苦瓜素類化合物對(duì)亞洲玉米螟Ofh細(xì)胞和粉紋夜蛾Hi-5細(xì)胞的毒理研究
發(fā)布時(shí)間:2021-08-26 08:13
苦瓜素(momordicins)是一類結(jié)構(gòu)相似的葫蘆烷型四環(huán)三萜類化合物,是源自于苦瓜(Momordica charantia L.)莖葉提取物中的重要抗蟲次生代謝物。苦瓜素I和苦瓜素II是苦瓜葉片提取物中含量較多的一類化合物,苦瓜苷B是從苦瓜莖葉提取物中分離得到的新化合物。本文旨在細(xì)胞及蛋白組學(xué)水平上明確苦瓜素類化合物的抗蟲作用機(jī)理,為篩選新型作用機(jī)制的生物農(nóng)藥提供科學(xué)依據(jù)。本研究以離體亞洲玉米螟Ostrinina furnacalis幼蟲血細(xì)胞(Ofh)和粉紋夜蛾Trichoplusia ni卵巢細(xì)胞(Hi-5)為對(duì)象,在細(xì)胞水平系統(tǒng)地研究了苦瓜素I和苦瓜苷B對(duì)Ofh細(xì)胞的毒力,并研究了苦瓜素I對(duì)Hi-5細(xì)胞蛋白表達(dá)的影響。1.苦瓜素Ⅰ和II及苦瓜苷B對(duì)Ofh細(xì)胞毒理用CCK-8法比較了苦瓜素Ⅰ、苦瓜素Ⅱ、苦瓜苷B和印楝素A對(duì)Ofh細(xì)胞的增殖抑制作用;用倒置相差顯微鏡和熒光倒置顯微鏡觀察了苦瓜素Ⅰ及苦瓜苷B對(duì)Ofh細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響,并用臺(tái)盼藍(lán)染色法和流式細(xì)胞術(shù)研究了其對(duì)Ofh細(xì)胞的致壞死作用。旨在確定苦瓜素Ⅰ和新化合物苦瓜苷B對(duì)Ofh細(xì)胞的毒力作用,并探討其作用機(jī)理。研究結(jié)果表明...
【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Ofh細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)曲線
3 結(jié)果與分析3.1 苦瓜素Ⅰ和Ⅱ及苦瓜苷 B 對(duì) Ofh 細(xì)胞的增殖抑制及其機(jī)制研究3.1.1 亞洲玉米螟 Ofh 細(xì)胞的生長曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線依據(jù)細(xì)胞各濃度所測(cè)得 OD 值繪制細(xì)胞濃度與 OD 值的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖(如圖 2),標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y=-0.0645+0.0849x。根據(jù)每天測(cè)定的各孔細(xì)胞的 OD 值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其對(duì)應(yīng)的細(xì)胞數(shù)并繪制生長曲線圖(如圖 3)。
17很弱,但在濃度為40 μg/mL時(shí)則表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制作用,其濃度-時(shí)間效應(yīng)的相關(guān)性較差(圖4: B~D)。表3列出了供試4種化合物作用Ofh細(xì)胞12 h和36 h的增殖抑制作用的毒力回歸方程,從表3可以看出,處理12 h,4種化合物對(duì)Ofh細(xì)胞增殖抑制的IC50在24.783~34.948 μg/mL范圍內(nèi),處理36 h,4種化合物對(duì)Ofh細(xì)胞增殖抑制作用明顯增強(qiáng),其中,苦瓜苷B和苦瓜素Ⅰ對(duì)Ofh細(xì)胞的增殖抑制作用最強(qiáng),IC50為7.566~8.514μg/mL;其次是印楝素A;苦瓜素Ⅱ的抑制作用最弱。根據(jù)36 h苦瓜苷B和苦瓜素Ⅰ對(duì)Ofh細(xì)胞的增殖抑制IC50值
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]苦瓜素Ⅰ對(duì)亞洲玉米螟的生物活性及對(duì)其幼蟲體內(nèi)代謝酶活性的影響[J]. 曹溪,朱春亞,張茂新,凌冰. 昆蟲學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]不同日齡和吊飛過程中桔小實(shí)蠅成蟲飛行肌能量代謝相關(guān)酶活性的變化[J]. 袁瑞玲,王曉渭,楊珊,陳鵬. 昆蟲學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]不同類型藥劑對(duì)水稻褐飛虱的活性及復(fù)配增效作用[J]. 王昱莎,鄒嘯文,梁立成,Abid Ali,黃秀枝,賢振華. 植物保護(hù). 2015(02)
[4]甘蔗NADP異檸檬酸脫氫酶基因(SoNADP-IDH)的克隆與表達(dá)分析[J]. 謝曉娜,楊麗濤,王盛,張小秋,李楊瑞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(01)
[5]苦瓜葉萃取物對(duì)亞洲玉米螟代謝酶活性的影響[J]. 朱春亞,劉歡,曹溪,張茂新,凌冰. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2014(04)
[6]幾種藥物復(fù)配對(duì)白蟻的毒力和聯(lián)合作用測(cè)定[J]. 林雁,何利文,楊靜勤. 中華衛(wèi)生殺蟲藥械. 2014(02)
[7]苦瓜葉提取物對(duì)亞洲玉米螟的生物活性及對(duì)斜紋夜蛾卵巢細(xì)胞的毒力[J]. 劉歡,朱春亞,張茂新,凌冰. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2014(01)
[8]臺(tái)盼藍(lán)拒染法、MTT法、CCK-8法在研究As2O3細(xì)胞毒性作用中的意義[J]. 陳沖,焦寧,靖景艷,徐瑞榮. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2013(12)
[9]天然醌類和合成醌類物質(zhì)對(duì)粉紋夜蛾的拒食與毒性作用[J]. 汪浩,賴多,徐漢虹. 世界農(nóng)藥. 2013(02)
[10]苦瓜葉乙酸乙酯提取物對(duì)斜紋夜蛾實(shí)驗(yàn)種群的抑制作用[J]. 駱穎,凌冰,謝杰鋒,張茂新. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(13)
碩士論文
[1]苦瓜素Ⅰ和Ⅱ?qū)喼抻衩酌獫{蛋白表達(dá)的影響[D]. 方月.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]植物源殺蟲劑及其混配增效研究[D]. 王元蘭.中南林學(xué)院 2004
[3]肌動(dòng)蛋白在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)及其在桿狀病毒復(fù)制和運(yùn)輸中作用的初步研究[D]. 李小青.華中師范大學(xué) 2003
本文編號(hào):3363883
【文章來源】:華南農(nóng)業(yè)大學(xué)廣東省
【文章頁數(shù)】:53 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
Ofh細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)曲線
3 結(jié)果與分析3.1 苦瓜素Ⅰ和Ⅱ及苦瓜苷 B 對(duì) Ofh 細(xì)胞的增殖抑制及其機(jī)制研究3.1.1 亞洲玉米螟 Ofh 細(xì)胞的生長曲線及標(biāo)準(zhǔn)曲線依據(jù)細(xì)胞各濃度所測(cè)得 OD 值繪制細(xì)胞濃度與 OD 值的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖(如圖 2),標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y=-0.0645+0.0849x。根據(jù)每天測(cè)定的各孔細(xì)胞的 OD 值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得其對(duì)應(yīng)的細(xì)胞數(shù)并繪制生長曲線圖(如圖 3)。
17很弱,但在濃度為40 μg/mL時(shí)則表現(xiàn)出很強(qiáng)的抑制作用,其濃度-時(shí)間效應(yīng)的相關(guān)性較差(圖4: B~D)。表3列出了供試4種化合物作用Ofh細(xì)胞12 h和36 h的增殖抑制作用的毒力回歸方程,從表3可以看出,處理12 h,4種化合物對(duì)Ofh細(xì)胞增殖抑制的IC50在24.783~34.948 μg/mL范圍內(nèi),處理36 h,4種化合物對(duì)Ofh細(xì)胞增殖抑制作用明顯增強(qiáng),其中,苦瓜苷B和苦瓜素Ⅰ對(duì)Ofh細(xì)胞的增殖抑制作用最強(qiáng),IC50為7.566~8.514μg/mL;其次是印楝素A;苦瓜素Ⅱ的抑制作用最弱。根據(jù)36 h苦瓜苷B和苦瓜素Ⅰ對(duì)Ofh細(xì)胞的增殖抑制IC50值
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]苦瓜素Ⅰ對(duì)亞洲玉米螟的生物活性及對(duì)其幼蟲體內(nèi)代謝酶活性的影響[J]. 曹溪,朱春亞,張茂新,凌冰. 昆蟲學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]不同日齡和吊飛過程中桔小實(shí)蠅成蟲飛行肌能量代謝相關(guān)酶活性的變化[J]. 袁瑞玲,王曉渭,楊珊,陳鵬. 昆蟲學(xué)報(bào). 2015(05)
[3]不同類型藥劑對(duì)水稻褐飛虱的活性及復(fù)配增效作用[J]. 王昱莎,鄒嘯文,梁立成,Abid Ali,黃秀枝,賢振華. 植物保護(hù). 2015(02)
[4]甘蔗NADP異檸檬酸脫氫酶基因(SoNADP-IDH)的克隆與表達(dá)分析[J]. 謝曉娜,楊麗濤,王盛,張小秋,李楊瑞. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(01)
[5]苦瓜葉萃取物對(duì)亞洲玉米螟代謝酶活性的影響[J]. 朱春亞,劉歡,曹溪,張茂新,凌冰. 環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào). 2014(04)
[6]幾種藥物復(fù)配對(duì)白蟻的毒力和聯(lián)合作用測(cè)定[J]. 林雁,何利文,楊靜勤. 中華衛(wèi)生殺蟲藥械. 2014(02)
[7]苦瓜葉提取物對(duì)亞洲玉米螟的生物活性及對(duì)斜紋夜蛾卵巢細(xì)胞的毒力[J]. 劉歡,朱春亞,張茂新,凌冰. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2014(01)
[8]臺(tái)盼藍(lán)拒染法、MTT法、CCK-8法在研究As2O3細(xì)胞毒性作用中的意義[J]. 陳沖,焦寧,靖景艷,徐瑞榮. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2013(12)
[9]天然醌類和合成醌類物質(zhì)對(duì)粉紋夜蛾的拒食與毒性作用[J]. 汪浩,賴多,徐漢虹. 世界農(nóng)藥. 2013(02)
[10]苦瓜葉乙酸乙酯提取物對(duì)斜紋夜蛾實(shí)驗(yàn)種群的抑制作用[J]. 駱穎,凌冰,謝杰鋒,張茂新. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2012(13)
碩士論文
[1]苦瓜素Ⅰ和Ⅱ?qū)喼抻衩酌獫{蛋白表達(dá)的影響[D]. 方月.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]植物源殺蟲劑及其混配增效研究[D]. 王元蘭.中南林學(xué)院 2004
[3]肌動(dòng)蛋白在昆蟲細(xì)胞中的表達(dá)及其在桿狀病毒復(fù)制和運(yùn)輸中作用的初步研究[D]. 李小青.華中師范大學(xué) 2003
本文編號(hào):3363883
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