水果采后腐爛對(duì)全球經(jīng)濟(jì)都造成了巨大損失。造成水果采后腐爛的主要原因是由于病原菌侵染所引起的采后病害。蘋果采后主要病害之一的青霉病是由擴(kuò)展青霉（Penicillium expansum）引起的。利用拮抗酵母控制蘋果采后青霉病具有廣闊的應(yīng)用前景和發(fā)展?jié)摿�。但�?拮抗酵母在實(shí)際應(yīng)用過程中往往會(huì)受到氧化脅迫的影響而導(dǎo)致其生防效力下降。因此,如何提高拮抗酵母的氧化脅迫耐受性是提高其生防效力的關(guān)鍵問題之一�？箟难幔ňS生素C）是一種很好的還原劑,可以清除活性氧（ROS）,從而使得細(xì)胞在遭受氧化脅迫時(shí)受到保護(hù)。本研究通過在培養(yǎng)基中添加抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)卡利比克畢赤酵母（Pichia caribbica）,提高其對(duì)H₂O₂造成的氧化脅迫的耐受性,從而提高其對(duì)蘋果青霉病的防治效力;通過添加抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)氧化脅迫條件下的P.caribbica在蘋果表面的生長動(dòng)態(tài)、胞內(nèi)ROS的積累量以及抗氧化相關(guān)酶活的影響,闡明在氧化脅迫條件下,抗壞血酸誘導(dǎo)提高該拮抗酵母生防效力的生理機(jī)制,并借助于蛋白質(zhì)組和轉(zhuǎn)錄組技術(shù)初步揭示其分子機(jī)制,為拮抗酵母提高生防效力提供新思路,使拮抗... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1.1 水果采后病害及其研究現(xiàn)狀
    1.2 控制水果采后病害的主要方法
        1.2.1 物理法
        1.2.2 化學(xué)法
        1.2.3 生物防治法
        1.2.4 結(jié)合法
    1.3 氧化脅迫對(duì)拮抗酵母防治效力的影響
    1.4 提高拮抗酵母氧化脅迫耐受性的方法
    1.5 論文研究的目的、意義和研究內(nèi)容
第二章 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica生防效力的影響
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要儀器與設(shè)備
        2.2.2 化學(xué)試劑
        2.2.3 水果
        2.2.4 培養(yǎng)基
        2.2.5 酵母菌
        2.2.6 抗壞血酸誘導(dǎo)及H_2O_2 處理P.caribbica
        2.2.7 病原菌
        2.2.8 P.carribbica對(duì) P.expansum的體外抑制作用
        2.2.9 P.caribbica對(duì)蘋果青霉病的控制作用
        2.2.10 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 H_2O_2 誘導(dǎo)的氧化脅迫對(duì)P.caribbica控制蘋果青霉病效力的影響
        2.3.2 不同濃度抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica控制蘋果青霉病效力的影響
        2.3.3 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica抑制P.expansum生長的影響
        2.3.4 在氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica控制蘋果青霉病效力的影響
    2.4 本章小結(jié)與討論
第三章 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)提高P.caribbica生防效力的生理機(jī)制
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 主要儀器與設(shè)備
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 供試水果
        3.2.4 培養(yǎng)基
        3.2.5 酵母菌及其處理
        3.2.6 病原菌
        3.2.7 P.caribbica在蘋果表面的生長動(dòng)態(tài)
        3.2.8 P.caribbica細(xì)胞內(nèi)ROS積累的測定
        3.2.9 P.caribbica抗氧化相關(guān)酶活及(MDA)含量的測定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica在蘋果表面生長動(dòng)態(tài)的影響
        3.3.2 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica細(xì)胞內(nèi)ROS積累的影響
        3.3.3 氧化脅迫條件下抗壞血酸誘導(dǎo)培養(yǎng)對(duì)P.caribbica抗氧化相關(guān)酶活和MDA含量的影響
    3.4 本章小結(jié)與討論
第四章 基于蛋白組學(xué)分析抗壞血酸誘導(dǎo)提高P.caribbica氧化脅迫耐受性的機(jī)制
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
        4.2.2 酵母
        4.2.3 總蛋白的提取
        4.2.4 雙向電泳
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 氧化脅迫下經(jīng)過抗壞血酸誘導(dǎo)后P.caribbica的蛋白應(yīng)答雙向電泳圖
        4.3.2 氧化脅迫下P.caribbica單獨(dú)使用以及經(jīng)過抗壞血酸誘導(dǎo)后蛋白質(zhì)譜鑒定結(jié)果
        4.3.3 差異蛋白的GO分類
    4.4 本章小結(jié)與討論
第五章 基于轉(zhuǎn)錄組分析抗壞血酸誘導(dǎo)提高P.caribbica氧化脅迫耐受性的機(jī)制
    5.1 引言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 主要儀器與設(shè)備
        5.2.2 酵母菌
        5.2.3 上機(jī)測序以及文庫構(gòu)建
        5.2.4 RNA樣品檢測
        5.2.5 RNA文庫質(zhì)控
        5.2.6 RT-qPCR的驗(yàn)證
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果
        5.3.2 氧化脅迫條件下酵母差異表達(dá)基因GO分析
        5.3.3 DEGs的 KEGG分類
        5.3.4 差異基因COG富集分析
        5.3.5 差異基因KOG富集分析
    5.4 RT-qPCR目的基因的驗(yàn)證
        5.4.1 引物設(shè)計(jì)及驗(yàn)證
        5.4.2 RT-qPCR結(jié)果分析
    5.5 本章小結(jié)與討論
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間學(xué)術(shù)成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3169162