【摘要】：煙草青枯病是由土壤中青枯雷爾氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一種典型的土傳細(xì)菌性、維管束病害。青枯雷爾氏菌具有寄主范圍廣泛,地理分布復(fù)雜,致病性和生理特性多樣等特點(diǎn)。近年來(lái)全球極端氣候和天氣頻發(fā),短時(shí)強(qiáng)降雨和長(zhǎng)期高溫干旱天氣使得青枯病發(fā)生愈發(fā)頻繁,由此造成的農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)質(zhì)量下降等問(wèn)題也愈發(fā)突出,嚴(yán)重影響了栽培作物品質(zhì)和質(zhì)量安全,實(shí)現(xiàn)對(duì)青枯病的有效防控迫在眉睫!目前,對(duì)青枯病發(fā)病機(jī)理的研究主要集中在病原菌與寄主互作機(jī)制、土壤整體微生物或部分功能菌群與植物和病原菌互作過(guò)程、以及植物根系活性物質(zhì)在病原菌侵染植物中的作用等方面,而進(jìn)行土壤微生態(tài)調(diào)控防治青枯病的防控技術(shù)探索也只停留在宏觀整體水平。本研究論文以不同深度土層青枯菌及細(xì)菌種群的分布和組成為研究切入點(diǎn),研究發(fā)病與不發(fā)病煙株不同土層土壤與煙草青枯病發(fā)生的關(guān)系、不同土層的青枯菌的分布特征以及微生物結(jié)構(gòu)多樣性,旨在明確青枯菌在土壤中不同土層的分布情況,篩選可用于病害防控的根際微生物類(lèi)群,同時(shí),探究不同土層的調(diào)控措施對(duì)煙草青枯病的防控效果,為破解煙草青枯病發(fā)生的微生態(tài)機(jī)理提供新思路和新方法,為實(shí)現(xiàn)對(duì)煙草青枯病的精準(zhǔn)防控提供理論支撐。1.測(cè)定了煙草根際不同土層青枯菌含量發(fā)病土壤不同深度土層青枯菌含量均高于不發(fā)病土壤,在發(fā)病與不發(fā)病土壤中均發(fā)現(xiàn)10~30 cm土層青枯菌含量明顯較0~10 cm土層高,因此,在今后病害防控中需重視耕層底層土壤的病原菌基數(shù)控制。發(fā)病煙株根際土壤青枯菌含量在1.25~5.72×10~8 copies/g之間,不發(fā)病煙株根際土壤青枯菌含量在0.907~2.30×10~8 copies/g之間。2.明確了煙株根際不同土層煙草青枯病發(fā)生特征田間發(fā)病土盆栽試驗(yàn)結(jié)果顯示:20~30 cm土層發(fā)病最重,0~10 cm土層次之,10~20 cm土層最弱;不發(fā)病土接菌后的抑病試驗(yàn)結(jié)果顯示:10~20 cm土層抑病力最強(qiáng),20~30 cm土層次之,0~10 cm土層最弱。結(jié)果表明,10~20 cm土層對(duì)青枯病的發(fā)生有明顯的抑制作用,其致病性最弱,抑病性最強(qiáng),可作為后期尋找抑病關(guān)鍵因子的重要研究對(duì)象。同時(shí),20~30 cm土層致病性最強(qiáng),抑病性較弱。因此,在今后研究過(guò)程中建議重視10~30 cm土層中關(guān)鍵因子的分析,同時(shí),重視調(diào)控該土層防控?zé)煵萸嗫莶　?.分析了煙草青枯病發(fā)病區(qū)健康與發(fā)病煙株根際不同土層細(xì)菌結(jié)構(gòu)多樣性(1)變形菌門(mén)(Proteobacteria)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)、綠彎菌門(mén)(Chloroflexi,6個(gè))和酸桿菌門(mén)(Acidobacteria)均為發(fā)病和不發(fā)病土壤豐度排名前4的類(lèi)群。發(fā)病土壤和不發(fā)病土壤不同土層整體細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)不存在顯著差異。(2)對(duì)不同土層特異性細(xì)菌種群的分析結(jié)果表明,在深層土壤有顯著富集現(xiàn)象的細(xì)菌種群分別屬于Holophaga、Phenylobacterium、Acidothermus、Jatrophihabitans、Acidibacter和Sphingobium,尤其Holophaga和Acidibacter屬在發(fā)病和不發(fā)病土壤中均呈現(xiàn)往深層土壤富集的趨勢(shì)。不發(fā)病土壤環(huán)境中,與青枯菌屬負(fù)相關(guān)的地桿菌屬(Terrabacter)在表層土壤(0~10cm)的豐度顯著高于深層土壤(10~20和20~30 cm),而青枯菌屬正相關(guān)堆囊菌屬(Sorangium)隨土層加深,豐度顯著升高。(3)發(fā)病土壤中共篩選出22個(gè)與青枯菌屬密切相關(guān)的屬,不發(fā)病土壤中共篩選出8個(gè)與青枯菌屬密切相關(guān)的屬,在篩選出的28個(gè)與青枯菌屬豐度呈顯著相關(guān)性的屬中,類(lèi)諾卡氏屬(Nocardioides)均呈現(xiàn)出與青枯雷爾菌屬負(fù)相關(guān),而Mucilaginibacter則與青枯雷爾菌屬正相關(guān)。而類(lèi)諾卡氏屬(Nocardioides)豐度在10~20 cm土層中,不發(fā)病土壤類(lèi)諾卡氏屬(Nocardioides)豐度高于發(fā)病土壤,這可能與其強(qiáng)抑病性有密切關(guān)聯(lián)。因此,針對(duì)本研究篩選出的Holophaga、Acidibacter、類(lèi)諾卡氏屬(Nocardioides)、Mucilaginibacter、地桿菌屬(Terrabacter)和堆囊菌屬(Sorangium)等6個(gè)與煙草青枯病致病或抑制存在較強(qiáng)關(guān)聯(lián)的細(xì)菌種群,在今后的研究中做應(yīng)功能驗(yàn)證和重點(diǎn)關(guān)注。4.評(píng)估了不同調(diào)控措施調(diào)控不同土層對(duì)煙草青枯病發(fā)生的影響(1)表層土壤(0~10 cm)水份散失較快、受降雨影響最為直接、土壤溫度受光照影響波動(dòng)較大等特點(diǎn),而較深土層土壤(10~30 cm)溫濕度則較為穩(wěn)定,受光照和降雨影響較小。通過(guò)田間揭膜培土試驗(yàn),本節(jié)證明了揭膜處理可顯著降低土壤溫度1.7~3.7℃,降低土壤濕度50%,有利于改善膜下高溫高濕的土壤環(huán)境。同時(shí),揭膜培土也明顯降低了20~30 cm土層青枯菌的含量,對(duì)煙草青枯病也有明顯的防控效果,最高防效可達(dá)44.19%,而壟上培土量的增加也可進(jìn)一步促進(jìn)對(duì)煙草青枯病的防控效果。(2)生物炭處理不同土層后(0~10 cm、10~20 cm和20~30 cm),對(duì)應(yīng)土層土壤pH可顯著提高0.46~0.65個(gè)單位(p=0.05),但是對(duì)土壤中青枯菌沒(méi)有較為顯著的影響,對(duì)煙草青枯病的防控效果也不佳。熒光假單胞桿菌和硫酸鏈霉素處理可降低處理一定范圍內(nèi)病原青枯菌的數(shù)量。不同的是,熒光假單胞桿菌只對(duì)處理土層的病原青枯菌具有抑制作用,且處理深層土壤(10~30 cm)時(shí)對(duì)煙草青枯病的防控效果可達(dá)37.96%~63.58%。而硫酸鏈霉素對(duì)處理土層以下的土層有一定抑菌作用,當(dāng)處理表層土壤(0~10 cm)時(shí)對(duì)煙草青枯病的防控效果最佳,防效可達(dá)56.19%。因此,建議在今后的生產(chǎn)過(guò)程中重視控制耕層深層土壤病原菌基數(shù),如盡早移除發(fā)病煙株和進(jìn)行冬耕曬土,同時(shí),在施用藥劑處理時(shí)應(yīng)有針對(duì)性,如微生物類(lèi)菌劑需在早期在深層土壤施用,而殺菌劑類(lèi)可在移栽封窩后及時(shí)處理表層土壤。
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S435.72
【圖文】：

本研究技術(shù)路線

圖 2-2-2 不同土層深度土壤青枯菌含量Fig.2-2-2 the R.solanacearum among soil depths在不同深度土層的移動(dòng)情況研究土壤種植煙草 20 d 后不同土層土壤進(jìn)行青枯菌 RT-PCR 定量檢測(cè)分析，（10~15 cm）中青枯菌含量顯著高于淺層土壤（5~10 cm）（p<0.001）。擾處理后（正常噴施補(bǔ)水），深層土壤青枯菌含量為淺層土壤的 2.3 倍節(jié) 2.1 的結(jié)果相符，進(jìn)一步證實(shí)了青枯菌往土壤深處富集和轉(zhuǎn)移。

圖 2-2-2 不同土層深度土壤青枯菌含量Fig.2-2-2 the R.solanacearum among soil depths的移動(dòng)情況研究 20 d 后不同土層土壤進(jìn)行青枯菌 RT-PCR青枯菌含量顯著高于淺層土壤（5~10 c噴施補(bǔ)水），深層土壤青枯菌含量為淺層符，進(jìn)一步證實(shí)了青枯菌往土壤深處富集

【參考文獻(xiàn)】

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1 王娜;蘭建強(qiáng);王定偉;楊德海;;不同耕作深度對(duì)烤煙生長(zhǎng)及產(chǎn)、質(zhì)量的影響[J];西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2014年04期

2 朱同彬;孫盼盼;黨琦;張金波;蔡祖聰;;淹水添加有機(jī)物料改良退化設(shè)施蔬菜地土壤[J];土壤學(xué)報(bào);2014年02期

3 張玉平;劉強(qiáng);榮湘民;謝桂先;李波;;不同有機(jī)肥與化肥配施對(duì)稻田土壤微生物活性的影響[J];土壤通報(bào);2013年06期

4 劉曉姣;丁偉;徐小洪;謝華東;王紹吉;;4種生物防治菌對(duì)煙草青枯病防治的研究進(jìn)展[J];植物醫(yī)生;2013年04期

5 杜慧竟;余利巖;張玉琴;;類(lèi)諾卡氏屬放線菌的研究進(jìn)展[J];微生物學(xué)報(bào);2012年06期

6 王潤(rùn)屹;黃凌云;黃芳;;5種常用肥料對(duì)重茬地草莓產(chǎn)量、品質(zhì)及病害的影響[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年04期

7 董夏偉;繆莉;靳翠麗;董昆明;周曉見(jiàn);;一株高效抑制煙草青枯病菌的煙田土壤細(xì)菌的分離與鑒定[J];江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2011年06期

8 宋敏麗;溫祥珍;李亞靈;;根際高溫對(duì)植物生長(zhǎng)和代謝的影響綜述[J];生態(tài)學(xué)雜志;2010年11期

9 徐樹(shù)德;尚志強(qiáng);秦西云;;煙草青枯病研究進(jìn)展[J];天津農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年04期

10 胡汝曉;趙松義;譚周進(jìn);肖漢乾;巢進(jìn);屠乃美;周清明;;煙草連作對(duì)稻田土壤微生物及酶的影響[J];核農(nóng)學(xué)報(bào);2007年05期

本文編號(hào)：2756124