蘋果黑腐皮殼屬真菌(Valsa mali)侵染引起的蘋果樹腐爛病是一種毀滅性的枝干病害,嚴重威脅著我國蘋果產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。由于病菌侵染途徑多,潛伏性強,且致病機理復(fù)雜,導(dǎo)致該病防治非常困難。目前生產(chǎn)上主要采用化學(xué)藥劑來防治腐爛病。然而,化學(xué)藥劑的大量重復(fù)使用,會導(dǎo)致病原菌抗藥性的產(chǎn)生,同時也造成了嚴重的環(huán)境污染問題。因此,評估化學(xué)藥劑的抗藥性風險,尋找高效低毒低殘留的替代生物源殺菌劑,對于制定和實施蘋果樹腐爛病的防控措施及生產(chǎn)上科學(xué)用藥具有重要意義。本研究通過測定蘋果樹腐爛病菌對一種高效、低毒、廣譜的甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑吡唑醚菌酯(pyraclostrobin)的敏感性,室內(nèi)誘導(dǎo)獲得吡唑醚菌酯的抗性菌株,分析抗性菌株的生物適合度及交互抗藥性,系統(tǒng)評估了蘋果樹腐爛病菌對吡唑醚菌酯的抗藥性風險。同時,通過測定不同生物源殺菌劑對腐爛病菌的毒力及其對接種腐爛病菌離體枝條的保護作用,評價了6種生物源殺菌劑的室內(nèi)活性,為生產(chǎn)上合理用藥及蘋果樹腐爛病的安全防治提供了科學(xué)依據(jù),取得以下主要結(jié)果:1.測定了采自于遼寧、山東、甘肅、山西、陜西、新疆6個省份的120株蘋果樹腐爛病菌對吡唑醚菌酯的敏感性。結(jié)果表明,所有供試菌株對吡唑醚菌酯均有極高的敏感性,EC_(50)值分布范圍在0.00137-0.0240μg/mL之間,平均EC_(50)值為0.00909±0.00552μg/mL,可作為蘋果樹腐爛病菌對吡唑醚菌酯的敏感性基線。不同菌株間EC_(50)值差異較小,最不敏感菌株的EC_(50)值是最敏感菌株的17.5倍。不同地區(qū)間的菌株對吡唑醚菌酯的敏感性存在一定的差異,最敏感的是新疆菌株,最不敏感的是遼寧菌株,未出現(xiàn)敏感性下降的腐爛病菌亞群體。2.隨機選取14株蘋果樹腐爛病菌野生菌株,在含吡唑醚菌酯的培養(yǎng)基上馴化誘導(dǎo),獲得了3株能夠穩(wěn)定遺傳的吡唑醚菌酯抗性菌株,其抗性倍數(shù)分別是野生親本菌株的41.0,56.8和22.0倍。生物適合度分析結(jié)果顯示,抗性菌株產(chǎn)繁殖體數(shù)量與野生親本菌株相比無明顯差異,但菌落生長直徑、菌絲干重和致病力顯著降低。與親本菌株相比,吡唑醚菌酯抗性菌株對水楊肟酸(SHAM)和NaCl更敏感。交互抗藥性結(jié)果顯示,吡唑醚菌酯與戊唑醇、苯醚甲環(huán)唑、抑霉唑和甲基硫菌靈之間不存在交互抗藥性。以上結(jié)果表明,蘋果樹腐爛病菌對吡唑醚菌酯存在中低水平的抗藥性風險。3.評價了6種生物源殺菌劑對腐爛病菌的室內(nèi)活性。結(jié)果顯示,6種供試藥劑對腐爛病菌均有一定的抑制效果,除3%中生菌素WP外,其它5種藥劑對分生孢子萌發(fā)的抑制效果均優(yōu)于對菌絲生長的抑制效果。其中,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP的室內(nèi)毒力最強,對菌絲生長的EC_(50)分別為0.69μg/mL和0.89μg/mL,對分生孢子萌發(fā)的EC_(50)分別為0.19μg/mL和0.039μg/mL。其次為3%中生菌素WP、0.5%小檗堿AS和0.4%蛇床子素SL 3種藥劑,對菌絲生長的EC_(50)為26.06-290.7μg/mL,分生孢子萌發(fā)的EC_(50)為8.29-65.22μg/mL。而2%農(nóng)抗120 AS對菌絲生長的EC_(50)高于5000μg/mL,毒力最差。離體枝條保護試驗結(jié)果顯示,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP對離體枝條保護作用最強,其室內(nèi)防效分別為92.7%和86.7%,而2%農(nóng)抗120 AS保護作用最差,這與室內(nèi)毒力測定結(jié)果相一致。以上結(jié)果表明,300億/克解淀粉芽孢桿菌WP和1000億/克枯草芽孢桿菌WP可作為防治蘋果樹腐爛病的替代生物源殺菌劑。
【學(xué)位單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S436.611.11
【部分圖文】：

圖 1-1 蘋果樹腐爛病的主要癥狀Fig. 1-1 The main symptoms of the apple Valsa canker潰瘍型主要在蘋果樹的主干和大枝上發(fā)生。在發(fā)病初期，發(fā)病部位的樹皮微隆起，呈現(xiàn)紅褐色，病斑邊緣具有水漬狀，其內(nèi)部組織松軟腐爛變褐。在發(fā)病中期，有黃褐色汁液從病部流出，腐爛的樹皮極容易剝離，剝開后呈濕腐狀，聞起來有酒糟味。在發(fā)病后期，腐爛樹皮逐漸失水干縮，變?yōu)楹诤稚砻娈a(chǎn)生黑色的分生孢子器。當空氣濕度達到一定條件時，黑色的分生孢子器中會溢出黃色的分生孢子角（王金友等 1988；王金友等 1989）。枝枯型主要在小枝、果苔和干枯的枝桿上發(fā)生。在發(fā)病初期，病部呈現(xiàn)紅褐色，并伴有腫脹潮濕的現(xiàn)象，但病健交界處不明顯，發(fā)病部位逐漸變干枯死。在發(fā)病后期，腐爛樹皮表面長出大量分生孢子器，當樹皮壞死一圈時，會使小枝枯死，并且病斑向下方的大枝不斷延伸，使大枝發(fā)�。◤埳平� 1993；張王斌等 2006）。此外，有研究表明，腐爛病菌也會侵染蘋果果實，表現(xiàn)出紅褐色與黃褐色相間的波紋狀病斑，病健交界清晰，果實腐爛，有酒糟味。

劑產(chǎn)生抗性不太可能與旁路氧化途徑有關(guān)會起到支配的作用，而且植物能夠產(chǎn)生（止，還未有明確的機制能夠證明旁路氧化抗性。田間發(fā)現(xiàn)小麥葉銹病菌（Puccinia recona）以及大豆銹病菌（Phakopsora pachyrhi量研究發(fā)現(xiàn)，原因可能與在 Cytb 基因的若 Cytb 基因 143 位氨基酸之后直接存在ytb 基因表達錯誤，從而導(dǎo)致病原菌的死亡ki et al. 2007）。狀lostrobin）又稱為唑菌胺酯，純品為白色或點為 200℃，易溶于丙酮、甲醇等有（圖 1-1）：

289 山西萬榮 0.0167 0.983 Y=1.051X+6.868888 甘肅天水 0.0170 0.9832 Y=0.9144X+6.617980 山東煙臺 0.0176 0.986 Y=0.744X+6.305315 山西運城 0.0183 0.968 Y=1.275X+7.217876 甘肅天水 0.0183 0.999 Y=0.861X+6.496976 山東牟平 0.0185 0.99 Y=0.717X+6.243955 河南三門峽 0.0188 0.952 Y=0.605X+6.044561 陜西咸陽 0.0201 0.9668 Y=0.7214X+6.223422 遼寧 0.0215 0.9561 Y=0.684X+6.1409899 河南三門峽 0.0223 0.964 Y=1.277X+7.109967 河南三門峽 0.0227 0.963 Y=0.607X+5.998659 陜西渭南 0.0232 0.973 Y=0.706X+6.154426 遼寧 0.0234 0.9462 Y=1.0385X+6.692984 山東煙臺 0.0240 0.965 Y=1.284X+7.078按照 EC50值從小到大進行排序。e：The arrangement is according to the EC50value from small to large.

【參考文獻】

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本文編號：2820528