【摘要】：中紅側(cè)溝繭蜂(Micropilits mediator)是一種昆蟲內(nèi)寄生蜂,其寄主涉及多種鱗翅目昆蟲,包括棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)、粘蟲(Pseudaletia separate)和甘藍夜蛾(Mamestra brassicae)等重要農(nóng)業(yè)害蟲,在害蟲生物防治上效果顯著。清道夫受體(scavenger receptors,SCRs)是細胞表面的一類跨膜糖蛋白,參與識別多種病原體。中紅側(cè)溝繭蜂有13個清道夫受體基因,研究其功能,為更好地保護和利用天敵昆蟲奠定基礎。本研究通過系統(tǒng)進化分析,確定MmSCRs與其他物種進化關系,并運用實時熒光定量PCR(qRT-PCR)技術檢測MmSCRs基因mRNA在中紅側(cè)溝繭蜂在不同發(fā)育時期,以及感染細菌后的表達水平,通過RNA干擾技術,探究MmSCRA-1和MmCD36-1的功能。主要結(jié)果如下:(1)中紅側(cè)溝繭蜂SCR基因家族共有13個成員,包括3種類型:A型4個,B型8個,C型1個。(2)在中紅側(cè)溝繭蜂不同發(fā)育時期,MmSCRA-1基因mRNA的表達水平較高;感染革蘭氏陽性菌藤黃微球菌(Micrococcus luteus)和革蘭氏陰性菌陰溝腸桿菌(Enterobacter colacae)后,MmCD36-1基因mRNA的表達水平升高。(3)中紅側(cè)溝繭蜂蛹期3日齡注射dsRNA后,dsSCRA-1注射組羽化率顯著低于dsGFP注射組(P0.05);蛹期3.5日齡注射dsRNA后,dsSCRA-1注射組羽化率仍顯著低于dsGFP注射組(P0.05)。(4)干擾MmCD36-1基因后,中紅側(cè)溝繭蜂存活率與對照組無顯著差異。干擾后感染藤黃微球菌,中紅側(cè)溝繭蜂存活率與對照組無顯著差異,而干擾后感染陰溝腸桿菌,中紅側(cè)溝繭蜂存活率與對照組有極顯著差異(P0.001)。(5)干擾MmCD36-1基因后感染藤黃微球菌,24 h內(nèi)中紅側(cè)溝繭蜂體內(nèi)菌落數(shù)顯著多于對照組(P0.05);干擾MmCD36-1基因后感染陰溝腸桿菌,18 h內(nèi)中紅側(cè)溝繭蜂體內(nèi)菌落數(shù)逐漸增多,與對照組有顯著差異(P0.01)。綜上所述,我們的結(jié)果表明,MmSCRA-1基因在中紅側(cè)溝繭蜂蛹期發(fā)育過程中起到關鍵作用;MmCD36-1基因參與中紅側(cè)溝繭蜂清除細菌的過程,幫助寄生蜂抵御細菌入侵。
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S476.3
【圖文】：

圖 1-1 清道夫受體家族結(jié)構域（Canton et al., 2013）Fig. 1-1 Functional domain of scavenger receptor family（Canton et al., 2013）目前，C 型清道夫受體只在無脊椎動物中有報道。黑腹果蠅（Drelanogaster）C 型清道夫受體有 SR-CⅠ、SR-CⅡ、SR-CⅢ、SR-CⅣ四種（圖 端都含有兩個補體調(diào)控蛋白（complement control protein, CCP）結(jié)構域及 MA（R met et al., 2001; Lazzaro, 2005）。最近有研究發(fā)現(xiàn)，在黃粉蟲（Tenebrio m本對蝦（Marsupenaeus japonicus）中也存在 C 型清道夫受體（Kim et al., 2017l., 2016）。

圖 1-1 清道夫受體家族結(jié)構域（Canton et al., 2013）Fig. 1-1 Functional domain of scavenger receptor family（Canton et al., 2013）目前，C 型清道夫受體只在無脊椎動物中有報道。黑腹果蠅（Drosophilamelanogaster）C 型清道夫受體有 SR-CⅠ、SR-CⅡ、SR-CⅢ、SR-CⅣ四種（圖 1-2），N 端都含有兩個補體調(diào)控蛋白（complement control protein, CCP）結(jié)構域及 MAM 結(jié)構域（R met et al., 2001; Lazzaro, 2005）。最近有研究發(fā)現(xiàn)，在黃粉蟲（Tenebrio molitor）、日本對蝦（Marsupenaeus japonicus）中也存在 C 型清道夫受體（Kim et al., 2017; Yang etal., 2016）。

與細胞表面的 GNBP（Gramnegative bacteria-binding protein）結(jié)合后，使下游細胞Sp tzle 發(fā)生剪切并激活的 Toll 通路，二是革蘭氏陰性菌表面的 DAP-型肽聚糖（DAPpeptidoglycan），與細胞表面的肽聚糖識別蛋白（peptidoglycan recognition protein, PGPGRP-LC 和細胞質(zhì)內(nèi)的 PGRP-LE 結(jié)合，激活的 Imd 途徑（immune deficiency pathw兩種信號途徑都受核轉(zhuǎn)錄因子 NF-κB 的調(diào)控，使抗菌肽基因表達產(chǎn)生抗菌肽，從而病原物（Otto et al., 2016）。

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本文編號：2770026