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平菇漆酶菌株的篩選及其對黃曲霉毒素的降解研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-04 10:13
  黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)是曲霉屬真菌產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物,是目前所發(fā)現(xiàn)的毒性最強(qiáng)的真菌毒素之一,屬于I級致癌物質(zhì)。黃曲霉毒素B1廣泛存在于玉米、花生等農(nóng)作物中,對人畜具有致畸、致癌、致突變等作用。黃曲霉也是平菇栽培過程的一種重要病原真菌,會引起平菇產(chǎn)量及品質(zhì)的下降。本研究旨在篩選出漆酶活性高、對黃曲霉具有較強(qiáng)抗性的平菇菌株,并對其降解黃曲霉毒素B1的效果進(jìn)行研究,為平菇的綠色安全生產(chǎn)以及農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素的處理提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.采用愈創(chuàng)木酚、單寧酸和ABTS選擇培養(yǎng)基對平菇漆酶進(jìn)行初步篩選,根據(jù)據(jù)氧化圈/菌絲圈大小和顏色變化等特征,從24株平菇菌株中初步篩選得到8株漆酶活力較高的菌株,將初篩獲得菌株進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng),測定發(fā)酵液的漆酶活性,復(fù)篩得到2株漆酶活性最強(qiáng)菌株P(guān)6和P20。2.選用平菇漆酶高產(chǎn)菌株P(guān)6和P20發(fā)酵液對AFB1進(jìn)行降解,P6和P20菌株初發(fā)酵液對AFB1的降解率分別為86.4%和72.12%。P6菌株發(fā)酵液添加Cu2+和表面活性劑Triton X-100后,其對AFB1的降解率分別提高到90.43%和92.88%,吐溫20對平菇... 

【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

平菇漆酶菌株的篩選及其對黃曲霉毒素的降解研究


圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?cur?

色譜圖,混合液,色譜圖,黃曲霉毒素


A:?-1.133704e+004;?B:?2.567684e+006;?C:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?D:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?RA2:??0.999170;名稱B1;處理方法黃眭霉;擬合類型線性(一階>;校正齒線ID?6539??圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?curve?of?AFB1??(4)黃曲霉毒素Bl、B2、Gl、G2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??選用檢測黃曲霉毒素的專用柱-Agilent?TC-C18色譜柱(150mm><4.6mmx5fim),??通過調(diào)整流動相的流速,將4種黃曲霉毒素完全分開,得出標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖。圖中??G2出峰時(shí)間最早,為10-12min間,B1出峰時(shí)間最晚,于16-18min間出現(xiàn),并從液相??色譜圖可以看出檢測到了平穩(wěn)的基線。??3?;?*?I??120001??i?g?^??!〇〇〇〇|?w?m??:??80_00?乂??6000;??mm'?5?5??om;j??obo?2,Q〇?4m?aos?nm?um?nm?nm?wm??ir#??圖2-2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??Fig.?2-2?Chromatogram?of?mixture?Standards??17??

均勻分布,顏色反應(yīng),平菇


3.1.1.[平菇菌株在選擇培養(yǎng)基平板上的顏色反應(yīng)??菌株在不同的選擇平板上會產(chǎn)生不同的顏色反應(yīng),漆酶與單寧酸、愈創(chuàng)木酚和ABTS??反應(yīng),分別產(chǎn)生淺黃色,棕紅色,紫色的變色圈(如圖3-1)。平菇菌株接菌后的1?-2h??內(nèi),在ABTS和愈創(chuàng)木酚選擇培養(yǎng)基上產(chǎn)生不同顏色的氧化圈,24h后在單寧酸選擇培養(yǎng)??基上產(chǎn)生淡黃色氧化圈。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,氧化圈與菌絲圈直徑均有不同程度的增??力口,氧化圈的顏色也不斷加深,但R值(氧化圈/菌絲圈)大體呈現(xiàn)出下降的趨勢。通過??第3d和第7d的測量結(jié)果,可以將菌株分成3類,第一類是在初期菌絲生長較迅速,氧化??圈的顏色深,但變色直徑相對較小。第二類是菌株前期生長緩慢,氧化圈的顏色深淺隨??著菌株菌絲的生長而在平板上均勻分布,變色直徑較大。第三類是生長一直較為緩慢,??氧化圈的顏色深,且變色直徑大。在單寧酸選擇培養(yǎng)基菌絲生長狀況良好,但整體而言??顏色變化不明顯

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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碩士論文
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本文編號:2956605

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