家蠶二分濃核病毒（Bombyx mori bidensovirus,BmBDV）歸屬于新設(shè)定的二分DNA病毒科二分濃核病毒屬,是目前唯一一個編碼DNA聚合酶的單鏈二分體DNA病毒。該病毒曾歸屬于細(xì)小病毒科濃核病毒亞科,與家蠶濃核病毒Ⅰ相似,病毒粒子為二十面體非囊膜包裹結(jié)構(gòu),主要感染家蠶中腸柱狀上皮細(xì)胞,并引發(fā)家蠶濃核癥。Bm BDV基因組包括兩個節(jié)段的單鏈DNA分子VD1 6.6 kb和VD26.0 kb,獨立包裝。BmBDV NS1由VD1-ORF2編碼,具有316個氨基酸殘基,其理論分子量大小為36 KDa,等電點8.70,生物信息學(xué)結(jié)果表明Bm BDV NS1蛋白與細(xì)小病毒NS1蛋白同源。先前的研究發(fā)現(xiàn)NS1蛋白是一個多功能蛋白,具有ATPase、解旋酶及綁定特定DNA序列的活性。然而,該蛋白的表達(dá)模式及其與宿主或病毒蛋白的相互作用還未闡明。在本研究中,我們首先設(shè)計了12條含12個氨基酸的短肽抗原,制備NS1的單克隆抗體,其中一個抗體具有較高的特異性和效價,能特異識別大腸桿菌中表達(dá)的NS1和病毒感染的家蠶中腸中的NS1,抗原表位為DIPPEEYRELRT。然后分析了ns1基因在病... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

家蠶感染BmBDV后的病理現(xiàn)象[8]

編碼非結(jié)構(gòu)蛋白 NS3，VD2-ORF2 包括 3483 nts，編碼次要結(jié)構(gòu)蛋白 P133（其基因組結(jié)構(gòu)圖1.2 所示）。此外，通過序列分析發(fā)現(xiàn)，在這些 ORFs 的上下游區(qū)域都存在有各類保守的啟動子元件 TATA 盒子、CAGT 盒子和多聚的腺苷酸化信號序列[7, 10, 11]。BmBDV 是動物病毒中唯一的具有兩個節(jié)段的單鏈 DNA 基因組結(jié)構(gòu)且編碼DNA 聚合酶的病毒[12]，并且該病毒還具有不同于其相似病毒細(xì)小病毒基因組結(jié)構(gòu)，復(fù)制模式也未可知。因此，研究 BmBDV 復(fù)制相關(guān)蛋白對研究該病毒的復(fù)制機制具有重要意義。

家蠶二分濃核病毒 NS1 蛋白表達(dá)分析及其互作蛋白研究SKPSSLISNISSPST）。T45 是一個堿性的絲氨酸/蘇氨酸激酶的磷酸化位點Baso-ST-kin，Basophilic serine/threonine kinase group），其保守氨基酸序列為QKSAKRLTISSLESG）。Y160 是一個絡(luò)氨酸激酶磷酸化位點（Y-kin，Tyrosineinase group），其保守氨基酸序列為（SKFCEALYSIFTMSD）及 Y116 是一個SH2，Src homology 2 group）結(jié)構(gòu)的酪氨酸位點，其保守氨基酸序列為INYQEYYYEEV NNRL）。SH2（Src 同源域 2）結(jié)構(gòu)域是 Src 癌蛋白和許多他細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白質(zhì)中結(jié)構(gòu)保守的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域[14, 15]，SH2 結(jié)構(gòu)域和含有些結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)與其他蛋白質(zhì)上的磷酸化酪氨酸殘基相互作用，有助于受體氨酸激酶途徑的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（如圖 1.5）�？傊�，NS1 結(jié)構(gòu)的多樣性，保證了 NS1白功能的多樣性（如圖 1.6）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]家蠶二分濃核病毒NS1蛋白的表達(dá)及細(xì)胞毒性研究[D]. 徐五.江蘇大學(xué) 2016
[2]家蠶絲氨酸蛋白酶BmSP142在抗病毒侵染中的作用[D]. 周倩.江蘇大學(xué) 2016
[3]家蠶二分濃核病毒感染的家蠶連續(xù)病理變化研究[D]. 張曉龍.江蘇大學(xué) 2016



本文編號：3300757