棉蚜（Aphis20gossypii20Glover）屬半翅目（Hemiptera）蚜科（Aphididae）,是一種世界性分布的園藝和農(nóng)業(yè)作物害蟲,已報道的寄主植物有76科、285種。由于長期嗜食不同的寄主植物,形成了多種寄主生物型,其中主要包括棉花型棉蚜和黃瓜型棉蚜。棉蚜的寄主生物型轉(zhuǎn)換寄主后適合度大大降低或完全不能成活,目前對棉蚜寄主生物型形成的機(jī)制還缺乏合理的解釋。刺吸性昆蟲唾液效應(yīng)子蛋白在昆蟲與植物互作過程中扮演重要角色,我們推測棉蚜寄主生物型可能是由于不同生物型之間唾液效應(yīng)子蛋白的差異形成的。本文首先比較了黃瓜型棉蚜和棉花型棉蚜互轉(zhuǎn)寄主后的適合度,然后收集了兩種生物型的唾液蛋白和唾液腺,進(jìn)行唾液蛋白組和唾液腺轉(zhuǎn)錄組聯(lián)合分析,根據(jù)唾液蛋白的組成和基因表達(dá)差異,篩選出可能與寄主適應(yīng)性相關(guān)的疑似效應(yīng)子,并對其中的兩個進(jìn)行了功能驗(yàn)證。研究結(jié)果如下:1.黃瓜型和棉花型互換寄主后的適合度黃瓜型棉蚜可以在棉花上存活和建立種群,14天后種群數(shù)量增長10.7倍（在原寄主上增長19.5倍）,繁殖的后代的個體大小為正常的黃瓜型棉蚜的80%,體色變成黃綠色（正常黃瓜型棉蚜為墨綠色）。棉花型棉蚜在黃... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 :文獻(xiàn)綜述
    1.1 棉蚜的概述
        1.1.1 棉蚜的形態(tài)特征及危害
        1.1.2 棉蚜的生活史
    1.2 棉蚜寄主生物型現(xiàn)象及其形成機(jī)制
        1.2.1 棉蚜寄主生物型現(xiàn)象
        1.2.2 棉蚜寄主生物型形成機(jī)制
    1.3 植物韌皮部對刺吸式昆蟲的防御
        1.3.1 植物防御種類
        1.3.2 植物和植食性昆蟲的防御和反防御
    1.4 .蚜蟲唾液在昆蟲和植物互作中的作用
        1.4.1 蚜蟲取食特征
        1.4.2 蚜蟲唾液成分及作用
        1.4.3 效應(yīng)子
    1.5 本研究的目的與意義
第二章 黃瓜型和棉花型棉蚜互換寄主的適合度
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 轉(zhuǎn)接試驗(yàn)方法
        2.2.1 離體養(yǎng)殖棉蚜方法
        2.2.2 植株養(yǎng)殖棉蚜方法
        2.2.3 棉蚜的寄主轉(zhuǎn)接試驗(yàn)
    2.3 數(shù)據(jù)處理
    2.4 結(jié)果分析
        2.4.1 棉蚜的寄主轉(zhuǎn)接試驗(yàn)
    2.5 小結(jié)與討論
第三章 棉蚜唾液腺轉(zhuǎn)錄組和唾液蛋白組分析及疑似效應(yīng)子篩選
    3.1 供試材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 供試棉蚜的飼養(yǎng)
        3.2.2 棉蚜唾液腺的解剖
        3.2.3 棉蚜唾液蛋白的收集
        3.2.4 棉蚜唾液腺和唾液蛋白的測序分析
    3.3 結(jié)果和分析
        3.3.1 棉蚜唾液腺轉(zhuǎn)錄組分析
        3.3.2 棉蚜唾液腺蛋白組分析
        3.3.3 棉蚜疑似效應(yīng)子的篩選
    3.4 討論
第四章 棉蚜疑似效應(yīng)子Ag22814和Ag18451的功能驗(yàn)證
    4.1 供試材料
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 棉蚜Ag22814和Ag18415基因的克隆和序列分析
        4.2.2 熒光定量PCR(q RT-PCR)
        4.2.3 疑似效應(yīng)子蛋白的表達(dá)與組織定位
        4.2.4 利用RNAi技術(shù)對疑似效應(yīng)子功能驗(yàn)證
    4.3 數(shù)據(jù)分析
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 棉蚜Ag22814和Ag18415基因的克隆和序列分析
        4.4.2 Ag22814和Ag18415在不同寄主生物型棉蚜唾液腺中的表達(dá)差異
        4.4.3 Ag22814和Ag18415在黃瓜型棉蚜各齡期表達(dá)差異及組織定位
        4.4.4 Ag22814和Ag18415在寄主互換后的表達(dá)差異
        4.4.5 免疫抗體檢測技術(shù)驗(yàn)證Ag22814為唾液分泌蛋白
        4.4.6 飼喂ds RNA對 Ag22814和Ag18415 基因的表達(dá)水平的影響
        4.4.7 飼喂ds Ag22814和ds Ag18415 后棉蚜死亡率、繁殖量、個體大小
        4.4.8 RNAi干擾Ag22814和Ag18415 基因?qū)γ扪寥∈车挠绊?EPG)
    4.5 小結(jié)與討論
第五章 全文總結(jié)及創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號：3178879