發(fā)布時(shí)間：2021-07-08 12:23

　　病毒的基因組相對(duì)較小,蛋白編碼能力有限,而病毒的侵染、復(fù)制、移動(dòng)、致病等過(guò)程均需要一種或者幾種病毒蛋白的直接參與。在寄主與病毒長(zhǎng)期地共進(jìn)化過(guò)程中,病毒蛋白逐漸進(jìn)化出同時(shí)具有多種功能的特性,并參與病毒侵染循環(huán)的不同過(guò)程。大麥條紋花葉病毒（Barley stripe mosaic virus,BSMV）是一種ss（+）RNA病毒,基因組由α、β和γ3條RNA鏈組成。RNAα編碼的αa蛋白具有解旋酶（HEL）和甲基轉(zhuǎn)移酶（MET）結(jié)構(gòu)域,是病毒的復(fù)制酶大亞基;RNAβ編碼病毒的外殼蛋白CP和病毒的運(yùn)動(dòng)相關(guān)蛋白TGBs,RNAy編碼的γa具有保守的GDD基序,是病毒的復(fù)制酶小亞基。γb是一個(gè)分子量為17 kDa的富含半胱氨酸的蛋白,具有致病決定因子、種傳相關(guān)因子、本生煙上的系統(tǒng)運(yùn)動(dòng)決定因子和基因沉默抑制子等多種功能,但其與BSMV其它蛋白間的相互作用并協(xié)同調(diào)控病毒的復(fù)制和運(yùn)動(dòng)的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。前人的研究表明,在BSMV侵染的條件下γb蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)中,部份能特異性的定位于葉綠體上,但是關(guān)于其葉綠體定位的生物學(xué)功能卻是未知的。為此,利用瞬時(shí)表達(dá)、Pumilio為基礎(chǔ)的ssRNA可視化定位系... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：179 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－５?ＣａＭＶ的Ｐ６蛋白結(jié)構(gòu)域示意圖（Ｓｃｈｏｅｌｚ?ｅｔ?ａｌ．，２０１６）??圖屮Ｄ丨到Ｄ４指丨＞６負(fù)貴自身互作的區(qū)域：ｍｉｎｉ?ＴＡＶ是指Ｐ６激活翻譯所需要的最小的區(qū)域；兩個(gè)ＮＬＳ．?Ｎｕｃｌｅａｒ??

幫助病毒更好的建立侵染（ＸｉｏｎｇａｎｄＷａｎｇ．２０１３）。??馬鈴薯Ｙ病毒屬病毒編碼的ＣＰ蛋白大小不等．約為２８－４０?ｋＤａ，其大致可以被分成．．個(gè)區(qū)域，??Ｎ端和Ｃ端ｎｊ＇變區(qū)和中間較保守的核心區(qū)，Ｎ端和Ｃ端可變區(qū)暴露在病毒粒子的表面．并且Ｎ端??包含有主要的病毒特異性的農(nóng)位（ＳｈｕｋｌａａｎｄＷａｒｄ．丨９８９）。ＣＰ的蛋白結(jié)構(gòu)詳細(xì)見(jiàn)圖丨－１０所示。??ＤＡＧ?Ｒ?Ｄ??ｃｐ?ｉ１????Ｃｏｒｅ????Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ?Ｃ－ｔｅｒｍｉｎａｌ??圖１－１０馬鈴薯Ｙ病毒屬病毒編碼的ＣＰ蛋白的結(jié)構(gòu)示意圖（ＩＪ丨ｃｕｑｕｉ－Ｉｎｃｈｉｍａｅｔａｌ．．?２００１）??圖屮．４蚜蟲(chóng)傳播相關(guān)的保分基序ｄａｇ?ｆｌｒ兩個(gè)保‘、：ｒ的氨躲酸都已標(biāo)出，ｎ端及ｃ端的可變Ｋ＊堝充顏色．而屮間??的核心區(qū)用波浪形線條填充；??馬鈴薯Ｙ病毒屬病毒編碼的ＣＰ蛋丨＇丨主要的功能涉及到蚜蟲(chóng)傳播、病毒的胞間運(yùn)動(dòng)、病毒的??系統(tǒng)運(yùn)動(dòng)、病毒基因組ＲＮＡ的包裝及病毒基因組ＲＮＡ復(fù)制的調(diào)節(jié)等方面（Ｓｈｕｋｌａ?ａｎｄ?Ｗａｒｄ，?１９８９）－??很早以前，對(duì)能進(jìn)丨＋ｙ？蚜蟲(chóng)傳播的病毒分離物和不能進(jìn)行蚜蟲(chóng)傳播的病毒分離物的ｃｐ蛋ｎ進(jìn)行序??列分析，發(fā)現(xiàn)其Ｎ末端的高度保守的ＤＡＧ基序很重要，此：？：氨基酸基序?qū)τ谠摬《臼欠衲鼙谎??蟲(chóng)傳播起著決定性的作用（Ｈａｒｒｉｓｏｎ?ａｎｄ?Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，?１９８８）？隨著分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)步，進(jìn)一步對(duì)ＣＰ??蛋白的；氨基酸基序進(jìn)行突變分析，再次確定這－結(jié)果（Ａｔｒｅｙａ?ｅｔ?ａｌ．，１９９１；?Ａｔｒｅｙａ?ｅｔ?ａｌ．，１９９５：??Ｇａｌｏｎ?ｅｔ?ａｌ＂?１９９２；?Ｌｃｊｐｅｚ－Ｍ

中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文?第三章多功能蛋０Ｙｂ在ＢＳＭＶ的復(fù)制中的新功能解析??箭頭指示Ｓ標(biāo)蛋０條帶：圖３－１１Ｄ圖指接種不同的病毒突變體后３天，于ＣＬＳＭ下觀察的的結(jié)果；ｈ．下兩排分??別指注射不同濃度（０Ｄ６ＴＯ）的農(nóng)桿菌的處理，圖片頂端字符代表接種的病毒突變體名稱；??３．５．２?ＢＳＭＶ?ｙｂ抑制子活性基本完全喪失的病毒突變體仍能進(jìn)行較強(qiáng)的復(fù)制??為了明確詐的基因沉默抑制活性在病毒的復(fù)制中發(fā)揮的作用，希望能找到相應(yīng)的Ｙｂ蛋白的??突變體，這種突變體一方面要求是其抑制子活性完全或大部分喪失，另一方面還能與病毒的復(fù)制??酶ａａ發(fā)生互作。通過(guò)閱讀早期關(guān)于Ｙｂ的文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)突變體ＹｂＭ２７＆?ＹｂＮｅ，這兩個(gè)突變體??抑制子活性基本完全喪失（ＢｒａｇｇａｎｄＪａｃｋｓｏｎ，２００４），原因是突變體Ｙｂｉｍ蛋白的Ｃ端不能進(jìn)行同??源互作，而ＹｂＮＣ則是蛋白上的六個(gè)點(diǎn)突變導(dǎo)致蛋白的構(gòu)象發(fā)生了改變。為了尋找相應(yīng)的抑制子活??性基本喪失的點(diǎn)突變，以ＹｂＮＣ上的六個(gè)點(diǎn)突變?yōu)榛A(chǔ)，分別構(gòu)建了?Ｙｂｌｌ３〇Ｇ、ｙｂＭ５?（Ｉ１０２Ｇ，?Ｌ１０５Ｇ，??Ｍ１０９Ｇ，?Ｌ１１２Ｇ?和?Ｍ１２０Ｇ）及?ｙｂＭ７?（Ｉ１０２Ｇ，?Ｌ１０５Ｇ，?Ｍ１０９Ｇ，?Ｌ１１２Ｇ，?Ｍ１２０Ｇ，?Ｖ１２７Ｇ?和?Ｉ１３０Ｇ）突??變體（如圖３－１２Ａ），然后測(cè)試其相應(yīng)的抑制子活性。??Ａ?Ｂ?ｓＧＦＰ???ｐｇｄ?ＱＨ３＞—０???ｆ?￥??ｐＧＤ－ｓＧＦＰ?Ｉ?３５Ｓ?ｓＧＦＰ?ｈｍ?????Ｊｒ?ａｎｔｉ?ＧＦｐ??ｐｃＤ－ｙｂ?ｒ＾￣Ｖｊ?ｖｂ?ｉ－ｍ?＿＿＿＿＿＿＿＿＿??ＰＧＤ－Ｙｂ丨ｕＧ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大麥條紋花葉病毒中國(guó)株基因組RNA1的全長(zhǎng)序列分析[J]. 孫現(xiàn)超,邱并生.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(07)
[2]大麥條紋花葉病毒北京分離物的鑒定[J]. 孫現(xiàn)超,安德榮,青玲,楊水英.  西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2007(10)
[3]大麥條紋花葉病毒新疆分離物是三組分RNA病毒[J]. 彭學(xué)賢,蔡發(fā)興,孫薇,莽克強(qiáng).  病毒學(xué)報(bào). 1986(03)
[4]新疆大麥條紋花葉病毒的研究——Ⅰ.病毒株系類(lèi)型的鑒定及核酸的體外翻譯[J]. 彭學(xué)賢,蔡文啟,趙淑珍,莽克強(qiáng).  病毒學(xué)報(bào). 1985(02)
[5]大、小麥條紋花葉病毒病的研究[J]. 張?jiān)录?  浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 1984(02)
[6]大麥條紋花葉病毒的研究[J]. 王志民,李維琪,趙民安,馮貢澤,尼莎,秦偉,李國(guó)英,謝浩.  微生物學(xué)報(bào). 1981(04)
[7]大麥條紋花葉病毒（BSMV）在新疆的發(fā)生[J]. 謝浩,王志民,李維琪,尼沙.  植物病理學(xué)報(bào). 1981(01)
[8]新疆春麥種子帶大麥條紋花葉病毒調(diào)查[J]. 李國(guó)英,汪國(guó)發(fā).  新疆農(nóng)業(yè)科學(xué). 1981(06)
[9]種傳大小麥病毒病的研究（Ⅰ）——大麥條紋花葉病毒在我國(guó)的證實(shí)[J]. 于善謙,王鳴岐,陳仲宜,張若平.  復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 1980(04)
[10]新疆小麥上分離到大麥條紋花葉病毒[J]. 謝浩,王志民,李維琪,尼沙,李國(guó)英,余俊杰.  微生物學(xué)報(bào). 1980(03)



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