【摘要】：西瓜(Citrulluslanatus)是葫蘆科(Cucurbitaceae)西瓜屬中的栽培種,重要經(jīng)濟作物之一,屬于世界十大水果之列。隨我國農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結構的調整和優(yōu)化,西瓜的種植面積和產(chǎn)量已居世界首位。黃瓜綠斑駁花葉病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是侵染西瓜主要病毒病之一,是典型的種傳病害,近幾年田間發(fā)病較嚴重。西瓜植株受到CGMMV病毒侵染后會出現(xiàn)花葉、畸形葉、植物生長受阻、果實瓤色變紫等癥狀,導致產(chǎn)量降低和商品品質下降,嚴重時甚至絕產(chǎn)。本研究以抗CGMMV的野生西瓜種質'PI595203'和高感的栽培種'M1511-3'為親本獲得的F2遺傳分離群體,分析了 CGMMV抗性遺傳規(guī)律,利用基于全基因重測序的BSA方法初步定位了西瓜抗CGMMV的候選基因。主要結果如下:1)野生西瓜種質'PI595203'和栽培種'M1511-3'的抗性鑒定經(jīng)機械摩擦接種CGMMV,通過調查'PI595203'和'M1511-3'病情指數(shù)、病毒基因的表達和ELISA檢測分析,結果表明'P1595203'對CGMMV表現(xiàn)為抗性,'M1511-3'對CGMMV表現(xiàn)為高感。2)西瓜抗CGMMV基因的遺傳分析以西瓜抗、感自交系'PI595203'和'M1511-3'為親本,構建F2群體。對Fi(30株)、F2(320株)群體進行CGMMV機械摩擦接種鑒定抗性,Fi群體植株表現(xiàn)為感病,F2群體表型出現(xiàn)性狀分離且呈正態(tài)連續(xù)分布,結果表明西瓜CGMMV抗性為數(shù)量性狀,由多對隱性基因控制。3)西瓜抗CGMMV基因定位選取F2群體中感抗樣品構建感病池和抗病池,并對其進行重測序。關聯(lián)分析獲得了 1個與抗病性狀相關1.01Mb的候選區(qū)域,對該區(qū)域進行功能注釋,共獲得56個編碼基因。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S436.5
【圖文】：

圖１－２邋ＣＧＭＭＶ全基因結構圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－２邋Ｔｈｅ邋ｇｅｎｏｍｅ邋ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ邋ｏｆＣＧＭＭＶ逡逑其中靠近５’端的兩個開放閱讀框分別編碼ＲＮＡ依賴性ＲＮＡ聚合酶蛋白的逡逑１２９ｋＤａ和１８６ｋＤａ蛋白，其作用是參與并影響病毒的復制，其中１８６ｋＤａ蛋白是逡逑由１２９ｋＤａ蛋白的開放閱讀框終止子通讀產(chǎn)生的，即ｍＲＮＡ翻譯到終止子密碼處逡逑并不終止繼續(xù)翻譯�？拷场说模玻梗耄模岬鞍子直环Q為移動或運動蛋白（Ｍｏｖｅｍｅｎｔ逡逑Ｐｒｏｔｅｉｎ），其主要作用是協(xié)助病毒在細胞間的運動（ＭｅｓｈｉＴ，ｅｔａｌ．，１９８７）。２９ＫＤａ逡逑蛋白在整個ＣＧＭＭＶ中占比很小且不存在影響基因復制表達的順式作用元件，逡逑目前有研究認為該蛋白對于病毒的核酸復制沒有造成任何影響。另外一個靠近３’逡逑端的１７．３ｋＤａ蛋白被稱作病毒外殼蛋白（Ｃｏａｔ邋Ｐｒｏｔｅｉｎ），作用是協(xié)同介導病毒的逡逑長距離運動并對核酸起到保護作用（ＵｇａｋｉＭ，ｅｔａｌ．，邋１９９１）。逡逑１．１．２邋ＣＧＭＭＶ的傳入及分布狀況逡逑

Ｐｏｌｙ逡逑４邋９９４邐５邋７８Ｓ逡逑圖１－２邋ＣＧＭＭＶ全基因結構圖逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１－２邋Ｔｈｅ邋ｇｅｎｏｍｅ邋ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ邋ｏｆＣＧＭＭＶ逡逑其中靠近５’端的兩個開放閱讀框分別編碼ＲＮＡ依賴性ＲＮＡ聚合酶蛋白的逡逑１２９ｋＤａ和１８６ｋＤａ蛋白，其作用是參與并影響病毒的復制，其中１８６ｋＤａ蛋白是逡逑由１２９ｋＤａ蛋白的開放閱讀框終止子通讀產(chǎn)生的，即ｍＲＮＡ翻譯到終止子密碼處逡逑并不終止繼續(xù)翻譯�？拷场说模玻梗耄模岬鞍子直环Q為移動或運動蛋白（Ｍｏｖｅｍｅｎｔ逡逑Ｐｒｏｔｅｉｎ），其主要作用是協(xié)助病毒在細胞間的運動（ＭｅｓｈｉＴ，ｅｔａｌ．，１９８７）。２９ＫＤａ逡逑蛋白在整個ＣＧＭＭＶ中占比很小且不存在影響基因復制表達的順式作用元件，逡逑目前有研究認為該蛋白對于病毒的核酸復制沒有造成任何影響。另外一個靠近３’逡逑端的１７．３ｋＤａ蛋白被稱作病毒外殼蛋白（Ｃｏａｔ邋Ｐｒｏｔｅｉｎ），作用是協(xié)同介導病毒的逡逑長距離運動并對核酸起到保護作用（ＵｇａｋｉＭ，ｅｔａｌ．，邋１９９１）。逡逑１．１．２邋ＣＧＭＭＶ的傳入及分布狀況逡逑ＣＧＭＭＶ最早是１９３５年在英國的黃瓜上被發(fā)現(xiàn)的，之后逐漸傳到亞洲、歐逡逑洲、南美、北美等地區(qū)的３０多個國家。２０世紀６０年代印度和日本在引種黃瓜、逡逑西瓜和瓠瓜時將ＣＧＭＭＶ帶入亞洲地區(qū)

群體接種及未接種ＣＧＭＭＶ的癥狀，Ｂ抗病親本‘ＰＩ５９５２０３’、感病‘Ｍ１５１１－３’和Ｆｉ接種ＣＧＭＭ的癥狀逡逑．２－４邋Ａ邋Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ邋ｏｆ邋ＣＧＭＭＶ－ｃｈａｌｌｅｎｇｅ．邋Ｂ邋Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ邋ｏｆ邋ＣＧＭＭＶ－ｃｈａｌｌｅｎｇｐａｒｅｎｔａｌ邋ｐｌａｎｔｓ邋‘ＰＩ５９５２０３，、‘Ｍ１５１１－３，邋ａｎｄ邋Ｆ！逡逑ＧＭＭＶ邋的邋ＲＴ－ＰＣＲ邋檢測逡逑種兩周后的？！群體西瓜的新葉提取葉片的總ＲＮＡ，反轉錄為ｃＤ對照經(jīng)過ＲＴ－ＰＣＲ擴增，凝膠電泳分析，分析結果的膠圖上顯一條明顯的６５０ｂｐ左右的特異性擴增片段，說明Ｆ，群體植株均攜現(xiàn)為陽性。凝膠結果如圖所示：逡逑Ｍａｒｋ邋１２３４５６７８９邐１０逡逑

【參考文獻】

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1 葉建人;蔡美艷;馮永斌;陳海波;周琳娜;;棚栽嫁接西瓜黃瓜綠斑駁花葉病毒病發(fā)病動態(tài)及其田間擴展研究初報[J];中國農(nóng)學通報;2015年16期

2 李俊香;古勤生;;黃瓜綠斑駁花葉病毒傳播方式的研究進展[J];中國蔬菜;2015年01期

3 鐘敏;趙緒生;何乙坤;王亞南;曹克強;;黃瓜綠斑駁病毒人工誘變方法的研究[J];北方園藝;2014年24期

4 王付彬;楊蘭英;馬井玉;;山東省黃瓜綠斑駁花葉病毒病發(fā)生規(guī)律及防控措施[J];農(nóng)業(yè)科技通訊;2014年09期

5 林q

本文編號：2798248