發(fā)布時(shí)間：2021-03-27 13:30

　　嘧霉胺是一種內(nèi)吸兼具熏蒸作用的苯胺嘧啶類(lèi)殺菌劑,由于其對(duì)黃瓜和番茄等蔬菜的灰霉病均有很好的防治作用,不合理的施用導(dǎo)致果蔬類(lèi)的嘧霉胺殘留量經(jīng)常超標(biāo),從而危害環(huán)境和人類(lèi)的健康�，F(xiàn)階段,對(duì)嘧霉胺的殘留檢測(cè)方法有LC-MS、GC、BS和TLC等,但是這些方法有前處理復(fù)雜、對(duì)專(zhuān)業(yè)人員要求高和設(shè)備昂貴等缺點(diǎn)。所以應(yīng)對(duì)嘧霉胺建立一種快速、靈敏、高效的檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）方法具有上述優(yōu)點(diǎn)外,同時(shí)還具有檢測(cè)成本低、適合大量樣品快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需要。因此,酶聯(lián)免疫分析技術(shù)對(duì)嘧霉胺殘留檢測(cè)具有實(shí)際意義。本研究探索了四條嘧霉胺半抗原（PMTH）的合成路線,并最終確定以對(duì)硝基苯胺和2-氯-4,6-二甲基嘧啶為起始原料,通過(guò)氨基取代、硝基還原和酯的氨解合成嘧霉胺半抗原,并得到經(jīng)¹H-NMR、TLC和MS的確證。采用混合酸酐法將PMTH和牛血清蛋白（BSA）偶聯(lián);采用活化酯法將PMTH和雞卵清蛋白（OVA）偶聯(lián),經(jīng)UV證明偶聯(lián)物:PMTH-BSA（免疫原）、PMTH-OVA（包被抗原）均偶聯(lián)成功,其中,PMTH與BSA的偶聯(lián)比為14:1;PMTH和OVA的偶聯(lián)比為6:1。將合... 

【文章來(lái)源】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

間接競(jìng)爭(zhēng)法的原理

圖 1-2 直接競(jìng)爭(zhēng)法的原理Figure 1-2 Principle of direct competition method.2.3 雙抗夾心法雙抗體夾心法，是將含有已知抗體的抗血清包被在固相載體的表面，然后加測(cè)抗原，若抗原和抗體兩者是特異性的，就會(huì)發(fā)生結(jié)合，經(jīng)過(guò)洗滌會(huì)將多余抗洗掉。再加入與待測(cè)抗原能發(fā)生特異性反應(yīng)的酶標(biāo)抗體，形成“夾心”；加入酶的底物，若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生，說(shuō)明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原。雙抗心法適用于測(cè)定大分子抗原，不適用于測(cè)定半抗原及小分子抗原，因其不能形兩位點(diǎn)夾心。

圖 1-2 直接競(jìng)爭(zhēng)法的原理Figure 1-2 Principle of direct competition method1.4.2.3 雙抗夾心法雙抗體夾心法，是將含有已知抗體的抗血清包被在固相載體的表面，然后加待測(cè)抗原，若抗原和抗體兩者是特異性的，就會(huì)發(fā)生結(jié)合，經(jīng)過(guò)洗滌會(huì)將多余抗體洗掉。再加入與待測(cè)抗原能發(fā)生特異性反應(yīng)的酶標(biāo)抗體，形成“夾心”；加入該酶的底物，若看到有色的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生，說(shuō)明在孔壁上存在相應(yīng)的抗原。雙抗夾心法適用于測(cè)定大分子抗原，不適用于測(cè)定半抗原及小分子抗原，因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]2014-2016年貴州省761份市售蔬菜中農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[J]. 楊蕙,劉怡婭,向紅,何平,周亞娟,劉利亞.  現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué). 2017(11)
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[8]固相微萃�。⊿PME）近幾年的發(fā)展[J]. 傅若農(nóng).  分析試驗(yàn)室. 2015(05)
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[10]氣相色譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中10種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留[J]. 廖和菁,張雪春,胡禮淵,鐘海翠,孫高英,劉瑞芳.  中國(guó)食品衛(wèi)生雜志. 2015(01)

博士論文
[1]農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)和前處理技術(shù)的研究[D]. 錢(qián)立立.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2007

碩士論文
[1]三聚氰胺ELISA快速檢測(cè)試劑盒的研制[D]. 岳慧慧.集美大學(xué) 2013
[2]有機(jī)磷農(nóng)藥單克隆抗體的制備[D]. 夏瑩.華中師范大學(xué) 2010
[3]樂(lè)果酶聯(lián)免疫試劑盒的研制[D]. 李興霞.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



本文編號(hào)：3103595