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茉莉酸/乙烯途徑參與調(diào)控玉米莖腐病/粒腐病抗性的研究

發(fā)布時間:2021-07-28 06:44
  由禾谷鐮刀菌引起的玉米莖腐病和黃曲霉引起的玉米粒腐病是玉米重要的病害,對玉米的產(chǎn)量和質(zhì)量影響很大,目前對玉米莖腐病/粒腐病的抗性基因的克隆還很滯后,具體的機制研究的還不夠清楚。而植物激素在植物的生長發(fā)育和響應外界刺激的過程中發(fā)揮非常重要的作用,其中,茉莉酸及其衍生物在調(diào)控植物生長發(fā)育和防御反應過程中的功能已經(jīng)被廣泛的研究,但茉莉酸途徑在玉米莖腐病抗性中的功能研究還很少,機制更不清楚。為了了解茉莉酸途徑在玉米莖腐病抗性中的功能,我們首先對玉米全基因組中的JAZ基因做了生物信息學和組織表達分析,發(fā)現(xiàn)玉米中一共有23個JAZ基因,分布在8條染色體上;多序列對比和基序分析發(fā)現(xiàn)玉米JAZ基因包含兩個保守功能域,TIFY功能域和Jas功能域;進化樹分析將23個JAZ基因分為10個組;表達分析發(fā)現(xiàn)JAZ基因在玉米的不同生育時期具有不同的表達模式。利用酵母雙雜(Y2H)驗證JAZ基因和COI1基因的互作發(fā)現(xiàn),玉米中存在JAZ和COI1互作核心模塊,且該互作依賴于Coronatine(COR);用ZmJAZ17作為“Bait”對用玉米接種禾谷鐮刀菌莖構建的酵母cDNA文庫進行篩選,獲得一個與ZmJAZ1... 

【文章來源】:南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

茉莉酸/乙烯途徑參與調(diào)控玉米莖腐病/粒腐病抗性的研究


圖1-2?JA信號途徑??當植物體處于正常的生理環(huán)境時,體內(nèi)JAs水平很低,JAZs結合MYC2并召集共阻遏蛋白NINJA、TPL抑制??

合子,酵母,示例,液體培養(yǎng)基


2L?三角瓶,再加入?45ml?2xYPDA?液體培養(yǎng)基(含?50[ig/ml?kanamycin),40rpm?30°C??搖20-24h;?20h后,取一滴培養(yǎng)液在激光共聚焦顯微鏡下觀察是否有合子(zygotes)??出現(xiàn)(圖2-1),如果沒有繼續(xù)搖4個小時,如果有,則〗000g?lOmin離心;用50ml??0.5xYPDA液體培養(yǎng)基洗三角瓶2次,再用兩次的液體去懸浮沉淀細胞,lOOOglOmin??離心,去上清,用10ml?0.5xYPDA液體培養(yǎng)基懸浮,總體積約11.5ml;從中取出一??部分,稀釋10、100、1000、10000倍到100W,每一個稀釋濃度都涂布到SD/-Trp、??SD/-Leu、SD/-Leu/-Trp?(DDO)?100mm平板上,30°C培養(yǎng)3-5天;剩余的菌液涂布??到?SD/-Leu/-Trp/X/A?(DDO/X/A)?150mm?平板上,每個平板涂?20(^1,30°C培養(yǎng)?3-5??天。用牙簽將DDO/X/A平板上的藍色菌落轉移到高強度選擇培養(yǎng)基QDO/X/A平板上,??30°C培養(yǎng)?3-5?天(圖?2-2)。??用牙簽挑�。眩模希兀疗桨迳献兯{的菌落到300^1?SD/-Leu/-Trp/-His液體培養(yǎng)基,??250rpm30°C

互作,液體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基,強度


2L?三角瓶,再加入?45ml?2xYPDA?液體培養(yǎng)基(含?50[ig/ml?kanamycin),40rpm?30°C??搖20-24h;?20h后,取一滴培養(yǎng)液在激光共聚焦顯微鏡下觀察是否有合子(zygotes)??出現(xiàn)(圖2-1),如果沒有繼續(xù)搖4個小時,如果有,則〗000g?lOmin離心;用50ml??0.5xYPDA液體培養(yǎng)基洗三角瓶2次,再用兩次的液體去懸浮沉淀細胞,lOOOglOmin??離心,去上清,用10ml?0.5xYPDA液體培養(yǎng)基懸浮,總體積約11.5ml;從中取出一??部分,稀釋10、100、1000、10000倍到100W,每一個稀釋濃度都涂布到SD/-Trp、??SD/-Leu、SD/-Leu/-Trp?(DDO)?100mm平板上,30°C培養(yǎng)3-5天;剩余的菌液涂布??到?SD/-Leu/-Trp/X/A?(DDO/X/A)?150mm?平板上,每個平板涂?20(^1,30°C培養(yǎng)?3-5??天。用牙簽將DDO/X/A平板上的藍色菌落轉移到高強度選擇培養(yǎng)基QDO/X/A平板上,??30°C培養(yǎng)?3-5?天(圖?2-2)。??用牙簽挑�。眩模希兀疗桨迳献兯{的菌落到300^1?SD/-Leu/-Trp/-His液體培養(yǎng)基,??250rpm30°C

【參考文獻】:
期刊論文
[1]黃淮海地區(qū)籽粒機收玉米育種探討[J]. 郭慶辰,白光紅,劉洪泉,吳鵬昊,竇秉德.  農(nóng)業(yè)科技通訊. 2015(09)
[2]玉米主要病害抗性遺傳研究進展[J]. 徐凌,左為亮,劉永杰,劉青青,陶永富,徐明良,葉建榮.  中國農(nóng)業(yè)科技導報. 2013(03)
[3]分離自小麥赤霉病和玉米莖基腐病的禾谷鐮孢菌的致病性研究[J]. 張志博,高增貴,張小飛,莊敬華,隋鶴.  遼寧農(nóng)業(yè)科學. 2010(06)
[4]玉米青枯病病原菌研究現(xiàn)狀[J]. 梅麗艷.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學. 2003(05)

碩士論文
[1]棉花GhWD40基因的克隆及功能驗證[D]. 李潔.華中農(nóng)業(yè)大學 2013
[2]玉米TIFY家族ZmJAZ14基因的功能驗證[D]. 孫程.中國農(nóng)業(yè)科學院 2013
[3]擬南芥WD-40重復蛋白AtARCA和AtAGB1對干旱脅迫信號響應機理的研究[D]. 閆誠.揚州大學 2005



本文編號:3307439

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