柑橘黃龍病是世界范圍內(nèi)危害柑橘生產(chǎn)最嚴(yán)重的病害之一。由于黃龍病田間癥狀復(fù)雜,常會(huì)造成誤判,如何進(jìn)行準(zhǔn)確診斷將是面對(duì)實(shí)際生產(chǎn)中急需解決的最現(xiàn)實(shí)問題。田間有多種黃化表現(xiàn)形式,在我國(guó),通常以葉基部褪綠為典型癥狀,在美國(guó),佛羅里達(dá)州則以斑駁葉為判斷依據(jù)。為了闡明基部褪綠葉片和斑駁葉片哪個(gè)更具有田間癥狀診斷依據(jù),以及黃龍病在不同癥狀中分布情況,本研究首次選用“紅鼻子果”樹為研究對(duì)象,將“紅鼻子果”樹作為黃龍病標(biāo)準(zhǔn)樹,比較柑橘黃龍病在基部褪綠葉片、斑駁葉片以及在不同癥狀葉片中的分布,為暗處理檢測(cè)技術(shù)提供更全面的采樣依據(jù),同時(shí)為田間診斷提供技術(shù)支持。為了闡明在黑暗條件下不同季節(jié)健康奧林達(dá)夏橙葉片與感黃龍病奧林達(dá)夏橙葉片淀粉含量的變化以指導(dǎo)田間碘-淀粉法檢測(cè)柑橘黃龍病,本研究將“紅鼻子果”樹作為黃龍病標(biāo)準(zhǔn)樹,健康植株采自無毒苗圃,以夏橙葉片為材料,分別進(jìn)行T=8:00暗處理Oh、24h、48h、72h;T=12:00 暗處理 Oh、24h、48h、72h;T=17:00 暗處理 Oh、24h、48h、72h處理,利用暗處理檢測(cè)技術(shù)以及熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)鑒定不同暗處理的樣本,同時(shí)進(jìn)行了碘-淀粉法與暗... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：155 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１柑橘黃龍病癥狀識(shí)別??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｙｐｉｃａｌ?ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?Ｃｉｔｒｕｓ?Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ??病樹的樹勢(shì)弱，對(duì)極端溫度的適應(yīng)性較差［３５］

每個(gè)品種柑橘樹３個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)選擇一棵樹，每棵樹采集基部褪綠葉??片６片和斑駁葉片６片。??采集的葉片以葉片中脈為基準(zhǔn)，剪切成左、右半片葉和中脈３部分（圖２－２），??葉片中脈用于實(shí)時(shí)熒光定量ＰＣＲ檢測(cè)。???＇ｌｌ??ｉｉｙ??圖２－２葉片分解圖??Ｆｉｇ．２－２?Ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｌｅａｆ??１．２．２不同癥狀樣本采集??“紅鼻子果”樹５棵，每個(gè)季節(jié)采樣１次，采樣時(shí)，每棵樹剪取出現(xiàn)黃化??癥狀枝條８?jìng)�(gè)，每個(gè)枝條從上至下至少選擇５片葉，將葉片剪下用自來水沖洗干??凈，并拍照記錄，葉片樣品放置于－２０°Ｃ冰箱中保存。??１．２．３柑橘葉片分類??根據(jù)柑橘葉片的黃化表現(xiàn)將葉片分為４類：斑駁類、黃化類、缺素類和其他??癥狀。其中斑駁類包括基部斑駁、典型斑駁、非典型斑駁、輕微斑駁４種；黃化??類包括葉尖黃化、均勻黃化、基部黃化、葉緣黃化、脈間黃化、葉脈黃化、半邊??黃化７種；缺素類包括缺鎂狀、缺鋅狀和缺鐵狀３種；其他癥狀包括蟲害、潰瘍??病、綠島、正常４種（表２－３）。??１７??

Ｉ?ｉ?ｅｂ？：?■■??Ｈ?－?ｊｆｉ」??圖３－１暗處理檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟圖??Ｆｉｇ．３－１?Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ?ｏｆ?ｄａｒｋ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ??１．２．６暗處理檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)??葉片用海綿砂塊打磨葉片后，用酒精脫色，再用２％碘酊染色，若呈現(xiàn)成片??的黑色或深藍(lán)色則表示此葉片已感染黃龍病，樣品判斷為陽(yáng)性；若恢復(fù)到葉片原??來顏色或變?yōu)闇\咖啡色，則表明葉片沒有感染黃龍病，樣品判斷為陰性。判斷標(biāo)??準(zhǔn)如圖３－２。??圖３－２暗處理檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)??Ｆｉｇ．３－２?Ｃｒｉｔｅｒｉａ?ｆｏｒ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ?ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ｄａｒｋ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??注：左側(cè)為陽(yáng)性樣品檢測(cè)結(jié)果圖，右側(cè)為陰性樣品檢測(cè)結(jié)果圖??１．２．７數(shù)據(jù)分析??（１）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]Candidatus liberibacter asiaticus誘導(dǎo)的柑橘轉(zhuǎn)錄組學(xué)及蛋白組學(xué)研究[D]. 鐘云.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012

碩士論文
[1]黃龍病菌對(duì)寄主植物淀粉代謝相關(guān)酶的影響及檢測(cè)技術(shù)研究[D]. 霍斐爾.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]湖南柑橘黃龍病檢測(cè)及DNA片段克隆[D]. 王春梅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3322329