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雙斑側(cè)溝繭蜂病毒調(diào)控NF-κB及其相互作用蛋白Cactus和Dip3的研究

發(fā)布時間:2021-03-29 23:40
  雙斑側(cè)溝繭蜂病毒(Microplitisbicoloratus bracovirus,MbBV)是寄生蜂 Microplitis bicoloratus的共生病毒。前期的研究已經(jīng)表明MbBV能夠抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)錄水平可能與調(diào)控NF-κB有關(guān),但對MbBV與NF-κB信號通路及其相互作用蛋白Cactus和Dip3的研究尚少。研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),MbBV的基因組中含有大量的IκB-like基因,預(yù)測這些基因編碼的蛋白含有Ank-repeat結(jié)構(gòu)域,被統(tǒng)一命名為Viral ankyrin protein(Vank),病毒Vanks的結(jié)構(gòu)和NF-κB信號通路中的抑制蛋白IκB蛋白Cactus結(jié)構(gòu)相似。Dorsal-interacting protein 3(Dip3)是與NF-κB蛋白相互作用的蛋白。本論文就MbBV對NF-κB及其相互作用蛋白Cactus和Dip3進(jìn)行研究,通過MbBV病毒感染不同的3種鱗翅目昆蟲細(xì)胞系斜紋夜蛾細(xì)胞系Spli221、草地貪夜蛾細(xì)胞系Sf9、粉紋夜蛾細(xì)胞系High Five后,檢測NF-κB下游抗菌肽基因attacin、defensin的變化;通過檢測病毒IκB-like蛋... 

【文章來源】:云南大學(xué)云南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:112 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

雙斑側(cè)溝繭蜂病毒調(diào)控NF-κB及其相互作用蛋白Cactus和Dip3的研究


圖1:?Vanks蛋白和Cactus的功能結(jié)構(gòu)域(2013級本科生蔡秋辰)??Fig?1:?Vanks?protein?and?Cactus?protein?conserved?domain??

連接體,基因,載體,示意圖


用NanoDrop?2000檢測;存放于-20?°C下備用。??2.6.4c<icto?和?基因與?pMD19TM-T?Vector?的連接??使用下圖載體構(gòu)建(

技術(shù)流程,真核表達(dá),片段,菌落


pIZT/V5-His質(zhì)粒,回收目的片段和載體片段,連接后轉(zhuǎn)化,篩選出陽性克隆菌落;質(zhì)??粒圖譜(圖3),標(biāo)黃的部分表示構(gòu)建載體時所選擇的酶切位點,pIZT/V5-His真核表達(dá)??載體構(gòu)建流程(圖4)。??—=?一?>??rs—?—?Or?££:?_?—?ss?ss??—??E35S3¥'E3,??g?%??QT?plZT/V5-His????S3?3336?bp?fl??few?piZITVS^-H^??TATA?-S?zyx???j?|??4?31?■-?.?■?.?-?…:??s?ci??Ae^f>?i?Hfmi?iBcn^?H?|?Sfm?i?Ecm?i?BcxM?y??5#保牐粒蓿?幔茫裕裕牐海櫻常裕牐粒茫茫牐椋櫻粒茫椋牐茫裕茫牐眩牽瑁牐裕茫??ACT?AQT?#


本文編號:3108412

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