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點(diǎn)柄乳牛肝提高樟子松枯梢病抗病性研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-21 15:03
【摘要】:黑龍江省齊齊哈爾市泰來縣東方紅林場(chǎng)地處沙地上,樟子松普遍感染枯梢病。以其為樣地對(duì)樟子松枯梢病(Pinus sylvestris var.mongolica shoot blight)立地條件調(diào)查。根據(jù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查病害的發(fā)病率和感病指數(shù),同時(shí)記錄立地條件。在對(duì)不同林分密度的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)隨著林分密度的縮小,土壤含水率越低,植株發(fā)病率逐漸增加,呈差異顯著水平(P0.05)。但當(dāng)造林密度大于6 m×6 m時(shí),造林密度與發(fā)病指數(shù)不顯著性差異,當(dāng)造林密度大于一定面積時(shí),對(duì)于33齡左右的樟子松之間競(jìng)爭(zhēng)壓力不大,對(duì)林木自身影響差異不大。水分是樟子松枯梢病重要影響因素。在黑龍江省西部地區(qū)一定程度上水分含量影響樟子松枯梢病。樟子松林內(nèi)土壤真菌與菌根際真菌定出12、14個(gè)屬,一共19個(gè)屬。分布較為廣泛的為青霉(Penicillium spp.)、木霉(Trichoderma spp.)、擬青霉屬(Paecilomyces spp.)、曲霉(Aspergillus sp.)、毛霉屬(Mucor spp.)、鐮刀菌(Fusarium spp.)、枝頂孢屬(Acremonium sp.)。在同樣的前提下,樟子松菌根根際土壤真菌與非根際土壤真菌在數(shù)量上有較大的差別,在種類組成和優(yōu)勢(shì)種群存在明顯差異。為探究點(diǎn)柄乳牛肝菌的生長(zhǎng)最佳條件、生長(zhǎng)周期。對(duì)點(diǎn)柄乳牛肝菌進(jìn)行分離,經(jīng)鑒定(登記號(hào)MG027689.1)。培養(yǎng)基單碳、單氮、組合試驗(yàn)、溫度篩選試驗(yàn)得到適合點(diǎn)柄乳牛肝菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。每5 d測(cè)定發(fā)酵液菌絲干重。測(cè)定結(jié)果表明:點(diǎn)柄乳牛肝菌絲體最大日生長(zhǎng)量出現(xiàn)的時(shí)間在28~32 d。蔗糖和葡萄糖為最佳碳源,對(duì)于碳源利用率,二糖單糖多糖無糖,并呈顯著性差異(P0.05)。酵母浸粉為最佳氮源。組合試驗(yàn)中,葡萄糖與酵母浸粉的組合菌絲體生長(zhǎng)最好,最大直徑達(dá)到58.75 mm。葡萄糖、酵母培養(yǎng)基為最佳培養(yǎng)基,且最適溫度為25℃。發(fā)酵菌絲體生長(zhǎng)量復(fù)合Logistic生長(zhǎng)曲線,Logistic 曲線方程 Y=1108.9/[1+4.32559283×EXP(-0.136617433t)]。擬合度 R2 為0.975,拐點(diǎn)日齡(1nB)/K=10.7 d。因此,轉(zhuǎn)折點(diǎn)存在于約10 d,菌絲生長(zhǎng)進(jìn)入快速生長(zhǎng)期,這是發(fā)酵培養(yǎng)的重要時(shí)期。為了研究外生菌根菌提高寄主抗病性的機(jī)理,以3年生樟子松(Pinus sylvestris var.mongolica)實(shí)生水分是樟子松枯梢病重要影響因素。在黑龍江省西部地區(qū)一定程度上水分含量影響樟子松枯梢病,苗為研究對(duì)象,測(cè)定了樟子松枯梢病原菌(Sphaeropsis sapinea)侵染對(duì)接種點(diǎn)柄乳牛肝菌(接SG×接菌組)與不接種點(diǎn)柄乳牛肝菌(接菌組)和單獨(dú)接種點(diǎn)柄乳牛肝菌(接SG組)3個(gè)處理組的病情指數(shù)、葉綠素質(zhì)量濃度、抗病相關(guān)酶(CAT、PPO、SOD)活性的變化。結(jié)果表明:點(diǎn)柄乳牛肝菌根可以有效提高樟子松葉綠素質(zhì)量濃度、PPO和SOD活性,降低樟子松枯梢病的病情指數(shù)及CAT活性,且大部分指標(biāo)達(dá)到差異顯著水平(P0.05)。在枯梢病病原菌的作用下,點(diǎn)柄乳牛肝菌根能夠正向調(diào)節(jié)樟子松的生理生化指標(biāo),進(jìn)而提高樟子松對(duì)枯梢病的抗病性。接種點(diǎn)柄乳牛肝菌能夠提高樟子松枯梢病抗病性,減少植株發(fā)病率,為防治枯梢病提供基礎(chǔ),同時(shí)也為發(fā)展林下經(jīng)濟(jì)提供一個(gè)新的思路。
【學(xué)位授予單位】:東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S763.7
【圖文】:

菌根形態(tài)


逑細(xì)后膨大,輕度扭曲,菌套表面光滑,表面布滿絲狀外延菌絲,年幼時(shí)呈淡褐色,年老逡逑時(shí)褐色(圖3-1)。逡逑__逡逑圖3-1邋SW//奶g7Y?77Wto奶菌根形態(tài)圖逡逑3.2.2稀釋平板法菌根根際真菌與非根際真菌數(shù)量情況逡逑采用直接接種菌根進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)獲得根際真菌57株真菌株。土壤進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)獲逡逑得52株真菌。采用稀釋平板法對(duì)土壤真菌進(jìn)行分離,稀釋濃度為10-3,平均獲得土壤逡逑真菌12個(gè)菌落。逡逑兩種土壤中含有的真菌數(shù)量,兩種類型的真菌總數(shù)存在一定差異(圖3-2)。土壤真逡逑菌數(shù)量最高,達(dá)了邋1.6xl03個(gè)/g干土,而菌根根際真菌最高2.6xl03個(gè)/g干土,后者的數(shù)逡逑量是前者的1.6倍。產(chǎn)生這種差距的原因可能由于樟子松根部代謝的某種物質(zhì)抑制周圍逡逑一些真菌的生長(zhǎng)從而對(duì)周圍真菌的數(shù)量產(chǎn)生影響。結(jié)果顯示根際真菌數(shù)量遠(yuǎn)大于土壤真逡逑菌數(shù)量。逡逑乫邐r>、}艏叔義希危卞義希玻埃埃板螊p逡逑�。″澹濉鲞姡穑殄义希福卞澹海哼姡哌娪腻义希у澹沐澹保卞澹桑慑澹迹卞义希ュ�?.)逡逑1

真菌,菌根根際,數(shù)量比


逑細(xì)后膨大,輕度扭曲,菌套表面光滑,表面布滿絲狀外延菌絲,年幼時(shí)呈淡褐色,年老逡逑時(shí)褐色(圖3-1)。逡逑__逡逑圖3-1邋SW//奶g7Y?77Wto奶菌根形態(tài)圖逡逑3.2.2稀釋平板法菌根根際真菌與非根際真菌數(shù)量情況逡逑采用直接接種菌根進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)獲得根際真菌57株真菌株。土壤進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)獲逡逑得52株真菌。采用稀釋平板法對(duì)土壤真菌進(jìn)行分離,稀釋濃度為10-3,平均獲得土壤逡逑真菌12個(gè)菌落。逡逑兩種土壤中含有的真菌數(shù)量,兩種類型的真菌總數(shù)存在一定差異(圖3-2)。土壤真逡逑菌數(shù)量最高,達(dá)了邋1.6xl03個(gè)/g干土,而菌根根際真菌最高2.6xl03個(gè)/g干土,后者的數(shù)逡逑量是前者的1.6倍。產(chǎn)生這種差距的原因可能由于樟子松根部代謝的某種物質(zhì)抑制周圍逡逑一些真菌的生長(zhǎng)從而對(duì)周圍真菌的數(shù)量產(chǎn)生影響。結(jié)果顯示根際真菌數(shù)量遠(yuǎn)大于土壤真逡逑菌數(shù)量。逡逑乫邐r>、}艏叔義希危卞義希玻埃埃板螊p逡逑�。″澹濉鲞姡穑殄义希福卞澹海哼姡哌娪腻义希у澹沐澹保卞澹桑慑澹迹卞义希ュ�?.)逡逑1

碳源,凈生長(zhǎng)量,利用效果,葡萄糖


邐1逡逑0.005逡逑圖4-1基于rDNA-ITS序列構(gòu)建病原菌系統(tǒng)發(fā)育樹逡逑4.2.2不同碳源對(duì)菌絲體生長(zhǎng)的影響逡逑r逡逑.Ip簉2、逡逑—….1逡逑i邋.邐鰲.I逡逑|邋vj邋-邋;k逡逑A葡萄糖(P);邋B麥芽糖(M);邋C蔗糖(Z);邋D乳糖(R);邋E淀粉(D);邋F無糖(W)逡逑圖4-2不同碳源對(duì)謂w/a/ws生長(zhǎng)的影響逡逑點(diǎn)柄乳牛肝菌在六種供試培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)。菌絲體在六種不同的培養(yǎng)基上培養(yǎng),逡逑由表4-1可知,各處理組間菌絲體凈生長(zhǎng)量絕大部分達(dá)到顯著差異,但蔗糖和麥芽糖的逡逑凈生長(zhǎng)量差異不顯著(P<0.05)。對(duì)單糖,雙糖,多糖,無糖的處理間凈生長(zhǎng)量呈顯著逡逑性差異(P<0.0l)。供試培養(yǎng)基上點(diǎn)柄乳牛肝菌菌絲對(duì)蔗糖的利用效果最佳,凈生長(zhǎng)量逡逑達(dá)到39.43邋mm,其次是麥芽糖、葡萄糖、淀粉、乳糖的利用效果表現(xiàn)最差。葡萄糖培逡逑養(yǎng)基上菌落形態(tài)正常、色白底部呈黃色環(huán)狀分布

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

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本文編號(hào):2799525

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