黃萎病作為棉花生產(chǎn)上一種危害嚴重的土傳真菌病害,在世界范圍內(nèi)造成了嚴重的經(jīng)濟損失。根際微生物與黃萎病的發(fā)生存在密切的聯(lián)系。本文在兩塊棉田分別選取中植棉2號和魯棉研28兩個棉花品種,以緊鄰的健株與病株為研究對象,水篩法和實時熒光定量PCR的方法定量分析健康與黃萎病發(fā)病棉花土壤中黃萎病菌和根際微生物數(shù)量的差異;借助高通量測序技術(shù)解析健株與病株間以及兩個品種間根際微生物群落的差異;涂布平板法從健康棉花根際分離可培養(yǎng)細菌,將室內(nèi)生防效果較好的菌株進行組合,溫室試驗驗證其對棉花黃萎病的防治效果。主要研究結(jié)果如下:1.棉花黃萎病嚴重程度不僅受土壤中微菌核密度顯著影響（P<0.05）,還受根際微生物的顯著影響（P<0.001）。黃萎病發(fā)生的嚴重度與根際真菌與根際細菌數(shù)量的比值呈顯著正相關(guān)（P<0.001）。2.高通量測序分析顯示,在門水平上,根際細菌占據(jù)主導(dǎo)地位的主要包括Proteobacteria、Firmicutes,在屬水平上的優(yōu)勢物種為Lactobacillus、Serratia;根際真菌在門水平上占主導(dǎo)地位的主要包括Ascomycota、Mucoromycota,在屬水平... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

棉花黃萎病維管束褐變癥狀Fig.2-1ThevascularbrowningsymptomsofcottonVerticilliumwilt

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章棉花黃萎病的發(fā)生與根際微生物豐度的關(guān)系11測到的Ct值為縱坐標做標準曲線，檢測范圍在5個數(shù)量級間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，最終的回歸方程為y=-3.402x+41.073，相關(guān)系數(shù)R2=0.988，擴增效率E=97%（圖2-2A）。真菌重組質(zhì)粒的最初質(zhì)量濃度為40.68ngμL-1，計算得質(zhì)�？截悢�(shù)為8.56×109copiesμL-1，稀釋到1.00×108copiesμL-1后，再進行十倍梯度稀釋得到濃度為1.00×104copiesμL-1-1.00×108copiesμL-1系列稀釋標準品，以計算得到的各濃度質(zhì)�？截悢�(shù)的對數(shù)值為橫坐標，以熒光定量檢測到的Ct值為縱坐標做標準曲線，檢測范圍在5個數(shù)量級間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，最終的回歸方程為y=-3.313x+40.524，相關(guān)系數(shù)R2=0.993，擴增效率E=100%（圖2-2B）。圖2-2實時熒光定量PCR檢測土壤根際細菌（A）、真菌（B）重組質(zhì)粒標準品的標準曲線Fig.2-2Standardcurveforsoilrhizospherebacteria(A)andfungi(B)assaydetectedbyRealtimequantitativePCR2.2.2土壤中大麗輪枝菌微菌核數(shù)量的測定兩塊棉田土壤中微菌核密度呈偏態(tài)分布（圖2-3），尤其是種植魯棉研28的棉田大部分微菌核密度小于每克土2個微菌核，中植棉2號棉田大部分樣品微菌核密度大于每克土2個微菌核小于每克土9個微菌核。魯棉研28棉田和中植棉2號棉田的微菌核密度分別為每克土0.0-15.3（中位數(shù)為1.85）和1.0-10.9（中位數(shù)4.8），全部120個土壤樣品中只有8個樣品的微菌核密度大于每克土10個微菌核，分別為每克土10.0、10.5、10.5、10.6、10.8、10.9、13.7和15.3個微菌核。圖2-3樣品中每克土中微菌核數(shù)目分布Fig.2-3ObservedVerticilliumdahliaemicrosclerotiapergramofsoilineachsamples

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章棉花黃萎病的發(fā)生與根際微生物豐度的關(guān)系11測到的Ct值為縱坐標做標準曲線，檢測范圍在5個數(shù)量級間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，最終的回歸方程為y=-3.402x+41.073，相關(guān)系數(shù)R2=0.988，擴增效率E=97%（圖2-2A）。真菌重組質(zhì)粒的最初質(zhì)量濃度為40.68ngμL-1，計算得質(zhì)粒拷貝數(shù)為8.56×109copiesμL-1，稀釋到1.00×108copiesμL-1后，再進行十倍梯度稀釋得到濃度為1.00×104copiesμL-1-1.00×108copiesμL-1系列稀釋標準品，以計算得到的各濃度質(zhì)粒拷貝數(shù)的對數(shù)值為橫坐標，以熒光定量檢測到的Ct值為縱坐標做標準曲線，檢測范圍在5個數(shù)量級間呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，最終的回歸方程為y=-3.313x+40.524，相關(guān)系數(shù)R2=0.993，擴增效率E=100%（圖2-2B）。圖2-2實時熒光定量PCR檢測土壤根際細菌（A）、真菌（B）重組質(zhì)粒標準品的標準曲線Fig.2-2Standardcurveforsoilrhizospherebacteria(A)andfungi(B)assaydetectedbyRealtimequantitativePCR2.2.2土壤中大麗輪枝菌微菌核數(shù)量的測定兩塊棉田土壤中微菌核密度呈偏態(tài)分布（圖2-3），尤其是種植魯棉研28的棉田大部分微菌核密度小于每克土2個微菌核，中植棉2號棉田大部分樣品微菌核密度大于每克土2個微菌核小于每克土9個微菌核。魯棉研28棉田和中植棉2號棉田的微菌核密度分別為每克土0.0-15.3（中位數(shù)為1.85）和1.0-10.9（中位數(shù)4.8），全部120個土壤樣品中只有8個樣品的微菌核密度大于每克土10個微菌核，分別為每克土10.0、10.5、10.5、10.6、10.8、10.9、13.7和15.3個微菌核。圖2-3樣品中每克土中微菌核數(shù)目分布Fig.2-3ObservedVerticilliumdahliaemicrosclerotiapergramofsoilineachsamples

【參考文獻】：
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本文編號：3240016