【摘要】：叢枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizae Fungi,AMF)是一類可以與大多數(shù)植物根系形成互惠共生體的真菌。其在促進(jìn)植物吸收營(yíng)養(yǎng)及生長(zhǎng)、增強(qiáng)植物的抗逆性等方面有重要作用。近年來(lái),在許多AMF中發(fā)現(xiàn)專性共生內(nèi)生細(xì)菌(MRE),不同AMF種類對(duì)宿主植物的影響和作用差異明顯。本研究首先初步調(diào)查了在自然件下大田辣椒與AMF的定殖共生的情況;同時(shí),我們選擇有專性內(nèi)生細(xì)菌共生的AMF摩西斗管囊霉(Funneliformis mosseae)和沒有內(nèi)生細(xì)菌的根內(nèi)根孢囊霉(Rhizophagus intraradices)為實(shí)驗(yàn)材料,在盆栽條件下,研究了AMF在辣椒根中的定殖情況和對(duì)辣椒生長(zhǎng)的影響,不同AMF種類對(duì)辣椒疫病(Phytophthora capsici)的生物防治作用,初步探討造成差異性的可能潛在因素。首先,在自然條件下,初步調(diào)查了大田辣椒根組織和根圍中AMF的定殖與共生情況。結(jié)果表明,不同采樣點(diǎn)的辣椒根組織中均發(fā)現(xiàn)AMF定殖及典型的共生叢枝菌根結(jié)構(gòu),侵染率達(dá)到70%以上;同時(shí),在辣椒根際土壤中,存在豐富的AMF孢子,平均達(dá)到6個(gè)g~(-1)土壤。不同采樣點(diǎn)辣椒的AMF侵染率、侵染強(qiáng)度和根際孢子量等存在差異,且AMF侵染強(qiáng)度越強(qiáng),叢枝的豐度和孢子的密度也隨之增加。通過分子鑒定確定了實(shí)驗(yàn)材料中內(nèi)生細(xì)菌的共生情況。結(jié)果表明,摩西斗管囊霉有專性內(nèi)生細(xì)菌Candidatus Moeniiplasma glomeromycotorum種類共生;通過乳酸甘油染色法對(duì)辣椒根進(jìn)行染色,顯微觀察兩種AMF在辣椒組織中的定殖情況。結(jié)果表明:兩種AMF能夠與辣椒建立穩(wěn)定的共生關(guān)系,其侵染開始于根外孢子萌發(fā),形成附著胞或根外菌絲直接從侵入點(diǎn)進(jìn)入辣椒根皮層細(xì)胞,形成胞間菌絲、胞內(nèi)菌絲、叢枝和泡囊等結(jié)構(gòu)。在盆栽條件下,研究了兩種AMF對(duì)辣椒生長(zhǎng)的影響和對(duì)辣椒疫病的生物防治作用。研究結(jié)果表明,兩種AMF均可定殖于辣椒根部,但定殖率有所差異,摩西斗管囊霉的定殖率明顯高于根內(nèi)根孢囊霉。接種摩西斗管囊霉和根內(nèi)根孢囊霉的辣椒幼苗株高、莖粗、干重及鮮重均高于對(duì)照處理,株高分別增加了9.36%和6.24%,莖粗分別增加了9.09%和4.55%,鮮重分別增加了40.36%和32.74%,干重分別增加了63.16%和31.58%。在挑戰(zhàn)接種辣椒疫霉的條件下,接種摩西斗管囊霉和根內(nèi)根孢囊霉的辣椒幼苗的株高、莖粗、鮮重及干重均高與單接種辣椒疫霉的處理,株高分別增加了6.50%和2.99%,莖粗均增加了10.53%,鮮重分別增加了32.64%和31.25%,干重分別增加了35.71%和28.57%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明無(wú)論是否接種辣椒疫霉,AMF均能促進(jìn)辣椒植株的生長(zhǎng),但與不接種處理的對(duì)照相比均有所降低,說明辣椒疫霉抑制了辣椒幼苗的生長(zhǎng)。兩種AMF對(duì)辣椒疫病均有生物防治作用,其中根內(nèi)根孢囊霉的防治效果達(dá)到54%,而摩西斗管囊霉的防治效果僅為8.3%,不同的AMF種類對(duì)辣椒疫病的生物防治作用存在差異。本文研究結(jié)果表明,AMF可以與辣椒建立穩(wěn)定的共生關(guān)系,并有效促進(jìn)了辣椒植株的生長(zhǎng),對(duì)辣椒疫病具有一定的生物防治作用,但不同的AMF對(duì)辣椒的生長(zhǎng)和辣椒疫病的防治效果存在差異。本論文研究結(jié)果將為AMF在辣椒種植及生產(chǎn)中的應(yīng)用及防治辣椒疫病提供科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支持,并在一定程度上能夠幫助人們對(duì)AMF的作用和應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行預(yù)測(cè)和評(píng)價(jià)。
【學(xué)位授予單位】：貴州師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S436.418.1;S476
【圖文】：

并在細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞間形成泡囊（圖 2-1A、圖2-1B）。由此可以確定，在自然條件下，AMF 能夠在辣椒根組織中定殖，建立互惠共生關(guān)系。圖 2-1 辣椒根系 AMF 的侵染定殖Fig. 1AMF colonization in pepper roots注：A, B.根內(nèi)泡囊（V）（10×40）；C, D.根內(nèi)菌絲（H）（10×40）；E, F.根細(xì)胞內(nèi)形成的叢枝結(jié)構(gòu)（A）（10×40）。Note:A, B.Vesicles in root tissues（10×40）; C, D.Hyphae in root tissues(10×40); E

果與分析AMF 的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析本研究所使用的兩種 AMF 菌株經(jīng)過 LSU 28S rDNA 特異性引物擴(kuò)增獲得一度約 700bp 的 DNA 片段。將測(cè)序后的結(jié)果與 GenBank 中的基因序列進(jìn)行比與相關(guān)菌株建立了系統(tǒng)發(fā)育樹（圖 3-1、圖 3-2）。圖 3-1 所示，實(shí)驗(yàn)菌株eliformis mosseae 與 Funneliformis mosseae（JQ048902）聚在一個(gè)子分支上，分子鑒定結(jié)果可以確定實(shí)驗(yàn)菌株為摩西斗管囊霉（Funneliformis mosseae）。-2 所示，實(shí)驗(yàn)菌株 Rhizophagus intraradices 與 Rhizophagus intraradice817872）聚在一個(gè)子分支上，結(jié)合分子鑒定結(jié)果可以確定實(shí)驗(yàn)菌株為根內(nèi)囊霉（Rhizophagus intraradices）。

圖 3-2 Rhizophagus intraradices 及相關(guān)菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig3-2 Phylogenetic tree of Rhizophagus intraradices and their relative strainsMF 內(nèi)生細(xì)菌的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析本研究所使用的兩種 AMF 菌株經(jīng)過 SSU 16S 特異性引物擴(kuò)增，eliformis mosseae 的孢子中含有專性的共生細(xì)菌，其 DNA 片段大小bp，將測(cè)序后的結(jié)果與 GenBank 中的基因序列進(jìn)行比對(duì)，與相關(guān)菌株統(tǒng)發(fā)育樹（圖 3-3）。圖 3-3 所示，該細(xì)菌與 Candidatus Moeniiperomycotorum （KP763287）聚在一個(gè)子分支上，序列同源性為 96%者親緣關(guān)系很近。

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5 葉e

本文編號(hào)：2771123