朱砂葉螨（Tetranychus cinnabarinus）是一種可危害多種農(nóng)作物的重要農(nóng)業(yè)害螨。目前,農(nóng)業(yè)害螨的防治還是以化學(xué)農(nóng)藥為主,但由于單一農(nóng)藥的大量重復(fù)使用以及害螨屬于r-對策類生物導(dǎo)致其抗性水平急劇上升,目前已經(jīng)對大部分殺螨劑均產(chǎn)生抗性,在農(nóng)業(yè)和經(jīng)濟上均造成不可逆的損失。甲氰菊酯是一種擬除蟲菊酯類殺蟲（螨）劑,目前世界上多個地區(qū)的農(nóng)業(yè)害螨均對甲氰菊酯產(chǎn)生了一定程度的抗藥性,其抗性機制的研究也取得了一定的進展。短鏈脫氫酶（Short chaindehydrogenases/reductases,SDRs）是一類古老的超家族酶系,廣泛分布于真核和原核生物中,已有的研究表明其主要功能是參與生物的生長發(fā)育,同時也能代謝多種內(nèi)源和外源物質(zhì)（藥物）。前期的研究發(fā)現(xiàn)朱砂葉螨甲氰菊酯抗性品系的SDR基因表達量顯著高于敏感品系,說明朱砂葉螨對甲氰菊酯抗性形成可能與SDR有關(guān)。目前有關(guān)SDR與害螨抗藥性的研究未見報道,研究SDR與朱砂葉螨抗藥性的關(guān)系不僅能豐富朱砂葉螨代謝抗性機制,也能為朱砂葉螨的綜合防治提供理論支撐。因此,本論文以實驗室的轉(zhuǎn)錄組和基因芯片數(shù)據(jù)為基礎(chǔ),通過表達模式分析和RNA ... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

朱砂葉螨總RNA電泳條帶圖

第三章 朱砂葉螨與甲氰菊酯抗性相關(guān) SDR 基因克隆和表達模式分析在 SDR 數(shù)據(jù)庫（http://www.SDR-enzymes.org/）上檢索已錄入庫中的二斑葉螨中的 SDR 基因，并結(jié)合二斑葉螨基因組比對結(jié)果，綜合選擇 20 條 SDR 基因和UN9502 的氨基酸序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，如圖 3.4 所示。結(jié)合系統(tǒng)發(fā)育樹，可以發(fā)現(xiàn)UN9502基因與其在二斑葉螨中直系同源的SDR基因tetur28g01080節(jié)點值達到99%，并且二者均歸類到 SDR112C 超家族中。

朱砂葉螨 pET28a- TcSDR112C1 重組蛋白 SDS-PAGE 電泳AGE electrophoresis analysis of recombinant pET28a- TcSDR112C1cinnabarinus：加 IPTG 的空 pET28a 總蛋白；2：不加 IPTG 的 pET28a- TcSDR112C1 總R112C1 總蛋白：4：加 IPTG 的 pET28a- TcSDR112C1 沉淀；5 加 IPTG 的 1: The protein of pET28a with IPTG induced; 2: The protein of pET28a- Tc The protein of pET28a- TcSDR112C1 with IPTG induced; 4: The precipitationth IPTG induced; 5: The supernatant protein of pET28a- TcSDR112C1 with IPTGR112C1 基因原核表達后包涵體復(fù)性及 WB 分析載體，但蛋白依舊以包涵體的形式存在，因此選擇C1 重組菌體進行包涵體復(fù)性。復(fù)性后對可溶蛋白進行 SD證，發(fā)現(xiàn)復(fù)性后的可溶蛋白在 31.6 kDa 附近有目的條帶淀和復(fù)性蛋白有顯影，如圖 5.2 所示。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]朱砂葉螨抗甲氰菊酯P450基因鑒定及其轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究[D]. 石力.西南大學(xué) 2017



本文編號：2987677