棉花黃萎病是由大麗輪枝菌(Verticillium dahliae Kleb)引起的危害比較嚴(yán)重的土傳病害。目前,以生物防治為主的綜合防治措施越來越受到人們的關(guān)注,在棉花黃萎病的防治中有著極其重要的意義。棉花黃萎病的生物防治措施中尤以微生物殺菌劑防治為重要途徑。枯草芽胞桿菌NCD-2菌株是一株從棉花根際土壤中分離得到的拮抗菌株,對棉花黃萎病表現(xiàn)出比較理想的防治效果。以該菌株為有效成分的微生物農(nóng)藥已通過國家農(nóng)藥正式登記(PD20101654)。本試驗(yàn)采用室內(nèi)模擬方法,探討滴灌條件下枯草芽胞桿菌NCD-2菌株在土壤、棉花根際和根表土壤中的種群動態(tài),以及對棉花黃萎病的防治效果。取得了以下研究結(jié)果:(1)利用枯草芽胞桿菌NCD-2菌株為材料,通過濃度梯度誘導(dǎo)篩選出一株能在含300μg/mL利福平培養(yǎng)基上正常生長的標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif),該菌株的菌落形態(tài)和生長曲線與野生菌株無顯著差異。(2)采用抗性平板菌落計數(shù)法,檢測抗性菌株NCD-2~(Rif)在不同深層土壤中的數(shù)量變化情況。結(jié)果表明,標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)通過滴灌方式滴到土壤后,其菌量隨著滴灌時間和土壤深度的不同而不同。在滴灌后第21 d,5 cm和10 cm處菌體數(shù)量達(dá)到峰值,之后菌體數(shù)量急劇下降;5 cm土層中菌體數(shù)量在滴灌35 d后趨于穩(wěn)定;10 cm土層中菌體數(shù)量在滴灌28 d后趨于穩(wěn)定。在滴灌第14 d后,15 cm和20 cm處菌量達(dá)到峰值,之后菌體數(shù)量急劇下降;15 cm土層中菌體數(shù)量在滴灌21 d后趨于穩(wěn)定;20 cm土層中菌體數(shù)量在滴灌35 d后趨于穩(wěn)定。在滴灌后的第1 d,25 cm和30 cm處的菌體數(shù)量即達(dá)到峰值,之后菌體數(shù)量急劇下降;25 cm土層中菌體數(shù)量在滴灌35d后趨于穩(wěn)定;30 cm處菌體數(shù)量在滴灌28 d后趨于穩(wěn)定。隨著土壤深度加深,土壤中標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)的菌體數(shù)量呈下降趨勢;隨著取樣時間的延長,各層土壤中標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)的菌體數(shù)量也呈下降趨勢。(3)通過抗生素抗性標(biāo)記法結(jié)合盆栽試驗(yàn),以滴灌的方式接種標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif),并于接種后的不同時間檢測該標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)在棉花根際土和根表中的定殖數(shù)量。結(jié)果表明,標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)在棉花根際土與根表中均能夠定殖,接種后第1 d該菌株在根際土和根表中的菌體數(shù)量達(dá)到峰值;接種35 d后,標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)在根際土和根表中的定殖量仍然能達(dá)到較高水平,同時發(fā)現(xiàn)該標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)在棉花根際土的菌體數(shù)量高于在根表中的數(shù)量;隨著時間的延長,棉花根際土壤中標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)的菌體數(shù)量急劇下降,而根表上標(biāo)記菌株NCD-2~(Rif)的菌體數(shù)量下降平緩。(4)利用盆栽試驗(yàn)檢測滴灌條件下枯草芽胞桿菌NCD-2可濕性粉劑對棉花黃萎病的防治效果。在明確其安全使用劑量的基礎(chǔ)上,檢測不同滴灌劑量對棉花黃萎病的防治效果。采用5 kg/畝、3 kg/畝和1 kg/畝不同劑量生防菌劑滴灌處理后,其出苗率分別為84.38%、80.73%和79.17%,三個處理間出苗率差異不顯著,與空白對照相比,5 kg/畝和3 kg/畝處理的棉花出苗率顯著提高,1 kg/畝處理的棉花的苗率差異不顯著,說明該制劑所使用的劑量均對棉花安全。防效測定結(jié)果表明,5 kg/畝生防菌劑使用劑量的防治效果最高,為40.19%,3 kg/畝的防治效果為23.95%,1 kg/畝的防治效果為15.50%,說明隨著生防菌劑使用劑量的提高,其對棉花黃萎病的防治效果呈提高的趨勢。
【學(xué)位單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S435.62;S476
【文章目錄】：
摘要
abstract
1 引言
    1.1 棉花黃萎病發(fā)生概況及主要防治方法
        1.1.1 棉花黃萎病的分布與危害
        1.1.2 常規(guī)防治方法
    1.2 棉花黃萎病的生物防治
        1.2.1 生防因子種類
        1.2.2 芽胞桿菌研究概況
        1.2.3 芽胞桿菌作用機(jī)制
    1.3 生防菌的定殖動態(tài)
        1.3.1 抗生素標(biāo)記法
        1.3.2 生防細(xì)菌定殖
    1.4 生防菌制劑的使用方法
        1.4.1 生防菌的種類
        1.4.2 生防菌制劑的使用方法
    1.5 滴灌技術(shù)簡介與應(yīng)用概況
        1.5.1 滴灌技術(shù)
        1.5.2 滴灌施藥技術(shù)
    1.6 本研究的目的意義
2 材料與方法
    2.1 供試材料
        2.1.1 所用培養(yǎng)基
        2.1.2 主要藥品
        2.1.3 用具
        2.1.4 器材
    2.2 土壤的處理
    2.3 菌株NCD-2的定殖測定
        2.3.1 抗生素利福平作為抗性標(biāo)記藥劑母液的配制
        2.3.2 稀釋涂布平板法
        2.3.3 枯草芽胞桿菌NCD-2菌株抗利福平標(biāo)記菌株的篩選
        2.3.4 枯草芽胞桿菌NCD-2菌株標(biāo)記菌株活性檢測
Rif菌懸液的制備'>        2.3.5 標(biāo)記菌株NCD-2^Rif菌懸液的制備
Rif在土壤中的定殖動態(tài)測定'>    2.4 標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在土壤中的定殖動態(tài)測定
Rif在棉花根際土壤與根表的消長規(guī)律'>    2.5 標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在棉花根際土壤與根表的消長規(guī)律
Rif在棉花根際土壤的定殖情況'>        2.5.1 標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在棉花根際土壤的定殖情況
Rif在棉花根表的定殖情況'>        2.5.2 標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在棉花根表的定殖情況
    2.6 “10億活芽孢/克枯草芽胞桿菌可濕性粉劑”對棉花黃萎病的效果評價
        2.6.1 不同滴灌劑量對棉花出苗的影響
        2.6.2 不同滴灌劑量對棉花黃萎病盆栽效果的測定
    2.7 數(shù)據(jù)處理方法
3 結(jié)果與分析
    3.1 枯草芽胞桿菌NCD-2標(biāo)記菌株的篩選與評價
        3.1.1 標(biāo)記菌株的獲得與野生型菌株菌落的形態(tài)比較
        3.1.2 標(biāo)記菌株與野生型菌株生長動態(tài)比較
        3.1.3 枯草芽胞桿菌NCD-2標(biāo)記菌株抑菌活性比較
    3.2 枯草芽胞桿菌NCD-2菌株在土壤中的定殖動態(tài)
    3.3 枯草芽胞桿菌NCD-2菌株在棉花根際土壤與根表的消長規(guī)律
    3.4 枯草芽胞桿菌可濕性粉劑防治棉花黃萎病的溫室盆栽效果
4 討論
    4.1 枯草芽胞桿菌NCD-2菌株抗性標(biāo)記菌株的獲得
Rif在土壤中的分布研究'>    4.2 關(guān)于標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在土壤中的分布研究
Rif在棉花根際土壤中的分布研究'>    4.3 關(guān)于標(biāo)記菌株NCD-2^Rif在棉花根際土壤中的分布研究
    4.4 關(guān)于滴灌的使用技術(shù)
    4.5 關(guān)于枯草芽胞桿菌防治棉花黃萎病的研究
    4.6 枯草芽胞桿菌在植物病害生物防治中存在的問題和展望
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
致謝
詳細(xì)摘要

【參考文獻(xiàn)】

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