獼猴桃潰瘍病(kiwifruit bacterial canker)是獼猴桃產業(yè)爆發(fā)的細菌性病害,病原菌為丁香假單孢桿菌獼猴桃致病變種(Pseudomonassyringae pv.actinidiae,Psa)。Psa寄主范圍廣,危害嚴重。陜西作為中國獼猴桃最大種植區(qū),近年來由于獼猴桃植株感染Psa日趨嚴重,影響果實品質與商品性。Psa的早期診斷、早期預防是預防大面積爆發(fā)Psa的前提,近年來的研究表明,獼猴桃花粉能被Psa感染,花粉已成為Psa國內各獼猴桃產區(qū)及國際獼猴桃產區(qū)間遠距離傳播的重要原因。因此,對花粉中Psa準確、快速檢測及消毒是控制花粉傳播Psa的關鍵,也是減少獼猴桃Psa大面積爆發(fā)的有效措施。本研究采用以Gallelli檢測法為基礎改進的巢式PCR方法對陜西眉縣、周至的獼猴桃枝條、葉片及雄花進行Psa檢測,驗證該方法的準確性;用Kanr-Psa染菌花粉,并用不同濃度的臭氧處理花粉,檢測臭氧對花粉中Kanr-Psa殺滅率及花粉生活力的影響,并將臭氧處理的花粉授粉進行田間應用,調查獼猴桃果實產量指標,從而建立獼猴桃花粉Psa快速檢測、消毒技術體系,為控制花粉傳播Psa提供技術支撐。主要研究結果如下:一、獼猴桃植株中Psa的巢式PCR檢測采摘陜西眉縣、周至獼猴桃樣品,挑選60個有Psa典型癥狀和60個無Psa典型癥狀的枝條、葉片、雄花各20個進行檢測,結果表明:60個有Psa典型癥狀的樣品陽性率為76.67%,其中雄花Psa的陽性率為55%;60個無Psa典型癥狀的樣品中陽性率為41.67%,其中雄花Psa的陽性率為50%。無Psa典型癥狀的陽性結果全部測序分析,發(fā)現(xiàn)陽性樣品均為Psa。二、不同濃度臭氧處理對染菌于獼猴桃花粉中Kanr-Psa殺滅效果及花粉生活力的影響將Kanr-Psa染菌于花粉中,選用不同濃度的臭氧處理花粉30min,結果表明:花粉中Kanr-Psa的殺滅率隨臭氧濃度的升高而增大,濃度為1000mg/m3時,殺滅率可達到98.84%,說明臭氧對獼猴桃花粉中Kanr-Psa的殺滅效果比較好。離體萌發(fā)法的檢測結果表明:花粉的生活力隨著臭氧濃度的增大而降低,濃度為600mg/m3時,花粉生活力下降,有顯著性差異(p≤5%),以1000mg/m3對花粉的生活力影響最大,比ck組下降13.49%。三、不同濃度臭氧處理獼猴桃花粉中Psa授粉對獼猴桃產量的影響獼猴桃果實座果率、總重量、單果重、果形指數(shù)及種子數(shù)等指標統(tǒng)計結果表明:臭氧濃度為600 mg/m3時,與ck組的座果率相比無顯著性差異,1000 mg/m3的濃度影響最大,分別下降15.40%、16.40%和18.52%,且畸形果有增加的趨勢。生產上應選擇對獼猴桃性狀影響比較小的臭氧濃度消毒,以600mg/m3為宜。綜上所述,本研究結果表明:以Gallelli檢測法為基礎改進的巢式PCR方法可用于陜西眉縣、周至的獼猴桃枝條、葉片及雄花Psa檢測,雄花中Psa陽性率為52.5%,用臭氧進行獼猴桃花粉中Psa消毒適宜的條件為600 mg/m3:該處理殺菌率可達90.77%,對花粉活力僅下降9.66%,對獼猴桃果實座果率、總重量、單果重和種子數(shù)分別下降7.56%、0.76%、0.76%和8.9%。
【學位單位】：陜西師范大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S436.634
【部分圖文】：

陜西師范大學碩士研究生論文逡逑圖２－２為巢式ＰＣＲ檢測無Ｐｓａ典型癥狀獼猴桃樣品的外引物擴增結果，圖Ｄ逡逑的泳道邋３、４、７、１０、１１、１３、１６、１９、２０、２１、２２邋（對應樣品編號邋２．１、２．２、２．５、逡逑２．８、２．９、２．１１、２．１４、２．１７、２．１８、２．１９、２．２０）、圖邋Ｅ邋的泳道邋５、１１、１５、１６邋（對逡逑應樣品編號邋２．２３、２．２９、２．３３、２．３４）和圖邋Ｆ邋的泳道邋３、５、６、７、１０、１２、１３、１５、逡逑１７、２０邋（對應樣品編號邋２．４１、２．４３、２．４４、２．４５、２．４８、２．５０、２．５１、２．５３、２．５５、逡逑２．５８）均能擴增出與陽性對照大小一致的目的條帶，為５９０邋ｂｐ左右，其余均為陰逡逑性結果，由此可初步判斷無Ｐｓａ典型癥狀的６０個樣品中，２５個樣品可能有Ｐｓａ，逡逑其中枝條１１個，葉片４個、雄花１０個。逡逑２．３．２巢式ＰＣＲ內引物擴X椊峁義希停戾澹插澹沖澹村澹靛澹跺澹峰澹渝澹瑰澹保板澹保卞澹保插澹保沖澹保村澹保靛澹保跺澹保峰澹保稿澹保瑰澹玻板澹玻保玻插義希戾澹咤澹猓鵡洹鰀剩擼邧閎邏絶彛海鰣義希ⅲ

本文編號：2835032