油菜根腫病是由蕓薹屬根腫菌（Plasmodiophora brassica）侵染引起的一類土傳病害,是油菜上發(fā)生的主要病害之一。本文針對(duì)前期篩選到的2株生防細(xì)菌F85和T113,通過16S r DNA、gyr A和22個(gè)看家基因序列分析鑒定菌株的分類地位,對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,評(píng)價(jià)2株生防菌在溫室和大田條件下的生防效果,采用UPLC、LC-MS和基因組預(yù)測(cè)等方法分析生防菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì),以及通過RNA-seq技術(shù)對(duì)經(jīng)發(fā)酵液處理的擬南芥進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組分析,探究其生防機(jī)制。主要研究結(jié)論如下:（1）采用16S r DNA、gyr A和22個(gè)看家基因進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建,將F85和T113分別鑒定為貝萊斯芽孢桿菌Bacillus velezensis和解淀粉芽孢桿菌B.amyloliquefaciens。對(duì)兩株生防菌進(jìn)行發(fā)酵條件優(yōu)化,獲得F85最優(yōu)培養(yǎng)基為:1%蔗糖,0.3%酵母膏,0.3%酵母提取物,0.5%氯化鈉;最優(yōu)發(fā)酵條件為:溫度37℃,酸堿度8,接菌量5%,裝液量120 ml/250ml,轉(zhuǎn)速150-200 r/min,時(shí)間48h;T113最優(yōu)發(fā)酵條件為:2%葡萄糖,0.5%蔗糖,0.5%酵... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：131 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹

兩株生防細(xì)菌F85和T113對(duì)油菜根腫病生防潛能研究19圖2-1基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-1Phylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceof16SrDNA圖2-2gyrA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-2PhylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceofgyrA

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文20圖2-3基于22個(gè)看家基因序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.2-3Phylogenetictreebasedonthepartialnucleotidesequenceof22housekeepinggenes2.2生防菌F85和T113發(fā)酵條件優(yōu)化2.2.1生防菌F85和T113菌量與吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線通過稀釋平板計(jì)數(shù)法測(cè)定菌株F85和T113的菌量，將菌量與原液稀釋不同倍數(shù)的吸光度建立坐標(biāo)方程。結(jié)果表明（圖2-4），F(xiàn)85和T113的菌量均與OD600呈顯著線性相關(guān)，F(xiàn)85標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.2476x+7.0111，R2=0.9821；T113標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.0091x+7.0755，R2=0.988。后續(xù)用OD600計(jì)算F85和T113發(fā)酵液中的含菌量。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]一株辣椒炭疽病生防芽孢桿菌的篩選[J]. 程歡歡,姚偉偉,彭麗娟,李忠,謝鑫,丁海霞.  北方園藝. 2019(23)
[2]枯草芽孢桿菌菌株Czk1揮發(fā)性物質(zhì)的抑菌活性及其組分分析[J]. 梁艷瓊,唐文,董文敏,吳偉懷,李銳,習(xí)金根,譚施北,鄭金龍,黃興,陸英,賀春萍,易克賢.  南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(11)
[3]貝萊斯芽孢桿菌3A3-15生防和促生機(jī)制[J]. 劉雪嬌,李紅亞,李術(shù)娜,朱寶成,高同國.  河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019(03)
[4]一株枯草芽孢桿菌產(chǎn)抗菌肽培養(yǎng)基篩選及發(fā)酵工藝優(yōu)化的研究[J]. 張志焱,趙倩,于佳民,劉長(zhǎng)慶,徐海燕,谷巍.  中國畜牧獸醫(yī). 2019(04)
[5]煙草黑脛病生防芽孢桿菌的篩選及其田間防效[J]. 羅玉英,彭麗娟,丁繼林,付順,李雨.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(01)
[6]油菜及十字花科蔬菜苗期根腫病防治技術(shù)[J]. 劉勇,張蕾,黃小琴,黎懷忠,伍文憲,楊瀟湘,周西全.  四川農(nóng)業(yè)科技. 2018(09)
[7]解淀粉芽孢桿菌HZM9菌株發(fā)酵液的抑菌譜及穩(wěn)定性測(cè)定[J]. 胡忠亮,鄭催云,田興一,李警保,韓正敏,樊奔.  南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2017(03)
[8]湖北省十字花科根腫病發(fā)生與防治[J]. 方國斌,劉元明,朱國芳.  湖北植保. 2017(02)
[9]解淀粉芽孢桿菌B1619脂肽類抗生素的分離鑒定及其對(duì)番茄枯萎病菌的抑制作用[J]. 向亞萍,周華飛,劉永鋒,陳志誼.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(15)
[10]植物鈣調(diào)素結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子CAMTA/SR功能的研究進(jìn)展[J]. 曾后清,王國平,王慧中,林金星,杜立群.  植物生理學(xué)報(bào). 2015(05)

博士論文
[1]貝萊斯芽孢桿菌CC09防治小麥全蝕病菌侵染的機(jī)制[D]. 康星星.南京大學(xué) 2019
[2]根際促生解淀粉芽孢桿菌根際定殖和誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性的機(jī)理研究[D]. 劉云鵬.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2019
[3]芽孢桿菌促生抑菌物質(zhì)鑒定及機(jī)理研究[D]. 謝珊珊.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[4]硅提高豇豆銹病抗性機(jī)理及抗銹病分子標(biāo)記研究[D]. 李國景.浙江大學(xué) 2007

碩士論文
[1]貝萊斯芽孢桿菌TCS001發(fā)酵條件優(yōu)化及其生防作用研究[D]. 楊可.浙江農(nóng)林大學(xué) 2019
[2]水稻穗枯病菌的分離及品種內(nèi)源激素與抗病性關(guān)系研究[D]. 徐以華.廣西大學(xué) 2018
[3]芽孢桿菌對(duì)油菜根腫病和稻瘟病的生防潛能研究[D]. 何有為.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]芽孢桿菌所產(chǎn)揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)黃曲霉的抑制作用研究[D]. 屈璐璐.中南林業(yè)科技大學(xué) 2018
[5]海洋枯草芽孢桿菌產(chǎn)抗菌脂肽類化合物的分離純化及鑒定分析[D]. 劉佳欣.大連工業(yè)大學(xué) 2017
[6]兩株具有生防功能的根際細(xì)菌全基因組分析及聯(lián)合應(yīng)用[D]. 蘇翠珠.上海師范大學(xué) 2017
[7]地衣芽胞桿菌產(chǎn)桿菌肽的代謝及工藝優(yōu)化研究[D]. 鮑帥帥.湖北工業(yè)大學(xué) 2014
[8]球毛殼菌對(duì)油菜根腫病拮抗機(jī)制的研究[D]. 印容.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[9]解淀粉芽孢桿菌15-1-1發(fā)酵條件優(yōu)化及對(duì)辣椒根腐病防治效果初探[D]. 張雷.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[10]甘藍(lán)根腫病生防菌的篩選及防治效果測(cè)定[D]. 劉翠平.西南大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3247601