產(chǎn)酶溶桿菌OH11（Lysobacter enzymogenes OH11）是本實(shí)驗(yàn)室從辣椒根際土壤中分離得到的一株具有廣闊應(yīng)用前景的重要生防細(xì)菌,其能產(chǎn)生多種胞外酶和次生抗菌代謝產(chǎn)物,對多種植物病原真菌、卵菌和革蘭氏陽性細(xì)菌均有較強(qiáng)的抗菌活性。Clp（cAMP-receptor like protein）是產(chǎn)酶溶桿菌中鑒定的一個轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白,屬于CRP（cyclic AMP receptor protein）蛋白家族。之前的研究發(fā)現(xiàn),將clp缺失突變以后其產(chǎn)HSAF的能力顯著降低,并且HSAF生物合成的關(guān)鍵基因pks/nrps的轉(zhuǎn)錄表達(dá)也顯著下降。本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)Clp可以通過直接結(jié)合在pks/nrps基因的啟動子區(qū)來調(diào)控HSAF的生物合成。為深入揭示產(chǎn)酶溶桿菌中Clp調(diào)控HSAF生物合成的分子機(jī)制,本研究通過篩選與Clp蛋白互作的轉(zhuǎn)錄因子,從中發(fā)現(xiàn)調(diào)控HSAF生物合成的目標(biāo)轉(zhuǎn)錄因子。在此基礎(chǔ)上,研究該目標(biāo)轉(zhuǎn)錄因子是如何通過與Clp蛋白互作來調(diào)控HSAF生物合成的。在本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的OH11轉(zhuǎn)錄因子pTRG文庫的基礎(chǔ)上,本研究通過細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)篩選到14個與Clp蛋白存在相互作用的轉(zhuǎn)錄... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１溶桿菌屬幾個代表種的細(xì)胞形態(tài)??Ｆｉｇ．?１－１?Ｃｅｌｌ?ｓｈａｐｅｓ?ｏｆ?ｓｅｖｅｒａｌ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ?ｓｐｅｃｉｅｓ?ｏｆ?Ｌｙｓｏｂａｃｔｃｒ｛＾＾：＾，?２００６）．??

借助于質(zhì)譜（ＭＳ）和核磁并振技術(shù)（ＮＭＲ），Ｙｕ等人鑒定了ＨＳＡＦ的化學(xué)結(jié)構(gòu)（Ｙｕ?ｅｔ?ａｌ．，??２００７）。該物質(zhì)山一個獨(dú)特的大環(huán)內(nèi)酰胺體系、一個四胺酸結(jié)構(gòu)單元和一個５，５，６－三環(huán)??骨架構(gòu)成（圖１＿３），其結(jié)構(gòu)與ｄｉｈｙｄｒｏｍａｌｔｏｐｈｉｌｉｎ類似。??Ｈ?！??！?ＨＳＡＦ?／ｎ－ａ?ｊ??Ｉ?＾５?？??Ｈ０?（Ｄｉｈｙｄｒｏｍａｌｔｏｐｈｉｌｉｎ）?｜??一?—?一—?—?一一—一一?—?—?一一一?—?—?—?一一一?＿?—?—?一?———??圖１－３產(chǎn)酶溶桿菌Ｃ３中熱穩(wěn)定抗真菌因子ＨＳＡＦ的化學(xué)結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇ．?１－３?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＨＳＡＦ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｌ．?ｅｎｚｙｍｏｇｅｎｅｓＣｉ?（Ｙｕ?ｅｔ?ａｌ，?２００７）．??利用生物信息學(xué)和分子生物學(xué)等手段，Ｙｕ等鑒定了ＨＳＡＦ生物合成基因簇及其生??物合成的關(guān)鍵基因ＰＫＳ／ＮＲＰＳ（圖１－４Ａ），并推導(dǎo)出其生物合成的可能途徑（圖１－４Ｂ）?（Ｙｕ??ｅｔ?ａｌ．

１－６Ａ），對革蘭氏陽性細(xì)菌有著很好的生防效果。得到產(chǎn)酶溶桿菌ＯＨ１１全基因組后，??Ｚｈａｎｇ等借助分子生物學(xué)手段確定了產(chǎn)酶溶桿菌０Ｈ１１中合成ＷＡＰ－８２９４Ａ２的基因簇及??其中的兩個關(guān)鍵基因：ＷＡＰＳ１和ＷＡＰＳ２（圖１－６Ｂ）。通過質(zhì)譜（ＭＳ）和核磁共振技術(shù)??（ＮＭＲ）?Ｚｈａｎｇ等人分析確定了該物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與ＷＡＰ－８２９４Ａ２相同，并借助生物信息學(xué)??和分子生物學(xué)手段推測出了ＷＡＰ－８２９４Ａ２可能的生物合成途徑（圖ｌ－６Ｃ）（Ｚｈａｎｇ?ｅｔ?ａｌ．，??２０１１）。??６??


本文編號：3069077