油菜根腫病是由蕓薹屬根腫菌（Plasmodiophora brassica）侵染引起的一類土傳病害,是油菜上發(fā)生的主要病害之一。本文針對前期篩選到的2株生防細菌F85和T113,通過16S r DNA、gyr A和22個看家基因序列分析鑒定菌株的分類地位,對發(fā)酵條件進行優(yōu)化,評價2株生防菌在溫室和大田條件下的生防效果,采用UPLC、LC-MS和基因組預(yù)測等方法分析生防菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì),以及通過RNA-seq技術(shù)對經(jīng)發(fā)酵液處理的擬南芥進行轉(zhuǎn)錄組分析,探究其生防機制。主要研究結(jié)論如下:（1）采用16S r DNA、gyr A和22個看家基因進行系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建,將F85和T113分別鑒定為貝萊斯芽孢桿菌Bacillus velezensis和解淀粉芽孢桿菌B.amyloliquefaciens。對兩株生防菌進行發(fā)酵條件優(yōu)化,獲得F85最優(yōu)培養(yǎng)基為:1%蔗糖,0.3%酵母膏,0.3%酵母提取物,0.5%氯化鈉;最優(yōu)發(fā)酵條件為:溫度37℃,酸堿度8,接菌量5%,裝液量120 ml/250ml,轉(zhuǎn)速150-200 r/min,時間48h;T113最優(yōu)發(fā)酵條件為:2%葡萄糖,0.5%蔗糖,0.5%酵... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹

兩株生防細菌F85和T113對油菜根腫病生防潛能研究19圖2-1基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-1Phylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceof16SrDNA圖2-2gyrA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-2PhylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceofgyrA

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文20圖2-3基于22個看家基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-3Phylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceof22housekeepinggenes2.2生防菌F85和T113發(fā)酵條件優(yōu)化2.2.1生防菌F85和T113菌量與吸光度的標(biāo)準曲線通過稀釋平板計數(shù)法測定菌株F85和T113的菌量，將菌量與原液稀釋不同倍數(shù)的吸光度建立坐標(biāo)方程。結(jié)果表明（圖2-4），F(xiàn)85和T113的菌量均與OD600呈顯著線性相關(guān)，F(xiàn)85標(biāo)準曲線為y=1.2476x+7.0111，R2=0.9821；T113標(biāo)準曲線為y=1.0091x+7.0755，R2=0.988。后續(xù)用OD600計算F85和T113發(fā)酵液中的含菌量。

【參考文獻】：
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本文編號：3247601