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櫻桃耐澇相關(guān)基因的克隆與表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-06-13 03:26
  櫻桃為薔薇科櫻屬落葉果樹,味美形嬌,營養(yǎng)豐富,經(jīng)濟(jì)效益高,是我國大面積栽培的高檔果品。但其根系淺,對(duì)環(huán)境變化反應(yīng)敏感,不耐澇。在櫻桃栽培過程中,由于降水不均、排水不良等因素,澇害時(shí)有發(fā)生,常造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。因此,采取各種手段,尤其是現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),進(jìn)行櫻桃耐澇性的遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新具有重要意義。本文以篩選出的耐澇櫻桃種質(zhì)’沂蒙山櫻’和敏澇櫻桃種質(zhì)’矮化櫻桃’為試材,克隆了與植物耐澇相關(guān)的PsERF和PsCIPK基因、與碳水化合物代謝和根系發(fā)生相關(guān)的PsPDC、PsADH、PsSUS、PsRAMY和PsEXP基因的cDNA序列,研究了淹水脅迫和恢復(fù)處理過程中上述基因在耐/敏澇櫻桃種質(zhì)中的時(shí)空表達(dá)特性,并通過分析櫻桃PsERF和PsCIPK基因與PsPDC、PsADH、PsSUS、PsR4MY和PsEXP基因在淹澇脅迫下表達(dá)情況的一致性和相關(guān)性,試圖探明櫻桃應(yīng)答淹澇脅迫的響應(yīng)途徑,闡明櫻桃種質(zhì)耐澇能力強(qiáng)弱差異的分子機(jī)理,確定調(diào)控櫻桃耐澇性的關(guān)鍵基因,為今后通過基因工程手段進(jìn)櫻桃耐澇性的分子遺傳改良與種質(zhì)創(chuàng)新奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1、以耐澇種質(zhì)’沂蒙山櫻’葉片為材料,采用RAC... 

【文章來源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:66 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

櫻桃耐澇相關(guān)基因的克隆與表達(dá)分析


圖2-1沂蒙山櫻(左)和矮化櫻桃(右)淹澇處理??Fig2-1?Waterlogging?treatment?of?Prunus?serrulata?*Yimeng,?(left)?and??'5

產(chǎn)物,基因,片段,方法


表示不同樣本中特定基因CT值的差異,即(待測組目的基因平均CT的平均CT值)-(對(duì)照組目的基因CT值-對(duì)照組M/n基因的平均C加樣誤差,用內(nèi)目的基因標(biāo)和w如因標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)差的平方和的平方目的基因2個(gè)數(shù)值的標(biāo)準(zhǔn)差,Aa為《^/?基因兩個(gè)數(shù)值的標(biāo)n2+Aa2),An=STDEV(Nl:N2),Aa=STDEV(Al:A2)。??正過誤差后,目的基因表達(dá)的相對(duì)含量。根據(jù)定義,對(duì)照樣本中的為1,然而相對(duì)于對(duì)照樣本,F為淹澇處理株樣本中該定基因表達(dá)E?(Fl,F3)?,?F1=2a(-AACT+A),F2=2a(-AACT-A),F3=2a(.在誤差影響下目的基因表達(dá)相對(duì)含量的標(biāo)準(zhǔn)差,o=STDEV?(Fl,F2,析??基因cDNA全長克隆及序列分析??基因cDNA序列的克隆??M?;V?5;?M??

序列,基因,非編碼區(qū),起始密碼子


3'和5’RACE獲得的序列結(jié)果使用DNAMAN進(jìn)行拼接,得到基因cDNA全長序列。??該cDNA全長1625bp,具有起始密碼子、完整的開放閱讀框(1149bp;)、終止密碼子、5'非??編碼區(qū)(151bp)、3'非編碼區(qū)(313bp)和p0ly(A)尾巴(12bp),共編碼?382?個(gè)氨基酸(圖2-4),??將其命名為PsMF。??1?ACATGGGGAG?AC?AAT?AA:?AAAAGCATT?TCTC?TT?T?TAACTCGC?T?TCG?TT?TOCAMACACM??61?AACC?A;?TOG?T?AT?ACAT?TT?TAS?TCTG?AfLAAATOCC?AGC?TT?T?TCG?AT?T?TTCCG?ACATCT?T?TT??121?CCAGCTGCAAJiG?TO:?TCTG?AS?AACGGC?AMAATGTG?TGG?AGG?TGC?TATAAT?ATCOG?ATT?T??I?HCGGAIISDF??181?CAT?AGCGOCGiiC?TOUG?TCAOGGCTC?A3CGCCGAC?TACCTC?TGGOCCGATCTCAAAAAATC??II?IAPTRSRLTADYLWPDLKKS??241?T?TCGGG?AMGOJG?TTC?TCGMGO:?ACTC?A;COCCGAAATCGTCGAC?TTAGACGACGA??31?SSGKRFSKPLSPEIVDLDDD??301?C?TTCGAGGC?TGAT?TTCCAGGAATTCMGGACGAGIC?TGATGTGGACGAAGAT

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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[2]甜櫻桃內(nèi)參基因的篩選[D]. 張芳明.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[3]蘋果MdCIPK6的基因克隆及其在逆境脅迫響應(yīng)中的作用[D]. 王榮凱.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[4]不同形態(tài)氮對(duì)甜櫻桃澇后恢復(fù)過程中生理生化特性影響的研究[D]. 李靜.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[5]青竹復(fù)葉槭耐水淹與耐低溫生理研究[D]. 李昳樂.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
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[7]澇害對(duì)櫻桃砧木生理生化特性的影響[D]. 王嘉艷.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]淹水脅迫下薏苡乙醇脫氫酶(ADH1)和丙酮酸脫羧酶(PDC1)基因cDNA片段的克隆及其表達(dá)的初步分析[D]. 吳功慶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào):3226897

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