豌豆蚜（Acyrthosiphon pisum）是首個公開基因組的不完全變態(tài)昆蟲,通過比較基因組學(xué)分析,人們發(fā)現(xiàn)豌豆蚜缺少應(yīng)對病原菌侵染的許多免疫相關(guān)基因,這些重要基因的缺失暗示了豌豆蚜具有獨特的免疫系統(tǒng)。我們前期研究指出活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）在豌豆蚜的免疫防御反應(yīng)中起重要作用,但是過量的ROS會對豌豆蚜自身造成氧化損傷。過氧化氫酶（Catalase,CAT）是生物體內(nèi)廣泛存在的一種關(guān)鍵的抗氧化酶,能夠?qū)⑸矬w產(chǎn)生的過氧化氫（H₂O₂）分解成H₂O和O₂。本研究通過RNA干擾技術(shù)對過氧化氫酶基因進(jìn)行沉默,初步研究ROS-豌豆蚜-病原菌三者之間的關(guān)系,探索過氧化氫酶在豌豆蚜免疫防御反應(yīng)中的作用。主要結(jié)果如下:1革蘭氏陽性菌藤黃微球菌（Micrococcus luteus）感染引起豌豆蚜體內(nèi)ROS的顯著上升,并且誘導(dǎo)豌豆蚜Catalase基因的上調(diào),這說明ROS和過氧化氫酶參與豌豆蚜對病原菌的免疫防御反應(yīng);2將Catalase基因沉默之后,豌豆蚜體內(nèi)H_... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 蚜蟲免疫
    1.2 ROS代謝
        1.2.1 ROS的種類
        1.2.2 ROS的產(chǎn)生
        1.2.3 Haber-Weiss反應(yīng)
        1.2.4 抗氧化系統(tǒng)
    1.3 抗氧化系統(tǒng)組分的分布
    1.4 過氧化氫酶結(jié)構(gòu)與種類
    1.5 過氧化氫酶與活性氧
    1.6 本研究的目的及意義
第二章 材料與方法
    2.1 試驗材料
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 實驗菌株
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑
    2.2 試驗方法
        2.2.1 豌豆蚜的細(xì)菌感染
        2.2.2 豌豆蚜總RNA的提取、純化、反轉(zhuǎn)
        2.2.3 dsRNA合成
        2.2.4 過氧化氫酶基因的干擾
        2.2.5 豌豆蚜體內(nèi)H_2O_2濃度檢測
        2.2.6 菌落數(shù)檢測（Colony forming unit, CFU）
        2.2.7 干擾后豌豆蚜存活率、細(xì)菌CFU數(shù)及H_2O_2濃度檢測
    2.3 數(shù)據(jù)分析及作圖
        2.3.1 qRT-PCR數(shù)據(jù)分析
        2.3.2 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 序列分析
    3.2 感染細(xì)菌后豌豆蚜的存活率
    3.3 感染細(xì)菌后豌豆蚜體內(nèi)細(xì)菌CFU數(shù)
    3.4 感染細(xì)菌后豌豆蚜H_2O_2水平變化
    3.5 感染細(xì)菌后過氧化氫酶基因表達(dá)量變化
    3.6 RNA干擾效率
    3.7 干擾過氧化氫酶后豌豆蚜H_2O_2水平變化
    3.8 干擾過氧化氫酶對細(xì)菌感染引起的豌豆蚜H_2O_2水平變化的影響
    3.9 干擾過氧化氫酶后豌豆蚜體內(nèi)細(xì)菌數(shù)變化
    3.10 干擾過氧化氫酶后豌豆蚜感染細(xì)菌后的存活率
第四章 討論與結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豌豆蚜體內(nèi)參與抵御細(xì)菌感染引起的氧化脅迫的過氧化物氧化還原酶2的鑒定及分子特性分析（英文）[J]. 張永棟,李君蘭,陳金紅,馬力,陳康康,呂志強(qiáng).  昆蟲學(xué)報. 2017(03)
[2]細(xì)菌感染引起的家蠶中腸免疫反應(yīng)研究（英文）[J]. Lei ZHANG,Yan-wen WANG,Zhi-qiang LU.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(10)



本文編號：3214013