平菇漆酶菌株的篩選及其對黃曲霉毒素的降解研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-04 10:13
黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)是曲霉屬真菌產(chǎn)生的一種次級代謝產(chǎn)物,是目前所發(fā)現(xiàn)的毒性最強(qiáng)的真菌毒素之一,屬于I級致癌物質(zhì)。黃曲霉毒素B1廣泛存在于玉米、花生等農(nóng)作物中,對人畜具有致畸、致癌、致突變等作用。黃曲霉也是平菇栽培過程的一種重要病原真菌,會引起平菇產(chǎn)量及品質(zhì)的下降。本研究旨在篩選出漆酶活性高、對黃曲霉具有較強(qiáng)抗性的平菇菌株,并對其降解黃曲霉毒素B1的效果進(jìn)行研究,為平菇的綠色安全生產(chǎn)以及農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素的處理提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.采用愈創(chuàng)木酚、單寧酸和ABTS選擇培養(yǎng)基對平菇漆酶進(jìn)行初步篩選,根據(jù)據(jù)氧化圈/菌絲圈大小和顏色變化等特征,從24株平菇菌株中初步篩選得到8株漆酶活力較高的菌株,將初篩獲得菌株進(jìn)行液體發(fā)酵培養(yǎng),測定發(fā)酵液的漆酶活性,復(fù)篩得到2株漆酶活性最強(qiáng)菌株P(guān)6和P20。2.選用平菇漆酶高產(chǎn)菌株P(guān)6和P20發(fā)酵液對AFB1進(jìn)行降解,P6和P20菌株初發(fā)酵液對AFB1的降解率分別為86.4%和72.12%。P6菌株發(fā)酵液添加Cu2+和表面活性劑Triton X-100后,其對AFB1的降解率分別提高到90.43%和92.88%,吐溫20對平菇...
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?cur?
A:?-1.133704e+004;?B:?2.567684e+006;?C:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?D:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?RA2:??0.999170;名稱B1;處理方法黃眭霉;擬合類型線性(一階>;校正齒線ID?6539??圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?curve?of?AFB1??(4)黃曲霉毒素Bl、B2、Gl、G2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??選用檢測黃曲霉毒素的專用柱-Agilent?TC-C18色譜柱(150mm><4.6mmx5fim),??通過調(diào)整流動相的流速,將4種黃曲霉毒素完全分開,得出標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖。圖中??G2出峰時(shí)間最早,為10-12min間,B1出峰時(shí)間最晚,于16-18min間出現(xiàn),并從液相??色譜圖可以看出檢測到了平穩(wěn)的基線。??3?;?*?I??120001??i?g?^??!〇〇〇〇|?w?m??:??80_00?乂??6000;??mm'?5?5??om;j??obo?2,Q〇?4m?aos?nm?um?nm?nm?wm??ir#??圖2-2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??Fig.?2-2?Chromatogram?of?mixture?Standards??17??
3.1.1.[平菇菌株在選擇培養(yǎng)基平板上的顏色反應(yīng)??菌株在不同的選擇平板上會產(chǎn)生不同的顏色反應(yīng),漆酶與單寧酸、愈創(chuàng)木酚和ABTS??反應(yīng),分別產(chǎn)生淺黃色,棕紅色,紫色的變色圈(如圖3-1)。平菇菌株接菌后的1?-2h??內(nèi),在ABTS和愈創(chuàng)木酚選擇培養(yǎng)基上產(chǎn)生不同顏色的氧化圈,24h后在單寧酸選擇培養(yǎng)??基上產(chǎn)生淡黃色氧化圈。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,氧化圈與菌絲圈直徑均有不同程度的增??力口,氧化圈的顏色也不斷加深,但R值(氧化圈/菌絲圈)大體呈現(xiàn)出下降的趨勢。通過??第3d和第7d的測量結(jié)果,可以將菌株分成3類,第一類是在初期菌絲生長較迅速,氧化??圈的顏色深,但變色直徑相對較小。第二類是菌株前期生長緩慢,氧化圈的顏色深淺隨??著菌株菌絲的生長而在平板上均勻分布,變色直徑較大。第三類是生長一直較為緩慢,??氧化圈的顏色深,且變色直徑大。在單寧酸選擇培養(yǎng)基菌絲生長狀況良好,但整體而言??顏色變化不明顯
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃曲霉毒素降解技術(shù)及其降解產(chǎn)物研究進(jìn)展[J]. 莫紫梅,袁光蔚,陳寧周,鄭娟梅,王警,王海波. 食品研究與開發(fā). 2019(02)
[2]黃曲霉毒素生物脫毒法研究進(jìn)展[J]. 王少軍,于春娣,唐娟,程果,謝曉麗,楊慶利. 食品研究與開發(fā). 2018(24)
[3]食品中黃曲霉毒素的污染與檢測[J]. 谷怡靜. 農(nóng)產(chǎn)品加工. 2018(16)
[4]真菌漆酶在綠色化學(xué)中的研究進(jìn)展[J]. 龔睿,孫凱,謝道月. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(04)
[5]2017年上半年我國部分地區(qū)飼料及飼料原料中霉菌毒素的污染狀況分析[J]. 劉鳳芝,李鋒,王永麗. 糧食與飼料工業(yè). 2017(11)
[6]蓮子中黃曲霉毒素去除方法研究[J]. 羅小榮,李人趙,付剛劍,胡日升,黃高科,葛孝菲. 現(xiàn)代食品. 2017(19)
[7]植物油中黃曲霉毒素B1的污染狀況調(diào)查分析[J]. 殷國英,劉思超,廖靈靈. 預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志. 2017(06)
[8]雙效型酵母細(xì)胞壁提取物及其對黃曲霉毒素B1吸附特性研究[J]. 錢潘攀,李紅波,趙巖巖,周威,莫海珍,胡梁斌. 食品工業(yè)科技. 2017(15)
[9]農(nóng)產(chǎn)品中有害微生物及其產(chǎn)生的生物毒素污染與防控探析[J]. 金諾. 中國食物與營養(yǎng). 2017(02)
[10]黃曲霉毒素的危害及其脫毒方法研究進(jìn)展[J]. 喬宏興,姜亞樂,王永芬,史洪濤,邊傳周. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(01)
碩士論文
[1]白腐真菌產(chǎn)漆酶培養(yǎng)基的優(yōu)化及對嘧菌酯的降解[D]. 李環(huán)明.佳木斯大學(xué) 2017
[2]生物法降解黃曲霉毒素B1的初步研究[D]. 張盼.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[3]真菌毒素臭氧降解及其他脫毒方法研究[D]. 張芳.江南大學(xué) 2014
[4]平菇木霉病的病原鑒定及其防治初步研究[D]. 陳艷露.廣西大學(xué) 2013
[5]花生中黃曲霉毒素降解技術(shù)研究[D]. 陳冉.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[6]平菇降解黃曲霉毒素的研究[D]. 王會娟.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[7]霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1吸附特性及效果研究[D]. 劉媛婷.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號:2956605
【文章來源】:廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?cur?
A:?-1.133704e+004;?B:?2.567684e+006;?C:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?D:?〇.〇〇〇〇〇〇e+000;?RA2:??0.999170;名稱B1;處理方法黃眭霉;擬合類型線性(一階>;校正齒線ID?6539??圖2-1?AFB1校正曲線??Fig.2-1?Calibration?curve?of?AFB1??(4)黃曲霉毒素Bl、B2、Gl、G2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??選用檢測黃曲霉毒素的專用柱-Agilent?TC-C18色譜柱(150mm><4.6mmx5fim),??通過調(diào)整流動相的流速,將4種黃曲霉毒素完全分開,得出標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖。圖中??G2出峰時(shí)間最早,為10-12min間,B1出峰時(shí)間最晚,于16-18min間出現(xiàn),并從液相??色譜圖可以看出檢測到了平穩(wěn)的基線。??3?;?*?I??120001??i?g?^??!〇〇〇〇|?w?m??:??80_00?乂??6000;??mm'?5?5??om;j??obo?2,Q〇?4m?aos?nm?um?nm?nm?wm??ir#??圖2-2標(biāo)準(zhǔn)混合液色譜圖??Fig.?2-2?Chromatogram?of?mixture?Standards??17??
3.1.1.[平菇菌株在選擇培養(yǎng)基平板上的顏色反應(yīng)??菌株在不同的選擇平板上會產(chǎn)生不同的顏色反應(yīng),漆酶與單寧酸、愈創(chuàng)木酚和ABTS??反應(yīng),分別產(chǎn)生淺黃色,棕紅色,紫色的變色圈(如圖3-1)。平菇菌株接菌后的1?-2h??內(nèi),在ABTS和愈創(chuàng)木酚選擇培養(yǎng)基上產(chǎn)生不同顏色的氧化圈,24h后在單寧酸選擇培養(yǎng)??基上產(chǎn)生淡黃色氧化圈。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,氧化圈與菌絲圈直徑均有不同程度的增??力口,氧化圈的顏色也不斷加深,但R值(氧化圈/菌絲圈)大體呈現(xiàn)出下降的趨勢。通過??第3d和第7d的測量結(jié)果,可以將菌株分成3類,第一類是在初期菌絲生長較迅速,氧化??圈的顏色深,但變色直徑相對較小。第二類是菌株前期生長緩慢,氧化圈的顏色深淺隨??著菌株菌絲的生長而在平板上均勻分布,變色直徑較大。第三類是生長一直較為緩慢,??氧化圈的顏色深,且變色直徑大。在單寧酸選擇培養(yǎng)基菌絲生長狀況良好,但整體而言??顏色變化不明顯
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]黃曲霉毒素降解技術(shù)及其降解產(chǎn)物研究進(jìn)展[J]. 莫紫梅,袁光蔚,陳寧周,鄭娟梅,王警,王海波. 食品研究與開發(fā). 2019(02)
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[4]真菌漆酶在綠色化學(xué)中的研究進(jìn)展[J]. 龔睿,孫凱,謝道月. 生物技術(shù)通報(bào). 2018(04)
[5]2017年上半年我國部分地區(qū)飼料及飼料原料中霉菌毒素的污染狀況分析[J]. 劉鳳芝,李鋒,王永麗. 糧食與飼料工業(yè). 2017(11)
[6]蓮子中黃曲霉毒素去除方法研究[J]. 羅小榮,李人趙,付剛劍,胡日升,黃高科,葛孝菲. 現(xiàn)代食品. 2017(19)
[7]植物油中黃曲霉毒素B1的污染狀況調(diào)查分析[J]. 殷國英,劉思超,廖靈靈. 預(yù)防醫(yī)學(xué)情報(bào)雜志. 2017(06)
[8]雙效型酵母細(xì)胞壁提取物及其對黃曲霉毒素B1吸附特性研究[J]. 錢潘攀,李紅波,趙巖巖,周威,莫海珍,胡梁斌. 食品工業(yè)科技. 2017(15)
[9]農(nóng)產(chǎn)品中有害微生物及其產(chǎn)生的生物毒素污染與防控探析[J]. 金諾. 中國食物與營養(yǎng). 2017(02)
[10]黃曲霉毒素的危害及其脫毒方法研究進(jìn)展[J]. 喬宏興,姜亞樂,王永芬,史洪濤,邊傳周. 動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(01)
碩士論文
[1]白腐真菌產(chǎn)漆酶培養(yǎng)基的優(yōu)化及對嘧菌酯的降解[D]. 李環(huán)明.佳木斯大學(xué) 2017
[2]生物法降解黃曲霉毒素B1的初步研究[D]. 張盼.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
[3]真菌毒素臭氧降解及其他脫毒方法研究[D]. 張芳.江南大學(xué) 2014
[4]平菇木霉病的病原鑒定及其防治初步研究[D]. 陳艷露.廣西大學(xué) 2013
[5]花生中黃曲霉毒素降解技術(shù)研究[D]. 陳冉.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2013
[6]平菇降解黃曲霉毒素的研究[D]. 王會娟.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[7]霉菌毒素吸附劑對黃曲霉毒素B1吸附特性及效果研究[D]. 劉媛婷.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
本文編號:2956605
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