【摘要】：綠盲蝽Apolyguslucorum Meyer-diur屬半翅目Hemiptera盲蝽科Miridae,是寄主廣泛的害蟲,分布范圍廣,在亞洲、歐洲、非洲、美洲都有發(fā)生,是我國近年來對棉花等重要經(jīng)濟作物危害嚴重的半翅目害蟲之一,具有發(fā)生世代長、世代重疊嚴重的特點。在防治過程中,由于其在田間活動隱蔽、行動能力強,加大了防治的困難。目前,化學防治仍是對綠盲蝽的防治中最為有效的手段,但在田間長期不合理使用殺蟲劑會導致綠盲蝽抗藥性的發(fā)生,從而加大防治難度。本研究選擇新鮮的四季豆飼養(yǎng),在室內(nèi)完成對綠盲蝽的連續(xù)飼養(yǎng)。采取點滴法,對綠盲蝽進行呋蟲胺毒力測定和抗性品系篩選。測定了綠盲蝽羧酸酯酶和谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶活性,探索這兩種重要酶在綠盲蝽對呋蟲胺的抗性品系選育過程的作用,是否參與綠盲蝽對呋蟲胺抗性代謝。經(jīng)過十二代的室內(nèi)篩選,綠盲蝽對呋蟲胺的抗性倍數(shù)僅達到近五倍,表現(xiàn)出低水平的抗性,推測產(chǎn)生高抗性的潛力較小。綠盲蝽對呋蟲胺的抗性雖然呈波浪式升高趨勢,但是抗性增加幅度卻十分緩慢。在室內(nèi)篩選中,對綠盲蝽羧酸酯酶和谷胱甘r繱-轉(zhuǎn)移酶活性的測定,發(fā)現(xiàn)羧酸酯酶有顯著性的提升,而谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶無顯著的變化,認為羧酸酯酶很可能參與了綠盲蝽對呋蟲胺抗性的代謝。克隆得到兩條綠盲蝽成蟲細胞色素P450基因全長序列,分別為為CYP395G1和CYP4EY1。在對綠盲蝽CYP395G1和CYP4EY1與其他昆蟲P450序列比對中發(fā)現(xiàn),綠盲蝽CYP395G1與其他昆蟲CYP家族序列一致性達30%,綠盲蝽CYP4EY1與昆蟲其他CYP4家族序列一致性達60%。通過綠盲蝽CYP395G1和CYP4EY1兩個基因在不同發(fā)育階段表達分析,得出CYP395G1和CYP4EY1在綠盲蝽不同發(fā)育期均有表達。在呋蟲胺短期誘導后,成蟲體內(nèi)CYP395G1的表達量在6h,12h,24h,36h和48h時的表達量分別為對照的1.26,1.91,0.92,0.50 和 0.37 倍。成蟲體內(nèi) CYP4EY1的表達量在 6h,12h,24h,36h 和 48h時的表達量分別為對照的1.02,0.64,0.53,0.40和0.36倍,經(jīng)12h短期誘導后CYP395G1表達量達到最大,而另一基因CYP4EY1表達量程下降趨勢。經(jīng)呋蟲胺長期篩選后,F12的CYP395G1基因表達量有顯著提升,CYP4EY1表達量仍然無顯著變化,推測CYP395G1基因可能參與了呋蟲胺的解毒過程。本研究通過生物學測定、分子生物學及生物化學分析等方法對綠盲蝽進行了研究,旨在為明確呋蟲胺的綠盲蝽抗藥性機制,為合理使用殺蟲劑從而科學有效地防治綠盲蝽奠定基礎(chǔ)。
【學位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S433.3
【圖文】：

蓿盲蝽和三點盲蝽大量出現(xiàn)；７月份在大麻、雜草上產(chǎn)生較多的綠盲蝽和苜蓿盲蝽；８月份逡逑盲蝽更喜向日葵、蓖麻等油料作物；９－１０月份則轉(zhuǎn)往蒿子及一些菊花植物；１０月份則在雜逡逑草、枯枝敗葉中以卵越冬（見圖１．１，出自朱弘復和孟樣玲，１９５８）。逡逑３逡逑

對綠盲蝽室內(nèi)篩選十二代，由表４．１可知ＬＣ５０從初始品系Ｆ０代５．８９５邋ｐｐｍ上升到Ｆ１２代逡逑２８．５５０邋ｐｐｍ，抗性倍數(shù)達到近五倍。自Ｆ０代至Ｆ７代ＬＣｗ值５．８９５邋ｐｐｍ到６．７２０邋ｐｐｍ，抗性逡逑未有增加；Ｆ９代增加到１３．２３３ｐｐｍ，但隨后Ｆ１０又有回落，Ｆ１１和Ｆ１２程上升趨勢。圖４．１逡逑中可以看出綠盲蝽對呋蟲胺的抗性呈波浪式升高趨勢，抗性增加幅度卻十分緩慢，截止到逡逑Ｆ１２代仍然屬于低抗品系，但顯示出抗性在低速持續(xù)增加。逡逑表４．１綠盲蝽對膚蟲胺的抗性選育逡逑Ｔａｂｌｅ４．１邋Ｔｈｅ邋ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ邋ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ邋ｗｉｔｈ邋ｄｉｎｏｔｅｆｕｒａｎ邋ｔｏ邋ｔｈｅ邋Ａｐｏｌｙｇｕｓ邋ｌｕｃｏｒｕｍ逡逑世代邐斜率±邐卡方（自邐．ＬＣ５０（９５％ＦＬ）邐抗性倍數(shù)邐篩選劑量邐死亡率逡逑Ｇｅｎｅ－邋ＳＩｏｐｅ±ＳＥ邋由度）邐ｐｐｍ邐Ｒｅｓｉｓｔａｎｔ邋Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ邋Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ逡逑ｒａｔｉｏｎｓ邐Ｘ＾ｄｆ５）邐ｆｏｌｄｂ邐ｄｏｓｅｓ邐逡逑Ｆ０邐１．７８士０．７０邐３．７２邋（３）邐５．８９５［４．６７４？７．４３５］邐１邐５ｐｐｍ邐４８％逡逑ＦＩ邐１．８７邋土０．７１邐２．７２（３）邐６．４４２［５．１８５邋？８．００３］邐１．０９邐１２．５ｐｐｍ邐８３％逡逑Ｆ２邐－邐－邐－邐１２．５ｐｐｍ邐６３％逡逑Ｆ３

圖５．］吡蟲啉與呋蟲胺分子模型圖逡逑Ｆｉｇ邋５．１．邋Ｂｉｎｄｉｎｇ邋ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ邋ＩＭＩ邋（ａ）邋ａｎｄ邋ＤＩＮ邋（ｂ）邋ａｔ邋０，４，邋８．１２邋ｎｓ邋ｏｆ邋ＭＤ邋ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ．逡逑縱觀國內(nèi)外有關(guān)昆蟲細胞色素Ｐ４５０基因與昆蟲抗藥性的研[偅荒遜⑾鄭誒コ娑愿麇義現(xiàn)擲嘈偷納背婕戀目掛┬苑⒄構(gòu)討�，Ｐ４稊D⒒幼歐淺Ｖ匾淖饔謾Ｗ罱廡┠輳孀佩義峽蒲醒繡車牟歡轄�，峨s桑校矗擔敖櫚嫉納背婕鏈豢剮曰頻娜鮮噸鸞ゼ由�，葰g詵皺義

本文編號：2781610