桃細(xì)菌性穿孔病(peach bacterial shot hole)是危害桃樹的一種重要病害,嚴(yán)重影響桃產(chǎn)業(yè)的健康和可持續(xù)發(fā)展。為了有效地控制該病害,本文對其病菌遺傳多樣性、病害消長規(guī)律以及藥劑篩選與田間防治等方面進(jìn)行了研究。采集我國桃主產(chǎn)區(qū)的桃細(xì)菌性穿孔病病葉、病果和病枝,通過分離和純化,獲得分離物。經(jīng)菌落特征、生理生化特性和16S-23SrDNAITS序列分析,51株分離物鑒定為Xanthomonas arboricolapv.runi,即樹生黃單胞李致病變種。使用Rep-PCR和ISSR-PCR方法對51株分離物進(jìn)行聚類分析,發(fā)現(xiàn)分離株間具有同源性,也存在一定的多樣性,其多樣性與不同地理來源具有一定程度的相關(guān)性。絕大多數(shù)分離株都能在桃葉片、果實(shí)上引起癥狀,在非寄主煙草上引起過敏性壞死反應(yīng),但分離株間致病反應(yīng)類型和強(qiáng)弱存在一定的差異。在江蘇無錫市陽山鎮(zhèn)寺前村桃園基地連續(xù)兩年的病情動態(tài)調(diào)查表明,桃細(xì)菌性穿孔病一般在4月底5月初出現(xiàn)病葉,6月至8月病情快速上升,之后趨于飽和。結(jié)合天氣情況分析發(fā)現(xiàn),桃細(xì)菌性穿孔病的發(fā)生嚴(yán)重程度與濕度、溫度尤其是降雨量密切相關(guān),即愈是高溫高濕的天氣病害發(fā)生愈是嚴(yán)重,愈是降雨量大的天氣愈有利于病菌的傳播,而干旱少雨的高溫天氣不利于病害流行和蔓延。采用抑菌圈法室內(nèi)測定了 7種生物殺菌劑和11種化學(xué)殺菌劑對桃細(xì)菌性穿孔病菌的毒力,篩選出高效藥劑,生物農(nóng)藥梧寧霉素、農(nóng)用硫酸鏈霉素和中生菌素對病菌都有較強(qiáng)的抑制效果,EC5o值分別為0.0651 μg/mL、0.0698 μg/mL和1.2422 μg/mL;化學(xué)殺菌劑中氯溴異氰尿酸對桃細(xì)菌性穿孔病菌的抑菌能力最強(qiáng),EC5o值為0.0559 μg/mL,其次是噻唑鋅、溴菌腈、噻霉酮和喹啉銅。田間防治試驗(yàn)表明,在江蘇無錫異菌脲、噻唑鋅對細(xì)菌性穿孔病的防效較好,在遼寧大連喹啉銅、農(nóng)用硫酸鏈霉素和噻唑鋅的防效較好,而在福建福州農(nóng)用硫酸鏈霉素的防效最好,其次是中生菌素,不同產(chǎn)區(qū)試驗(yàn)地間藥劑防效存在差異。
【學(xué)位單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S436.621.1
【部分圖文】：

采集病枝病葉病果分離時(shí)，用病部溢出液在ＮＡ平板上劃線，２８°Ｃ培養(yǎng)Ｉｄ后，沿著??劃線軌跡會長出黃色濕潤粘稠的菌體；然后從分離平板上繼續(xù)挑取單菌落劃線，純化４？５??次，得到淡黃色、濕潤、粘稠、飽滿的菌體菌落（如圖２）。???圖２部分分離株平板菌落形態(tài)??

接成片、干枯脫落，甚至導(dǎo)致葉片脫落；而在枝條上，會形成紫褐色的病斑；在桃果實(shí)上，??初期會形成圓形褐色小病斑，病斑周圍有黃綠色暈圈，后期嚴(yán)重時(shí)病斑會連接成片、開裂，??同時(shí)病斑部位會凹陷，形成花臉狀病斑（圖１）。??Ｄ??＿丨｜丨丨｜＿丨丨｜１丨丨丨丨１丨丨＿？??詹級著??圖１桃細(xì)菌性穿孔病癥狀??Ａ－Ｃ：桃葉上的褐色病斑；Ｄ－Ｆ：桃枝條上的褐色病斑；Ｇ－Ｉ：桃果實(shí)上的花臉病斑。??采集病枝病葉病果分離時(shí)，用病部溢出液在ＮＡ平板上劃線，２８°Ｃ培養(yǎng)Ｉｄ后，沿著??劃線軌跡會長出黃色濕潤粘稠的菌體；然后從分離平板上繼續(xù)挑取單菌落劃線，純化４？５??次，得到淡黃色、濕潤、粘稠、飽滿的菌體菌落（如圖２）。???圖２部分分離株平板菌落形態(tài)??

以Ｚａｐ細(xì)菌ｇＤＮＡ為模板，用ＢＯＸ引物進(jìn)行ＰＣＲ反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增的片段大小主要在??１０００?ｂｐ？２３００?ｂｐ，有５個(gè)指紋位點(diǎn)，共有４種指紋譜型，其中，最多一種指紋譜型出現(xiàn)４３??次。對５１株分離株ＵＰＧＭＡ聚類分析表明（圖５），在相似水平為０．８時(shí)，供試的５１個(gè)??菌株大體可以聚為Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ四簇。其中，大部分分離株聚類在Ａ簇，有４３個(gè)菌株，??包括來自遼寧２７個(gè)、浙江６個(gè)、江蘇６個(gè)，廣西４個(gè)；Ｂ族中僅有１個(gè)，來自遼寧；Ｃ簇??中有１個(gè)遼寧，２個(gè)浙江的分離株；Ｄ簇有１個(gè)浙江，１個(gè)江蘇，２個(gè)遼寧的分離株。??Ｉ：］??９－３??？－５??５１４??１９－；??Ａ?１?樸??ｉｌＪｉ??１５ｆｃ??１１１：??ｉ?ｕ－ｉ??■??ｉ§??ｊｉＣｆｃ??ａ??Ｉ０ｃ??？．．１０??—￣Ｂ?匕???ｃ?ｉ�。�??！??＇ｌ？．２???ｄ?ｉｌ〇ｉ??ｒ－，—，……「????Ｉｓ??Ｉ?＇?＇?＇?Ｉ?＇?＇?＇?＇?１?＇?＇?＇?＇?Ｔ?１?＇?＇?＇?Ｉ??０＊２?ＯＳ＇?ｆｌ７１?ＯＭ?１００??圖５?５１株分離株的ＢＯＸ－ＰＣＲ聚類分析圖??
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