小麥條銹病是由條形柄銹菌（Puccinia striiformis f.sp.tritici）侵染引起的一種嚴重的小麥真菌病害。小麥條銹病在中國的危害范圍很廣,對小麥的生產(chǎn)造成嚴重威脅,因此,培育和推廣抗病品種是預防和控制條銹病最有效的措施。Yr26基因是從南京農(nóng)業(yè)大學細胞遺傳所培育的普通小麥-簇毛麥易位系材料中挖掘出的抗條銹病基因,該基因曾對中國條銹菌優(yōu)勢小種具有有效抗性并在生產(chǎn)上發(fā)揮了巨大作用,但這幾年發(fā)現(xiàn)其抗性被新小種所克服。Ma等（2001）研究發(fā)現(xiàn)該基因由顯性單基因控制,并將其定位于1B上,同時根據(jù)系譜分析推測該基因可能來自初始雜交親本之一圓錐小麥γ-80。王春梅等（2008）將Yr26定位于小麥1B染色體的缺失系C-1BL-6-0.32內(nèi),Zhang等（2013）等通過構(gòu)建高密度遺傳圖譜,將Yr26定位到CON-4和CON-12這兩個分子標記之間,它們與Yr26的遺傳距離分別為0.08 cM和0.17cM。由于Yr26定位于小麥1B染色體近著絲粒區(qū)域,該區(qū)域重組率低,給圖位克隆帶來了很大困難。本研究嘗試綜合利用表達譜基因芯片、SNP芯片和轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù),同時結(jié)合精細定位的信... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２夏孢子侵染過程（Ｃｈｅｎ以以．，２０１４）??

?一???互作機制解析打下基礎。由于小麥基因組龐大，｝定位于小麥１Ｂ染色體近著絲粒區(qū)??域，該區(qū)域重組率較低，通過圖位克隆的方法對斤２（５基因進行克隆比較困難。為此，??本研究利用表達譜基因芯片技術(shù)、ＳＮＰ芯片技術(shù)和轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)，并結(jié)合精細??定位的信息，通過比較基因組的方法篩選位于ｒ／＊２（５區(qū)段的候選基因并對其進行克隆分??析，同時利用病毒誘導基因沉默技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)驗證這些基因的功能，為｝＞２６介導??的小麥抗條銹病分子機理研究提供依據(jù)。??９技術(shù)路線??本研究利用ＳＮＰ芯片技術(shù)和轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)篩選出位于｝＞２６區(qū)段內(nèi)的功能基因，??對這些基因進行表達分析和克隆分析，同時設計標記，以期對｝＞２（５區(qū)段進行加密。同??時利用基因芯片技術(shù)獲得的抗感材料受條銹菌誘導前、后的基因表達譜，篩選出差異??表達基因，并結(jié)合精細定位的結(jié)果，篩選出候選基因并進行了克隆分析，并利用??轉(zhuǎn)基因技術(shù)和病毒誘導基因沉默技術(shù)對其功能進行研究。??，９２Ｒ１３７筠揚１５８??

０１２３４５６７?８９??圖４－１小麥條銹病苗期反應型的分級標準??Ｆｉｇｕｒｅ?４－１?Ｓｃａｌｅ?ｏｆ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?Ｐｓｔ?ｐａｔｈｏｇｅｎ?ｏｎ?ｗｈｅａｔ?ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ??．７?轉(zhuǎn)基因功能分析??．７．１受體材料準備??轉(zhuǎn)基因受體小麥揚麥１５８種植于南京農(nóng)業(yè)大學江浦試驗基地，待植株開花后１４天、幼胚大小約為１ｍｍ時大量取穂。在實驗室將種子剝出，用７０％酒精表ｌｍｉｎ后棄廢液，之后用加入１５％的ＮａＣＩＯ，置于搖床上搖丨Ｏｍｉｎ，棄廢液后用沖洗４－５次。在超凈工作臺上用解剖刀或者鑷子剝肝，胚的盾片朝上放于誘上，２５°Ｃ暗培養(yǎng)一周后準備基因槍轟擊。??．７．２培養(yǎng)基的配置??轉(zhuǎn)化所用培養(yǎng)基：??

【參考文獻】：
期刊論文
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[6]小麥條銹菌夏孢子階段核相狀況的研究[J]. 康振生,李振岐,商鴻生.  植物病理學報. 1994(01)

博士論文
[1]幾個小麥品種（系）抗條銹基因的遺傳分析和分子作圖[D]. 周新力.西北農(nóng)林科技大學 2011
[2]小麥抗條銹病基因Yr26的分子標記及黑麥1R、鵝觀草1Rk～（#1）與簇毛麥1V和6VS特異分子標記的開發(fā)[D]. 王春梅.南京農(nóng)業(yè)大學 2007

碩士論文
[1]小麥抗條銹病Yr26相關(guān)基因的篩選和克隆[D]. 邢書娟.南京農(nóng)業(yè)大學 2015



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