【摘要】：為明確我省核桃主要病蟲害種類和有效的防治核桃潰瘍病,促進(jìn)核桃產(chǎn)業(yè)穩(wěn)步發(fā)展。本研究通過對(duì)河北省核桃主要病蟲害的調(diào)查,并以核桃潰瘍病為研究對(duì)象,采用組織分離法和針刺法分別對(duì)病原菌進(jìn)行分離和致病性測(cè)定,通過對(duì)病原菌的形態(tài)觀察和ITS序列分析鑒定病原菌。通過對(duì)病原菌菌絲生長和孢子萌發(fā)最適條件的測(cè)定,弄清其生物學(xué)特性。通過室內(nèi)毒力測(cè)定和離體枝條試驗(yàn)篩選高效的化學(xué)防治藥劑。結(jié)果如下:(1)經(jīng)對(duì)河北省核桃主產(chǎn)區(qū)病蟲害的調(diào)查,發(fā)現(xiàn)河北省核桃主要病害有核桃炭疽病、核桃潰瘍病、核桃腐爛病、核桃黑斑病、核桃白粉病、核桃枝枯病、核桃褐斑病等。主要蟲害有核桃綴葉螟、綠刺蛾、扁刺蛾、核桃舉肢蛾、核桃扁葉甲、核桃黑斑蚜、舞毒蛾、云斑天牛等。秦皇島市海港區(qū)病害發(fā)生嚴(yán)重,核桃炭疽病與核桃潰瘍病病情指數(shù)分別為71.2與63.8。邢臺(tái)市邢臺(tái)縣核桃園病害發(fā)生較重且種類多,核桃白粉病、核桃炭疽病和核桃褐斑病的病情指數(shù)分別為69.2、61.3、49.3。保定市易縣核桃園病害發(fā)生較輕,以核桃炭疽病與核桃枝枯病為主,病情指數(shù)分別為44.5和37.9。核桃綴葉螟在秦皇島撫寧區(qū)和保定阜平縣危害嚴(yán)重;綠刺蛾、扁刺蛾和核桃舉肢蛾在邢臺(tái)縣核桃園集中危害;核桃黑斑蚜在秦皇島海港區(qū)和易縣核桃園普遍發(fā)生;舞毒蛾主要在秦皇島核桃主產(chǎn)區(qū)集中發(fā)生;銅綠金龜子、藍(lán)跳甲等害蟲,在秦皇島和保定核桃產(chǎn)區(qū)零星發(fā)生。(2)經(jīng)過對(duì)核桃潰瘍病菌的分離、鑒定、致病性測(cè)定,確定引起河北省核桃潰瘍病的病原為HT01菌株,通過形態(tài)學(xué)觀察和ITS序列分析,確認(rèn)病原菌為葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea。(3)通過對(duì)核桃潰瘍病菌菌絲最適生長條件測(cè)定表明,病原菌菌絲生長適宜的溫度為25~30℃,適宜的pH為6~8,最佳培養(yǎng)基是PDA培養(yǎng)基,全光照條件下生長速度快;通過對(duì)病原菌分生孢子最適萌發(fā)條件研究表明,孢子萌發(fā)適宜的溫度為30~40℃,適宜的pH為5~7,相對(duì)濕度在85%~100%范圍內(nèi)適宜孢子萌發(fā),濕度為100%萌發(fā)率最高,全黑暗條件下有利于病原菌孢子的萌發(fā)。(4)不同藥劑對(duì)核桃潰瘍病菌室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明,不同藥劑對(duì)病原菌菌絲生長抑制作用不同,其中25%丙環(huán)唑乳油對(duì)核桃潰瘍病菌菌絲抑制效果最好,5h時(shí)抑制率為93.00%。供試藥劑抑制孢子萌發(fā)試驗(yàn)中,25%丙環(huán)唑乳油、70%甲基硫菌靈可濕性粉劑、43%戊唑醇懸浮劑、80%波爾多液可濕性粉劑和75%百菌清可濕性粉劑均能100%抑制孢子萌發(fā),4h時(shí)孢子萌發(fā)率為0。(5)藥劑對(duì)核桃潰瘍病菌抑制作用室內(nèi)離體枝條試驗(yàn)表明,不同藥劑對(duì)核桃潰瘍病菌的保護(hù)作用不同,其中25%丙環(huán)唑乳油的保護(hù)作用最佳,發(fā)病率較對(duì)照降低了25%,平均病斑面積為2.56cm~2,防治效果為74.97%。同時(shí),25%丙環(huán)唑乳油的治療作用也明顯優(yōu)于其它藥劑,防治效果為72.00%�！叭嶂ā睗B透劑對(duì)不同藥劑的治療效果均表現(xiàn)出了一定的增效作用,但與25%丙環(huán)唑乳油混合后防效最好,治療防效由72.00%上升到80.39%。所以生產(chǎn)上可以用25%丙環(huán)唑乳油配合“柔脂通”滲透劑預(yù)防和防治核桃潰瘍病。
【學(xué)位授予單位】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S436.64
【圖文】：

由于果園內(nèi)郁閉度高，樹上樹下均有黑核桃，嚴(yán)重影響核桃產(chǎn)量。核桃扁葉甲在保定易縣大水峪易水湖景區(qū)核桃園普遍發(fā)生，園中核桃樹上常見食成網(wǎng)狀或缺刻的葉片。核桃黑斑蚜繁殖力強(qiáng)、易產(chǎn)生抗藥性、防治難度大，在河北核桃產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生。舞毒蛾食性雜，在秦皇島核桃主產(chǎn)區(qū)集中發(fā)生。由于地理位置與氣候等因素大青葉蟬在邢臺(tái)核桃產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生。銅綠金龜子、藍(lán)跳甲等害蟲，在秦皇島和保定核桃產(chǎn)區(qū)零星發(fā)生。3.2 核桃潰瘍病菌的分離與鑒定3.2.1 核桃潰瘍病菌的分離與致病性測(cè)定對(duì)感病組織進(jìn)行分離培養(yǎng)后共得到 3 個(gè)菌株，分別編號(hào)為 HT01、HT02、HT03，將以上菌株接種到燙傷的核桃枝條上，只有 HT01 發(fā)病，HT02 與 HT03 未見發(fā)病，且 HT01 與采回來的病斑標(biāo)本癥狀相似。依照柯赫氏法則從感病枝條病健交界處進(jìn)行再分離，得到與接種菌相同的菌株。HT01 接種枝條發(fā)病情況及對(duì)照處理見圖 3-1。

河北省核桃主要病蟲害調(diào)查及核桃潰瘍病化學(xué)防治研究從圖 3-1 中可以看出，HT01 接種 5d 后開始出現(xiàn)與田間相近的癥狀，接種枝條出現(xiàn)褐色病斑。8d 發(fā)病癥狀明顯，病斑呈褐色長橢圓形。15d 時(shí)，病斑擴(kuò)大顏色變深，且有大量黑色小粒點(diǎn)（分生孢子器）出現(xiàn)，病斑中央經(jīng)擠壓有褐色粘稠液流出。20d后，病斑干腐凹陷，枝條皮層全部變?yōu)楹谏�，且散生很多黑色小粒點(diǎn)。對(duì)照培養(yǎng)沒有發(fā)病，枝條健康青綠。3.2.2 核桃潰瘍病菌形態(tài)觀察HT01 在 PDA 上培養(yǎng)的菌落形態(tài)見圖 3-2。

從圖 3-3 可以看出 HT01 經(jīng)健康的核桃樹皮誘導(dǎo)，5d 后產(chǎn)生分生孢子器，分生孢子器分別著生在菌絲體表面、部分或整個(gè)埋在培養(yǎng)基內(nèi)，核桃樹皮組織上的分生孢子器著生其表面或部分埋在樹皮中。黑色、灰色，球狀或擬球狀，單生或聚生，直徑為0.5~2mm，分生孢子器壁由致密的角質(zhì)化組織構(gòu)成。分生孢子梭形或長橢圓形，單胞，無色或蒼白色，壁薄，大小為 14.8~30.1×4.6~10.1μm。通過查閱《真菌鑒定手冊(cè)》和《植物病原真菌學(xué)》相關(guān)書籍，根據(jù)上述形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，初步鑒定 HT01 為葡萄座腔菌（B. dothidea）。3.2.3 核桃潰瘍病菌分子生物學(xué)特性鑒定提取病原菌菌絲 DNA，通過 PCR 擴(kuò)增與序列對(duì)比對(duì)病原菌進(jìn)行鑒定。經(jīng)特異引物擴(kuò)增獲得病原菌核糖體 ITS 序列，序列為：a b c圖 3-3 HT01 分生孢子器及分生孢子的形態(tài)Fig. 3-3 The pycnidium and conidia morphology of HT01注：a HT01 子實(shí)體；b HT01 分生孢子器切片（光學(xué)顯微鏡 10×40）；c HT01 分生孢子（光學(xué)顯微鏡 10×10）Note：a Pycnidium of HT01；b Pycnidium slice of HT01；c Conidia of HT01

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