葡萄（Vitis spp.）是世界上栽培歷史最悠久的果樹之一,因其果實多汁且營養(yǎng)價值豐富而被廣泛栽培。當(dāng)前栽培的品種多為歐洲葡萄,歐洲葡萄品質(zhì)優(yōu)良,但是其抗病性較差,從而給葡萄產(chǎn)業(yè)帶來不少的經(jīng)濟(jì)損失。因而挖掘葡萄抗病基因,開展抗病基因功能研究為解析抗病分子機(jī)理,定向改良感病葡萄抗病性具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。本研究以課題組前期發(fā)現(xiàn)的兩個響應(yīng)白粉病的抗病基因BAK1和LecRK1為基礎(chǔ),從歐洲葡萄‘無核白’中克隆其cDNA全長序列,利用先進(jìn)的CRISPR/Cas9技術(shù)定向編輯BAK1和LecRK1,構(gòu)建DNA編輯載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將其轉(zhuǎn)入‘無核白’胚性愈傷組織中,為深入開展抗病功能研究提供基礎(chǔ)材料。本研究結(jié)果如下:1.VvBAK1和VvLecRK1基因及啟動子克隆。采用RT-PCR技術(shù)克隆‘無核白’葡萄VvBAK1和VvLecRK1基因cDNA全長序列,VvBAK1開放閱讀框為1833 bp,共編碼610個氨基酸;VvLecRK1的開放閱讀框為2415 bp,共編碼804個氨基酸,VvLecRK1與歐洲葡萄‘黑比諾’的蛋白序列的同源性為97.77%,比‘黑比諾’的蛋白序列少了兩個... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

葡萄抗白粉病VvBAK1cDNA克隆

VvBAK1基因瞬時轉(zhuǎn)化煙草亞細(xì)胞定位Fig.2-3SubcellularlocalizationofVvBAK1

圖 2-2 VvBAK1(B)與歐洲葡萄‘黑比諾’(A)蛋白質(zhì)序列比對Fig. 2-2 Protein sequence alignment of ‘Thompson Seedless’(B) and ‘Pinot Noir’(A) in VvBAK12.3.2 VvBAK1 亞細(xì)胞定位將空載體與融合載體的農(nóng)桿菌侵染液分別注射本氏煙草葉片，利用激光共聚焦顯

【參考文獻(xiàn)】：
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博士論文
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碩士論文
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[2]中國野生山葡萄轉(zhuǎn)錄因子VaERF20克隆與功能研究[D]. 王夢楠.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[3]CRISPR/Cas9系統(tǒng)應(yīng)用于水稻和毛白楊的研究[D]. 李魏輝.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]BAK1和SERK1參與調(diào)控擬南芥花器官脫落的分子機(jī)理[D]. 龔雪.蘭州大學(xué) 2014
[5]中國野生華東葡萄抗白粉病轉(zhuǎn)錄因子基因VpRFP1功能分析[D]. 余義和.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010



本文編號：2986994