發(fā)布時間：2021-06-18 20:04

　　少孢節(jié)叢孢（Arthrobotrys oligospora）作為模式捕食線蟲真菌可以通過產(chǎn)生三維菌網(wǎng)捕捉并殺死線蟲,本論文初步研究了細胞色素P450基因AOL_s00215g21及4個次生代謝產(chǎn)物調(diào)控因子AOLs00043g51,AOL s00054g811,AOL_s00076g605,AOL_s00215g535的生物功能。通過運用生物信息學分析,在少孢節(jié)叢孢全基因組中篩選出5個候選基因,分別是細胞色素P450基因AOL_s00215g21,表觀遺傳調(diào)控因子AOL_s00043g51及AOL_s00076g605,全局調(diào)控因子AOL_s00054g811,信號轉(zhuǎn)導通路調(diào)控因子AOL_s00215g535。運用In-Fusion的方法構(gòu)建敲除載體,CaCl2/PEG介導的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化方式敲除這5個基因。通過潮霉素篩選驗證得到陽性轉(zhuǎn)化子,通過對其表型、生測和代謝圖譜實驗探究這5個基因的功能。發(fā)現(xiàn)與野生菌株相比,突變菌株△AOL<... 

【文章來源】：云南大學云南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：171 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１真菌次生代謝產(chǎn)物在生態(tài)中的角色（Ｍａｃｈｅ丨ｅｉｄＵＷ．，２０１６）??

ｇ．－ｘａｍｐｅｓ?ｏｓｅｃｏｎａｒｙ?ｍｅａｏｅｓ?ｐｒｏｕｃｅｙｕｎｇ實際上真菌產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物的能力被大大低估了。因為在不同的真菌物種??中有大量的次生代謝產(chǎn)物生物合成基因簇存在，但在標準培養(yǎng)條件下大多數(shù)是??沉默的，所以到目前為止只有相當少的一部分次生代謝產(chǎn)物被發(fā)現(xiàn)（Ｍａｃｈｅｌｅｉｄｔ??２０１６）。在過去的十年中很多學者都在研究次生代謝產(chǎn)物的調(diào)控機制，并致??力于鑒定出更多的新次生代謝產(chǎn)物，而這個領域中所取得的成績主要來自于激??活沉默次生代謝產(chǎn)物生物合成基因簇（Ｂｒａｋｈａｇｅ，２０１３；?Ｓａｎｃｈｅｚ?￡＞／?乂．，２０１２）。圖??

?２．２．２?４３ｇ５１蛋白的氨基酸序列分析??如圖２－３得知４３ｇ５１?的功能為ＳＰＲＹ?（ＳＰｌＡｋｉｎａｓｅ?ｏｆｒａｂｂｉｔ?Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ）??超家族。如圖２－４得知４３ｇ５１與其氨基酸序列同源性最高的為??的Ｓｅｔｌ復合元件，但除此之外與其同源性相近的大多是ＣｃｌＡ（Ｈｉｓｔｏｎｅ??３?ｌｙｓｉｎｅ?４?（Ｈ３Ｋ４）?ｍｅｔｈｙｌａｔｉｎｇ?ＣＯＭＰＡＳＳ?ｃｏｍｐｌｅｘ）；蛋白，因此推測?４３ｇ５１?的功??能應該也是如此。??１?ｍ?２Ｍ?…?５（１?Ｍｉ?Ｗ７??Ｉ?Ｉ?Ｉ?｜?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??Ｑｕｅｎ）?ｓｅｑ＊?■■■■■■■■■■■

【參考文獻】：
期刊論文
[1]捕食線蟲真菌的潮霉素抗性基因標記及其在土壤抑菌研究中的應用[J]. 徐進,莫明和,張克勤.  西南農(nóng)業(yè)學報. 2005(03)



本文編號：3237299