目的本實驗以純化的中華蜜蜂囊狀幼蟲病毒（CSBV）作為抗原,免疫BALB/c小鼠,制備抗CSBV單克隆抗體,并對其效價、特異性和病毒中和能力進行檢測。在此基礎上,用制備的抗CSBV單克隆抗體作為診斷抗體,建立一種檢測CSBV的瓊脂擴散檢測方法。方法本實驗利用純化的CSBV作為抗原免疫Balb/c小鼠,經(jīng)過3次免疫后,小鼠斷尾采血測其血清效價,選擇效價較高的小鼠,在細胞融合前3⁴ d再加強免疫一次。取免疫小鼠脾淋巴細胞通過雜交瘤技術(shù)與SP2/0骨髓瘤細胞進行細胞融合,用間接ELISA篩選陽性細胞株并通過有限稀釋的方法進行3次亞克隆后,制備腹水型單克隆抗體。獲得能穩(wěn)定分泌抗CSBV的單克隆抗體,利用間接ELISA方法檢測抗體效價及其特異性。將以純化好的腹水單克隆抗體分別與CSBV互作后,接種于2³日齡中華蜜蜂幼蟲,通過觀察幼蟲死亡率鑒定抗體的中和作用。在此基礎上,以制備的抗CSBV單克隆抗體作為診斷抗體,,通過對瓊脂板配置條件、瓊脂擴散的觀察時間、CSBV的最佳稀釋濃度和抗CSBV單克隆抗體的稀釋度進行優(yōu)化,建立一種用于檢測CSBV的瓊脂擴散檢測... 

【文章來源】：錦州醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
前言
第一章 文獻綜述
    1.1 中蜂囊狀幼蟲病毒(CSBV)的研究概況與致病特性分析
    1.2 中蜂囊狀幼蟲病毒(CSBV)檢測技術(shù)的現(xiàn)狀
    1.3 單克隆抗體的概述
    1.4 瓊脂擴散檢測方法的探討
第二章 CSBV單克隆抗體的制備與鑒定
    2.1 材料與方法
    2.2 結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 中蜂囊狀幼蟲病毒瓊脂擴散檢測方法的建立
    3.1 材料與方法
    3.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
結(jié)論與創(chuàng)新點
參考文獻
致謝
個人簡介
攻讀學位論文期間發(fā)表文章



本文編號：3193401