感染CTV甜橙對褐色橘蚜寄主選擇行為的影響
發(fā)布時(shí)間:2021-03-10 11:59
由柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)引起的柑橘衰退病,對全世界的柑橘產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失,是一種重要的柑橘病害。CTV可通過蚜蟲以半持久性方式進(jìn)行傳播,其中褐色橘蚜(Toxoptera citricida,Kirkaldy)是CTV最有效的媒介昆蟲之一。我國廣泛分布著CTV的強(qiáng)毒株系以及介體褐色橘蚜,加之我國柑橘產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)的調(diào)整,柑橘衰退病的流行在我國日趨嚴(yán)重,并對甜橙等品種的安全生產(chǎn)存在嚴(yán)重威脅。在寄主植物-病毒-媒介昆蟲之間的互作系統(tǒng)中,病毒侵染寄主植物會后,影響寄主的次生代謝等生理生化作用,繼而影響介體的寄主選擇行為、種群增長等生物學(xué)特性,最終會在一定程度上影響到媒介昆蟲對病毒的傳播。病毒對介體的影響與其媒介昆蟲傳播方式密切相關(guān)。通過對這些三者間互作關(guān)系的系統(tǒng)研究,有助于提出介體傳播的植物病毒病害的有效防控的新思路和途徑。本文以CTV-寄主甜橙-褐色橘蚜為研究對象,通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)、RT-q PCR等技術(shù)對褐色橘蚜在感染CTV甜橙上的寄主選擇行為的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究,分析了甜橙感染CTV后寄主植物中揮發(fā)性物質(zhì)的含量與組成及萜類合...
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:96 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
植物中不同揮發(fā)物的生物合成途徑[95]
西南大學(xué)碩士學(xué)位論文數(shù)據(jù)分析算行為反應(yīng)的選擇率,選擇率(%)=(氣味源中橘蚜數(shù)或?qū)φ罩虚傩Э傞傺翑?shù))×100。利用 SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件對成對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分果與分析供試植株準(zhǔn)備供試植株進(jìn)行了 CTV 及其他常見病害病原的檢測,如圖 3.1 所示,均未擴(kuò)增出了與 HLB、CTLV、CPV、CEV、HSVd、SDV 目的片段帶,且各負(fù)對照以及水均無擴(kuò)增,表明供試西蒙斯甜橙植株未受到、CPV、CEV、HSVd、SDV 病害病原的侵染,可用于下一步實(shí)驗(yàn)。
圖 3.2 不同退火溫度二重 RT-PCR 擴(kuò)增結(jié)果M:DL2 000 分子量標(biāo)準(zhǔn)Fig.3.2 Duplex RT-PCR amplification with different amount of temperatureM: DL2 000 marker3.3.2.2 引物濃度的優(yōu)化在退火溫度優(yōu)化之前,對 PCTV和 PCYVCV引物濃度進(jìn)行了優(yōu)化調(diào)整,以退火溫度為 57 ℃進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。結(jié)果(圖 3.3,A)顯示,二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCYVCV引物濃度為 0.1 μmol·L-1,PUBQ引物濃度為 0.3 μmol·L-1,PCTV引物濃度從 0.1μmol·L-1增加到 0.15 μmol·L-1,CTV 的目的條帶增亮,擴(kuò)增效率增加,而 CYVCV的目的條帶變?nèi),CYVCV 的擴(kuò)增效率有所下降。二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCTV引物濃度為 0.13 μmol·L-1,PUBQ引物濃度為 0.3 μmol·L-1,PCYVCV引物濃度從 0.1μmol·L-1增加到 0.2 μmol·L-1,CYVCV 的目的條帶逐漸增亮,擴(kuò)增效率提高,而CTV 的目的條帶亮度變化不明顯(圖 3.3,B)。確定二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCTV引物濃度為 0.13 μmol·L-1,PCYVCV引物濃度為 0.2 μmol·L-1, PUBQ引物濃度為 0.3μmol·L-1
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑橘響應(yīng)潰瘍病菌轉(zhuǎn)錄因子CsBZIP40的克隆及功能分析[J]. 賈瑞瑞,周鵬飛,白曉晶,陳善春,許蘭珍,彭愛紅,雷天剛,姚利曉,陳敏,何永睿,李強(qiáng). 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(13)
[2]南方水稻黑條矮縮病毒誘導(dǎo)的水稻揮發(fā)物及白背飛虱成蟲對其組分的行為反應(yīng)[J]. 王璐豐,胡奎,賀華良,丁文兵,李有志. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(04)
[3]煙粉虱的有效治理有賴于基礎(chǔ)研究[J]. 閆鳳鳴. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(13)
[4]巴氏新小綏螨對柑桔全爪螨處理的枳橙葉片揮發(fā)物的行為反應(yīng)[J]. 胡軍華,王雪蓮,張耀海,姚廷山,劉浩強(qiáng),李鴻筠,冉春. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]尤力克檸檬上一種新病害的生物學(xué)特性及RT-PCR檢測[J]. 陳洪明,王雪峰,周彥,周常勇,郭俊,李中安. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2015(04)
[6]褐色橘蚜在五種柑橘上的取食行為差異[J]. 魯卓越,陳文龍,何應(yīng)琴,周常勇,王雪峰,李太盛. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2014(05)
[7]褐色橘蚜在健康與CTV植株上的EPG比較[J]. 何應(yīng)琴,陳文龍,魯卓越,周常勇,李中安,王雪峰,李太盛. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2014(02)
[8]3種甜櫻桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 宗曉娟,王文文,魏海蓉,王甲威,陳新,徐麗,劉慶忠. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(06)
[9]褐色橘蚜中柑橘衰退病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 李玲娣,周常勇,李中安,田曉,王永江,唐科志,周彥,劉金香. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(03)
[10]葡萄4種病毒多重RT-PCR檢測體系的建立[J]. 范旭東,董雅鳳,張尊平,任芳,李亞惠. 園藝學(xué)報(bào). 2012(05)
博士論文
[1]煙粉虱-雙生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的調(diào)控機(jī)制[D]. 孫艷春.浙江大學(xué) 2016
[2]韌皮部桿菌亞洲種簡單重復(fù)序列(SSR)多態(tài)性及其侵染甜橙后轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D]. 黃愛軍.西南大學(xué) 2014
[3]棉蚜Aphis gossypii Glover寄主型和遷飛型的研究[D]. 劉向東.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
碩士論文
[1]野生柑橘響應(yīng)韌皮部桿菌亞洲種侵染的生物學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D]. 胡燕.西南大學(xué) 2017
[2]CTV感染甜橙對褐色橘蚜適合度的影響及其分子機(jī)制的初步研究[D]. 關(guān)桂靜.西南大學(xué) 2017
[3]RGSV侵染水稻后揮發(fā)物的變化對褐飛虱選擇行為的影響[D]. 孫付森.福建農(nóng)林大學(xué) 2015
[4]柑橘屬植物基本類型中國特有種類不同組織器官揮發(fā)成分比較研究[D]. 李利改.西南大學(xué) 2014
[5]不同頂空分析法對植物揮發(fā)物測定的影響[D]. 楊莉.北京林業(yè)大學(xué) 2007
本文編號:3074621
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:96 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
植物中不同揮發(fā)物的生物合成途徑[95]
西南大學(xué)碩士學(xué)位論文數(shù)據(jù)分析算行為反應(yīng)的選擇率,選擇率(%)=(氣味源中橘蚜數(shù)或?qū)φ罩虚傩Э傞傺翑?shù))×100。利用 SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件對成對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分果與分析供試植株準(zhǔn)備供試植株進(jìn)行了 CTV 及其他常見病害病原的檢測,如圖 3.1 所示,均未擴(kuò)增出了與 HLB、CTLV、CPV、CEV、HSVd、SDV 目的片段帶,且各負(fù)對照以及水均無擴(kuò)增,表明供試西蒙斯甜橙植株未受到、CPV、CEV、HSVd、SDV 病害病原的侵染,可用于下一步實(shí)驗(yàn)。
圖 3.2 不同退火溫度二重 RT-PCR 擴(kuò)增結(jié)果M:DL2 000 分子量標(biāo)準(zhǔn)Fig.3.2 Duplex RT-PCR amplification with different amount of temperatureM: DL2 000 marker3.3.2.2 引物濃度的優(yōu)化在退火溫度優(yōu)化之前,對 PCTV和 PCYVCV引物濃度進(jìn)行了優(yōu)化調(diào)整,以退火溫度為 57 ℃進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。結(jié)果(圖 3.3,A)顯示,二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCYVCV引物濃度為 0.1 μmol·L-1,PUBQ引物濃度為 0.3 μmol·L-1,PCTV引物濃度從 0.1μmol·L-1增加到 0.15 μmol·L-1,CTV 的目的條帶增亮,擴(kuò)增效率增加,而 CYVCV的目的條帶變?nèi),CYVCV 的擴(kuò)增效率有所下降。二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCTV引物濃度為 0.13 μmol·L-1,PUBQ引物濃度為 0.3 μmol·L-1,PCYVCV引物濃度從 0.1μmol·L-1增加到 0.2 μmol·L-1,CYVCV 的目的條帶逐漸增亮,擴(kuò)增效率提高,而CTV 的目的條帶亮度變化不明顯(圖 3.3,B)。確定二重 RT-PCR 反應(yīng)體系中 PCTV引物濃度為 0.13 μmol·L-1,PCYVCV引物濃度為 0.2 μmol·L-1, PUBQ引物濃度為 0.3μmol·L-1
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑橘響應(yīng)潰瘍病菌轉(zhuǎn)錄因子CsBZIP40的克隆及功能分析[J]. 賈瑞瑞,周鵬飛,白曉晶,陳善春,許蘭珍,彭愛紅,雷天剛,姚利曉,陳敏,何永睿,李強(qiáng). 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(13)
[2]南方水稻黑條矮縮病毒誘導(dǎo)的水稻揮發(fā)物及白背飛虱成蟲對其組分的行為反應(yīng)[J]. 王璐豐,胡奎,賀華良,丁文兵,李有志. 昆蟲學(xué)報(bào). 2017(04)
[3]煙粉虱的有效治理有賴于基礎(chǔ)研究[J]. 閆鳳鳴. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(13)
[4]巴氏新小綏螨對柑桔全爪螨處理的枳橙葉片揮發(fā)物的行為反應(yīng)[J]. 胡軍華,王雪蓮,張耀海,姚廷山,劉浩強(qiáng),李鴻筠,冉春. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2016(01)
[5]尤力克檸檬上一種新病害的生物學(xué)特性及RT-PCR檢測[J]. 陳洪明,王雪峰,周彥,周常勇,郭俊,李中安. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2015(04)
[6]褐色橘蚜在五種柑橘上的取食行為差異[J]. 魯卓越,陳文龍,何應(yīng)琴,周常勇,王雪峰,李太盛. 植物保護(hù)學(xué)報(bào). 2014(05)
[7]褐色橘蚜在健康與CTV植株上的EPG比較[J]. 何應(yīng)琴,陳文龍,魯卓越,周常勇,李中安,王雪峰,李太盛. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào). 2014(02)
[8]3種甜櫻桃病毒PNRSV、PDV及LChV-2的多重RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 宗曉娟,王文文,魏海蓉,王甲威,陳新,徐麗,劉慶忠. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(06)
[9]褐色橘蚜中柑橘衰退病毒實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測方法的建立與應(yīng)用[J]. 李玲娣,周常勇,李中安,田曉,王永江,唐科志,周彥,劉金香. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(03)
[10]葡萄4種病毒多重RT-PCR檢測體系的建立[J]. 范旭東,董雅鳳,張尊平,任芳,李亞惠. 園藝學(xué)報(bào). 2012(05)
博士論文
[1]煙粉虱-雙生病毒-寄主植物互作及寄主植物在三者互作中的調(diào)控機(jī)制[D]. 孫艷春.浙江大學(xué) 2016
[2]韌皮部桿菌亞洲種簡單重復(fù)序列(SSR)多態(tài)性及其侵染甜橙后轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D]. 黃愛軍.西南大學(xué) 2014
[3]棉蚜Aphis gossypii Glover寄主型和遷飛型的研究[D]. 劉向東.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
碩士論文
[1]野生柑橘響應(yīng)韌皮部桿菌亞洲種侵染的生物學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究[D]. 胡燕.西南大學(xué) 2017
[2]CTV感染甜橙對褐色橘蚜適合度的影響及其分子機(jī)制的初步研究[D]. 關(guān)桂靜.西南大學(xué) 2017
[3]RGSV侵染水稻后揮發(fā)物的變化對褐飛虱選擇行為的影響[D]. 孫付森.福建農(nóng)林大學(xué) 2015
[4]柑橘屬植物基本類型中國特有種類不同組織器官揮發(fā)成分比較研究[D]. 李利改.西南大學(xué) 2014
[5]不同頂空分析法對植物揮發(fā)物測定的影響[D]. 楊莉.北京林業(yè)大學(xué) 2007
本文編號:3074621
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