【摘要】：儲糧病害的發(fā)生是導致糧食儲藏過程中品質降低、損失加重的主要原因,玉米作為我國重要的糧食作物之一,在儲藏中極易發(fā)生發(fā)熱霉變和種子劣變等現(xiàn)象,損失嚴重�，F(xiàn)階段對儲藏期糧食安全的研究主要集中在國有大中型糧庫儲糧技術方面,目前對農(nóng)戶儲藏期玉米病害的發(fā)生缺乏深入研究。本研究通過形態(tài)學和分子生物學方法對2016~2018年連續(xù)3年采自于我國12個省31個地區(qū)的121份玉米果穗進行病原菌分離鑒定,發(fā)現(xiàn)玉米籽粒攜帶的主要污染菌為擬輪枝鐮孢。在田間試驗中,通過玉米吐絲期接種擬輪枝鐮孢,并噴施殺菌劑進行早期防控,可降低儲藏期籽粒帶菌率。此外,設置儲糧條件分析不同因素對籽粒帶菌的影響,通過組織解剖學和酶聯(lián)免疫技術分析玉米籽粒不同部位伏馬毒素含量,以期通過改善儲藏條件來降低玉米籽粒中毒素含量,為玉米安全食用和飼用提供理論依據(jù)。主要研究結果如下:1.利用形態(tài)學和分子生物學方法,對12省份31個地區(qū)的121份玉米樣品進行病原菌分離鑒定,共得到3954株病菌菌株,歸屬于6種鐮孢菌,其中擬輪枝鐮孢1904株、尖孢鐮孢1305株、禾谷鐮孢復合物400株、木賊鐮孢188株、層出鐮孢124株、亞粘團鐮孢33株,頻率分別為52.5%,36.0%,11.0%,5.2%,3.4%,0.9%。甘肅武威、平?jīng)�、張掖、�?zhèn)原和黑龍江哈爾濱分離得到的鐮孢菌以尖孢鐮孢為主,來自山東聊城、貴州普定以擬輪枝鐮孢和尖孢鐮孢為主,其他8個省份的樣品均以擬輪枝鐮孢為主要污染菌。利用HPLC-FLD對上述樣品進行伏馬毒素FB_1和FB_2含量檢測,其中70份樣品可檢出污染伏馬毒素,污染率為57.9%,平均污染水平為2.0657 mg/kg,最高污染水平達10.0627 mg/kg。2.利用花絲注射法將擬輪枝鐮孢的孢懸液接種到健康的先玉335果穗內,在接種后第3 d噴施不同的殺菌劑、植物激素BR與殺蟲劑組合,結果表明,各藥劑處理均能降低玉米穗粒腐病的平均病情指數(shù),防治效果最好的為吡唑醚菌酯+苯醚甲環(huán)唑+咪鮮胺+BR的藥劑組合,防效達51.2%。通過絕對定量PCR方法對各處理玉米籽粒中的帶菌量進行檢測,發(fā)現(xiàn)該藥劑組合處理的玉米籽粒帶菌量最低。采用HPLC-FLD對各處理進行FBs檢測,發(fā)現(xiàn)藥劑處理后均能降低FB_1和FB_2含量。3.通過對河南、山西、四川、河北、內蒙古5省份的11個地區(qū)進行農(nóng)戶玉米儲藏條件調查,并對不同含水量的玉米籽粒進行擬輪枝鐮孢分離鑒定。結果顯示,含水量較高的玉米籽粒擬輪枝鐮孢分離頻率較高。將田間藥劑防治篩選到降低菌源效果最好的處理吡唑醚菌酯+苯醚甲環(huán)唑+咪鮮胺+BR與對照設置為不同初始含水量在不同溫度下儲藏90 d,發(fā)現(xiàn)儲藏前的菌源和初始含水量的控制能夠降低玉米籽粒中FBs含量,不同初始含水量的玉米籽粒在儲藏期FBs含量隨溫度升高而升高。4.利用組織解剖學、絕對定量PCR和酶聯(lián)免疫的方法將玉米籽粒的種皮、果柄、胚、胚乳進行帶菌量和伏馬毒素含量檢測。結果發(fā)現(xiàn),果柄中擬輪枝鐮孢含量最多,且伏馬毒素含量最高。
【學位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S435.131
【圖文】：

玉米儲藏期籽粒污染鐮孢菌及毒素原因分析與控制3 結果與分析3.1 儲藏期玉米籽粒污染鐮孢菌種類及伏馬毒素情況3.1.1 玉米籽粒中鐮孢菌的種類分析2016~2018 年連續(xù) 3 年共采自 12 省 31 個地區(qū)的 121 份玉米果穗樣品，每份選取 30 粒玉米籽粒，經(jīng)表面消毒后置于有氨芐青霉素的 PDA 平板上培養(yǎng)，每個重復 3 次。利用形態(tài)學和分子生物學方法對病原菌進行鑒定，共得到 3954 株鐮孢其中擬輪枝鐮孢、尖孢鐮孢、禾谷鐮孢復合物分離頻率較高（圖 1）。分離到擬鐮孢 1904 株，分離頻率占 52.5%；尖孢鐮孢 1305 株，占 36.0%；禾谷鐮孢復合種株，占 11.0%。此外，木賊鐮孢 188 株，占 5.2%；層出鐮孢 124 株，占 3.4%；團鐮孢 33 株，占 0.9%，分離頻率均較低（表 4）。上述結果表明，擬輪枝鐮孢頻率最高，為儲藏期玉米籽粒的主要污染菌。

河北農(nóng)業(yè)大學碩士學位（畢業(yè)）論文鮮胺 3 種殺菌劑及植物激素 BR 混施，用于在田間接種擬輪枝鐮孢情況下的單獨和配防治。收獲前進行玉米果穗發(fā)病情況調查（圖 2），并計算平均病情指數(shù)及防治果，結果顯示，與對照平均病情指數(shù) 39.36%相比，各處理的玉米穗腐病平均病情數(shù)均有所降低，且對玉米穗腐病防治效果最好的處理是 3 種殺菌劑與 BR 復配，其為單獨噴施咪鮮胺和單獨噴施吡唑醚菌酯的處理，防治效果分別為 51.2%，48.4%43.8%（圖 3）。上述結果表明：藥劑防治能夠降低穗腐病病情指數(shù)，有一定的防效果。

圖 3 不同處理對玉米穗腐病的田間防治效果Fig. 3 Field control effect of different treatments on corn ear rotⅠ：不同處理平均病情指數(shù)；Ⅱ：不同處理防治效果；CK：無菌水；A：吡唑醚菌酯；B：苯醚甲環(huán)唑；C：咪鮮胺；D：殺蟲劑；E：BR；圖中數(shù)值為平均值±標準差，柱狀圖上不同的字母代表差異顯著（p<0.05）Note:Ⅰ:Average disease index of different treatments; Ⅱ: Control effect of different treatments; CK: sterile waters;A: pyraclostrobin;ifenoconazole; C:prochloraz; D: insecticide; E: BR; the values represented the mean±standard deviation, the different letters above the barrepresented the significant differences (p<0.05).2 藥劑處理對玉米產(chǎn)量的影響玉米成熟后收獲，測定不同處理下玉米的穗長、穗行數(shù)、穗粗、考種時含水量、尖長、行粒數(shù)、千粒重，計算得出玉米的產(chǎn)量。結果顯示，與對照產(chǎn)量相比，防效好的處理吡唑醚菌酯+苯醚甲環(huán)唑+咪鮮胺+BR 復配產(chǎn)量有所增加（圖 4）。

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4 張s蓬

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