內(nèi)科雜志. 2017 (08)
[7]昆蟲病原真菌在農(nóng)林害蟲生物防治中的應(yīng)用[J]. 劉春來(lái).  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(03)
[8]氣候變暖對(duì)中國(guó)木材腐朽及白蟻危害區(qū)域邊界的影響[J]. 馬星霞,蔣明亮,王潔瑛.  林業(yè)科學(xué). 2015(11)
[9]鈣離子通道與胰島素分泌關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 劉田,潘明麟,張曉梅.  蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014(11)
[10]餌劑控制黑胸散白蟻群體的效果[J]. 阮冠華,李靜,莫建初.  浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(05)

博士論文
[1]尖唇散白蟻性腺發(fā)育的神經(jīng)和激素調(diào)節(jié)研究[D]. 蘇曉紅.陜西師范大學(xué) 2004

碩士論文
[1]鐵蛋白在維持家蠅氧化還原平衡中的作用[D]. 李永保.河北大學(xué) 2019
[2]SelT基因敲除對(duì)脂質(zhì)代謝和胰島素抵抗的調(diào)控作用及機(jī)制[D]. 馮鐵軍.華中科技大學(xué) 2019
[3]黑胸散白蟻誘殺劑性能優(yōu)化的研究[D]. 曹海燕.浙江農(nóng)林大學(xué) 2018
[4]桔小實(shí)蠅胰島素信號(hào)通路基因表達(dá)特性及功能研究[D]. 吳怡蓓.西南大學(xué) 2016
[5]黑胸散白蟻對(duì)綠僵菌侵染的群體抗性及其機(jī)理研究[D]. 王威.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]肝素修飾物對(duì)αIIbβ3整合素介導(dǎo)的黑色素瘤細(xì)胞與血小板相互作用的影響[D]. 張春梅.東北師范大學(xué) 2008
[7]家蠶胰島素信號(hào)傳導(dǎo)途徑中上游基因的克隆與表達(dá)模式[D]. 劉艷.陜西師范大學(xué) 2008



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