Phoma segeticola var.camelliae是本課題組從貴州石阡茶園茶斑點病害中分離出的病原菌。該病害在嫩葉、新梢以及成葉均有發(fā)生。病葉可畸形扭曲,易脫落,病葉生長發(fā)育緩慢,嚴重影響了茶葉的品質(zhì)及產(chǎn)量,但是目前缺乏有效的防治措施。本研究采用菌絲生長速率法測定了中生菌素、春雷霉素及寧南霉素對P.segeticola var.camelliae菌株GZSQ-4的抑菌活性,EC₅₀值分別為5.10μg/mL、140.17μg/mL、2553.85μg/mL。其中寧南霉素對真菌的抑菌機制未見報道,值得深入研究。為了進一步研究寧南霉素對病原菌的作用機制,在寧南霉素EC₅₀濃度條件下,本文采用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡及透射電鏡觀察寧南霉素處理病原菌1 h和14 h后的菌絲形態(tài),發(fā)現(xiàn)寧南霉素處理后病原菌菌絲膨脹,菌絲內(nèi)容物密度降低,顯現(xiàn)顆粒內(nèi)容物,線粒體數(shù)量增多;用DAPI染色寧南霉素處理后的菌絲細胞核,發(fā)現(xiàn)藥劑處理后的菌絲細胞核并無明顯變化;采用轉(zhuǎn)錄組技術(shù)進一步研究寧南霉素對GZSQ-4基因表達的影響,結(jié)果表明,寧南霉素在EC_50<... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞列表
前言
第一章 文獻綜述
    1.1 茶葉主要病害及防治研究進展
    1.2 Phoma屬病原菌的研究進展
    1.3 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在微生物研究中的應(yīng)用
    1.4 抗生素的作用機制
    1.5 寧南霉素研究進展
    1.6 結(jié)語
第二章 研究路線設(shè)計
    2.1 研究目的及意義
    2.2 擬解決的主要問題
    2.3 研究內(nèi)容
    2.4 研究路線
第三章 實驗部分
    3.1 實驗材料
        3.1.1 供試菌株
        3.1.2 供試藥劑
        3.1.3 主要儀器
        3.1.4 試劑
    3.2 不同藥劑對GZSQ-4 的抑菌活性
    3.3 形態(tài)學(xué)觀察寧南霉素對GZSQ-4 的影響
        3.3.1 樣品的制備
        3.3.2 光學(xué)顯微鏡觀察
        3.3.3 掃描電鏡觀察
        3.3.4 透射電鏡觀察
        3.3.5 熒光顯微鏡觀察
    3.4 轉(zhuǎn)錄組測序研究寧南霉素對GZSQ-4 的基因表達的影響
        3.4.1 GZSQ-4 的樣品的制備
        3.4.2 mRNA文庫構(gòu)建和測序
        3.4.3 測序序列統(tǒng)計與質(zhì)控
        3.4.4 生物信息學(xué)分析
    3.5 RT-qPCR驗證差異表達的基因
        3.5.1 RNA的提取
        3.5.2 RT-qPCR引物設(shè)計
        3.5.3 RNA反轉(zhuǎn)錄
        3.5.4 RT-qPCR
第四章 結(jié)果
    4.1 不同藥劑對菌株GZSQ-4 的離體抑菌活性
    4.2 形態(tài)學(xué)觀察寧南霉素對GZSQ-4 的影響
        4.2.1 光學(xué)顯微鏡觀察
        4.2.2 掃描電鏡觀察
        4.2.3 透射電鏡觀察
        4.2.4 熒光顯微鏡觀察
    4.3 轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究寧南霉素對GZSQ-4 基因表達的影響
        4.3.1 轉(zhuǎn)錄組生物學(xué)重復(fù)樣品的質(zhì)控
        4.3.2 差異基因的篩選
        4.3.3 差異基因的生物信息學(xué)分析
        4.3.4 差異基因的驗證
第五章 結(jié)論與討論
    5.1 主要研究結(jié)果
        5.1.1 藥劑抑菌活性測定
        5.1.2 寧南霉素對GZSQ-4 的作用機理研究
    5.2 創(chuàng)新點
    5.3 不足之處
致謝
參考文獻
附錄
    1 課題來源
    2 研究生期間發(fā)表論文
    3 附表


【參考文獻】：
期刊論文
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