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褐飛虱基因BphMIF1克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2021-05-08 17:24
  【目的】克隆水稻重要害蟲褐飛虱Nilaparvatalugens唾液蛋白基因BphMIF1,探析BphMIF1在響應(yīng)褐飛虱取食過程中的表達(dá)譜。【方法】采用RT-PCR法克隆了褐飛虱唾液蛋白基因BphMIF1,測(cè)序后對(duì)序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)對(duì)褐飛虱1-5齡若蟲及成蟲以及不同成蟲蟲體部位BphMIF1的表達(dá)量進(jìn)行分析,同時(shí)對(duì)BphMIF1進(jìn)行了原核表達(dá)分析。【結(jié)果】克隆得到BphMIF1基因,編碼119個(gè)氨基酸。qPCR結(jié)果表明BphMIF1基因在若蟲4齡期表達(dá)會(huì)迅速上調(diào),在成蟲的頭、胸、腹均有表達(dá),以腹部表達(dá)量最高。原核表達(dá)結(jié)果顯示褐飛虱BphMIF1基因以0.5mmol?L-1的IPTG作為誘導(dǎo)濃度,誘導(dǎo)時(shí)間為4h表達(dá)效果較好。【結(jié)論】BphMIF1基因在褐飛虱成蟲頭、胸、腹部均有表達(dá),在若蟲不同發(fā)育歷期其表達(dá)量有所差異且在4齡若蟲時(shí)期表達(dá)量有顯著上調(diào)。該結(jié)果可為BphMIF1在褐飛虱取食過程中的功能研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】:應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2020,57(03)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 供試?yán)ハx
    1.2 主要試劑和菌株
    1.3 基因克隆
    1.4 生物信息學(xué)分析
    1.5 BphMIF1基因的表達(dá)分析
    1.6 BphMIF1基因的原核表達(dá)
2 結(jié)果與分析
    2.1 BphMIF1基因的克隆
    2.2 BphMIF1基因序列分析
    2.3 BphMIF1基因的時(shí)空表達(dá)分析
    2.4 BphMIF1基因的表達(dá)量
    2.5 BphMIF1基因原核表達(dá)
3 結(jié)論與討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]植食性昆蟲適應(yīng)植物防御反應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 趙嬋,張蓬軍,余利星,俞曉平.  昆蟲學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]昆蟲唾液激發(fā)子和效應(yīng)子研究進(jìn)展[J]. 湯金榮,董少奇,張新橋,李為爭(zhēng),王高平,原國(guó)輝,郭線茹,趙曼.  華中昆蟲研究. 2018(00)
[3]唾液成分在刺吸式昆蟲與植物關(guān)系中的作用[J]. 嚴(yán)盈,劉萬學(xué),萬方浩.  昆蟲學(xué)報(bào). 2008(05)
[4]我國(guó)褐飛虱的若干研究進(jìn)展[J]. 黃水金,黃榮華.  江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2001(04)
[5]褐飛虱種群生命系統(tǒng)管理模型的研究[J]. 綦立正,黃方能,黃建義,李汝鐸.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào). 1991(03)



本文編號(hào):3175704

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