柑橘黃龍病菌和甘薯莖腐病菌單克隆抗體的制備及應(yīng)用
發(fā)布時間:2021-01-10 21:48
植物細(xì)菌性病害是一類非常重要的植物病害,世界上已經(jīng)報道的植物細(xì)菌性病害有500多種,我國記錄的細(xì)菌病害有150種以上。植物細(xì)菌病害病原細(xì)菌可危害農(nóng)作物、蔬菜、花卉、果樹、林木和藥用植物等。其中由柑橘黃龍病菌(Candidatus liberibacter asiaticus)引起的柑橘黃龍。–itrus huanglongbing,HLB)和達(dá)旦提狄克氏菌(Dickeyadadantii)引起的甘薯莖腐病(Stem and root rot desease of sweet potato)在中國地區(qū)爆發(fā),造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。建立快速、靈敏的檢測技術(shù)是這兩種植物細(xì)菌病害診斷和防控的關(guān)鍵。血清學(xué)檢測技術(shù)操作簡單、特異性好、靈敏度高,適合大規(guī)模樣品檢測。因此,該技術(shù)在植物細(xì)菌病害的診斷和檢測中廣泛應(yīng)用。但目前國內(nèi)外還沒有具有特異性和廣譜性的柑橘黃龍病菌單抗,也沒有檢測甘薯莖腐病菌的血清學(xué)技術(shù)報道。為此,本論文分別制備了抗柑橘黃龍病菌和抗甘薯莖腐病菌的單克隆抗體,并以單克隆抗體為核心分別建立了快速、可靠地檢測這兩種病原菌的血清學(xué)技術(shù),為這兩種細(xì)菌病害的診斷與檢測、預(yù)測預(yù)警和科學(xué)防控提供技術(shù)支...
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:91 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.?1世界柑橘黃龍病的分布(引自高玉霞,2015)??
柑橘黃龍病在柑橘果樹上造成的癥狀表現(xiàn)為:初期樹梢嫩葉表現(xiàn)缺綠狀,后??期葉片遐綠黃化,伴隨著葉脈腫突,產(chǎn)生黃綠相間的斑駁,再長的新梢葉片細(xì)狹??長,呈缺鋅癥狀(圖1.2?C);感染了黃龍病的植株的花期會提前,花量變多,??但很容易脫落,且坐果率低,有的病樹開花時間不確定(黃麗,2013);初期的果??實不顯現(xiàn)出明顯的癥狀,果實成熟期提前,果實出現(xiàn)脫落,且果實較小,果皮較??硬且著色不正常,形成青鼻果、畸形果、軟果等(圖1.2?B),導(dǎo)致果實品質(zhì)和??產(chǎn)量下降,從而造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失(范懷忠等,1986?)。當(dāng)葉片黃化脫落,樹??勢生長變衰弱時,伴隨著根部慢慢開始腐爛,腐爛的根部表層與下層組織脫落分??離,到了后期主側(cè)根逐漸全部腐爛,木質(zhì)部變成黑色(白華菊等,2009)。通過對染??病植株葉片的亞顯微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯變化:葉綠體結(jié)構(gòu)中淀粉??粒膨大
在柑橘黃龍病檢測取樣時,應(yīng)該選取老熟葉的葉柄,切割含有中脈及其??附近少量組織,病原菌提取時可取葉片中下部側(cè)脈(蘇華楠等,2014)。因為病??原菌主要集中分布在主葉脈,葉肉和細(xì)小側(cè)脈中病原菌含量很低(圖1.3)。??敷??('I.as?content??詆Low??圖1.3?HLB病原在柑橘葉片中的主要分布及含量示意圖(引自蘇華楠等,2014)??Fig.?1.3?Distribution?of?Candidatus?Liberibacter?asiaticus?in?citrus?leaves?from?Su??et?al.?(2014)??1.?3.?3柑橘黃龍病病原菌的寄主??柑橘黃龍病菌的寄主多為蕓香科植物,能感染如柑橘屬)、枳屬??(P0A7C///1/51?/廠辦//(7如)和金柑屬(/^廣/";^//“?#/;.)等植物(Miyakawa?et?al.,?1990)。??除此之外,酒餅簕(iSever/>7/f7?6wx//o//G)?(Hung?etal.,2001)、開普板栗(CAms^a??)、九里香()(Hung?et?al.,200?丨)和黃皮(??臓)(Gamieretal.,1983)也都可成為柑橘黃龍病菌的寄主。除了蕓香科植??物
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑橘黃龍病發(fā)病規(guī)律及防控關(guān)鍵技術(shù)要點[J]. 黃源. 南方農(nóng)業(yè). 2018(15)
[2]柑橘黃龍病快速診斷與檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 肖翠,廖晶晶,何利剛,仝鑄,吳黎明,王志靜,蔣迎春,黃詠明,孫中海. 農(nóng)業(yè)科技通訊. 2017(12)
[3]甘薯莖腐病防治初探[J]. 盧璐,張敏榮,楊曉,余繼華,陶健. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(09)
[4]柑橘黃龍病碘—淀粉法快速檢測技術(shù)優(yōu)化[J]. 王許會,郭洋洋,全金成,張宇宏,陳慈相,邱棟梁,毛潤乾. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2017(04)
[5]甘薯莖腐病的發(fā)生危害及防控對策[J]. 楊曉,張敏榮,余繼華,盧璐,陶健. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2017(02)
[6]柑橘黃龍病分子生物學(xué)檢測方法研究進(jìn)展[J]. 盧乃會,李強有,張曼其,何紅,黃勤知,趙麗宏. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(12)
[7]柑橘黃龍病癥狀與“Candidatus Liberibacter asiaticus”PCR檢測結(jié)果的相關(guān)性分析[J]. 許美容,陳燕玲,鄧曉玲. 植物病理學(xué)報. 2016(03)
[8]臺州新發(fā)現(xiàn)甘薯莖腐病[J]. 張敏榮,余繼華,盧璐,陶健. 植物檢疫. 2016(03)
[9]甜瓜細(xì)菌性葉枯病菌膠體金ICA檢測試紙條的研發(fā)與應(yīng)用[J]. 繆林玉,王利民,田艷麗,趙玉強,胡白石. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2016(01)
[10]柑橘黃龍病研究概況[J]. 陳凱男,李充璧. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(07)
碩士論文
[1]小麥矮縮病毒和大麥黃矮病毒PAV株系基于單克隆抗體的血清學(xué)檢測技術(shù)[D]. 張明皓.浙江大學(xué) 2017
[2]蘋果莖痘病毒梨分離物和蘋果莖溝病毒基于單克隆抗體的血清學(xué)檢測技術(shù)[D]. 孫朱元吉.浙江大學(xué) 2017
[3]馬鈴薯S病毒和馬鈴薯Y病毒單克隆抗體的制備及應(yīng)用[D]. 宋革.浙江大學(xué) 2016
[4]大麥黃矮病毒GAV株系和小麥黃花葉病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 李娜.浙江大學(xué) 2015
[5]柑橘碎葉病毒和香蕉束頂病毒單克隆抗體的制備及其檢測應(yīng)用[D]. 宋西嬌.浙江大學(xué) 2014
[6]柑橘黃龍病LAMP檢測方法的建立及病原菌亞洲種種群分化研究[D]. 黃麗.西南大學(xué) 2013
[7]水稻矮縮病毒和水稻黑條矮縮病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 倪躍群.浙江大學(xué) 2013
[8]南方水稻黑條矮縮病毒和中國小麥花葉病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 劉歡.浙江大學(xué) 2013
[9]番茄黃化曲葉病毒和黃瓜綠斑駁花葉病毒單克隆抗體的制備及其檢測應(yīng)用[D]. 尚海麗.浙江大學(xué) 2011
[10]應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)研究亞洲韌皮部桿菌在寄主體內(nèi)的動態(tài)變化及分布[D]. 胡浩.重慶大學(xué) 2007
本文編號:2969472
【文章來源】:浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:91 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1.?1世界柑橘黃龍病的分布(引自高玉霞,2015)??
柑橘黃龍病在柑橘果樹上造成的癥狀表現(xiàn)為:初期樹梢嫩葉表現(xiàn)缺綠狀,后??期葉片遐綠黃化,伴隨著葉脈腫突,產(chǎn)生黃綠相間的斑駁,再長的新梢葉片細(xì)狹??長,呈缺鋅癥狀(圖1.2?C);感染了黃龍病的植株的花期會提前,花量變多,??但很容易脫落,且坐果率低,有的病樹開花時間不確定(黃麗,2013);初期的果??實不顯現(xiàn)出明顯的癥狀,果實成熟期提前,果實出現(xiàn)脫落,且果實較小,果皮較??硬且著色不正常,形成青鼻果、畸形果、軟果等(圖1.2?B),導(dǎo)致果實品質(zhì)和??產(chǎn)量下降,從而造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失(范懷忠等,1986?)。當(dāng)葉片黃化脫落,樹??勢生長變衰弱時,伴隨著根部慢慢開始腐爛,腐爛的根部表層與下層組織脫落分??離,到了后期主側(cè)根逐漸全部腐爛,木質(zhì)部變成黑色(白華菊等,2009)。通過對染??病植株葉片的亞顯微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞結(jié)構(gòu)出現(xiàn)明顯變化:葉綠體結(jié)構(gòu)中淀粉??粒膨大
在柑橘黃龍病檢測取樣時,應(yīng)該選取老熟葉的葉柄,切割含有中脈及其??附近少量組織,病原菌提取時可取葉片中下部側(cè)脈(蘇華楠等,2014)。因為病??原菌主要集中分布在主葉脈,葉肉和細(xì)小側(cè)脈中病原菌含量很低(圖1.3)。??敷??('I.as?content??詆Low??圖1.3?HLB病原在柑橘葉片中的主要分布及含量示意圖(引自蘇華楠等,2014)??Fig.?1.3?Distribution?of?Candidatus?Liberibacter?asiaticus?in?citrus?leaves?from?Su??et?al.?(2014)??1.?3.?3柑橘黃龍病病原菌的寄主??柑橘黃龍病菌的寄主多為蕓香科植物,能感染如柑橘屬)、枳屬??(P0A7C///1/51?/廠辦//(7如)和金柑屬(/^廣/";^//“?#/;.)等植物(Miyakawa?et?al.,?1990)。??除此之外,酒餅簕(iSever/>7/f7?6wx//o//G)?(Hung?etal.,2001)、開普板栗(CAms^a??)、九里香()(Hung?et?al.,200?丨)和黃皮(??臓)(Gamieretal.,1983)也都可成為柑橘黃龍病菌的寄主。除了蕓香科植??物
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]柑橘黃龍病發(fā)病規(guī)律及防控關(guān)鍵技術(shù)要點[J]. 黃源. 南方農(nóng)業(yè). 2018(15)
[2]柑橘黃龍病快速診斷與檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 肖翠,廖晶晶,何利剛,仝鑄,吳黎明,王志靜,蔣迎春,黃詠明,孫中海. 農(nóng)業(yè)科技通訊. 2017(12)
[3]甘薯莖腐病防治初探[J]. 盧璐,張敏榮,楊曉,余繼華,陶健. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2017(09)
[4]柑橘黃龍病碘—淀粉法快速檢測技術(shù)優(yōu)化[J]. 王許會,郭洋洋,全金成,張宇宏,陳慈相,邱棟梁,毛潤乾. 福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2017(04)
[5]甘薯莖腐病的發(fā)生危害及防控對策[J]. 楊曉,張敏榮,余繼華,盧璐,陶健. 農(nóng)業(yè)與技術(shù). 2017(02)
[6]柑橘黃龍病分子生物學(xué)檢測方法研究進(jìn)展[J]. 盧乃會,李強有,張曼其,何紅,黃勤知,趙麗宏. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2016(12)
[7]柑橘黃龍病癥狀與“Candidatus Liberibacter asiaticus”PCR檢測結(jié)果的相關(guān)性分析[J]. 許美容,陳燕玲,鄧曉玲. 植物病理學(xué)報. 2016(03)
[8]臺州新發(fā)現(xiàn)甘薯莖腐病[J]. 張敏榮,余繼華,盧璐,陶健. 植物檢疫. 2016(03)
[9]甜瓜細(xì)菌性葉枯病菌膠體金ICA檢測試紙條的研發(fā)與應(yīng)用[J]. 繆林玉,王利民,田艷麗,趙玉強,胡白石. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2016(01)
[10]柑橘黃龍病研究概況[J]. 陳凱男,李充璧. 浙江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(07)
碩士論文
[1]小麥矮縮病毒和大麥黃矮病毒PAV株系基于單克隆抗體的血清學(xué)檢測技術(shù)[D]. 張明皓.浙江大學(xué) 2017
[2]蘋果莖痘病毒梨分離物和蘋果莖溝病毒基于單克隆抗體的血清學(xué)檢測技術(shù)[D]. 孫朱元吉.浙江大學(xué) 2017
[3]馬鈴薯S病毒和馬鈴薯Y病毒單克隆抗體的制備及應(yīng)用[D]. 宋革.浙江大學(xué) 2016
[4]大麥黃矮病毒GAV株系和小麥黃花葉病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 李娜.浙江大學(xué) 2015
[5]柑橘碎葉病毒和香蕉束頂病毒單克隆抗體的制備及其檢測應(yīng)用[D]. 宋西嬌.浙江大學(xué) 2014
[6]柑橘黃龍病LAMP檢測方法的建立及病原菌亞洲種種群分化研究[D]. 黃麗.西南大學(xué) 2013
[7]水稻矮縮病毒和水稻黑條矮縮病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 倪躍群.浙江大學(xué) 2013
[8]南方水稻黑條矮縮病毒和中國小麥花葉病毒單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D]. 劉歡.浙江大學(xué) 2013
[9]番茄黃化曲葉病毒和黃瓜綠斑駁花葉病毒單克隆抗體的制備及其檢測應(yīng)用[D]. 尚海麗.浙江大學(xué) 2011
[10]應(yīng)用熒光定量PCR技術(shù)研究亞洲韌皮部桿菌在寄主體內(nèi)的動態(tài)變化及分布[D]. 胡浩.重慶大學(xué) 2007
本文編號:2969472
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