【摘要】：人參(Panax ginseng C.A.Mey)歷來被視為百草之王,是我國最重要的藥用植物之一,具有極高的藥用價值,也是長白山區(qū)調(diào)整農(nóng)業(yè)種植結(jié)構(gòu)、農(nóng)民增收致富的主要途徑。國家明令禁止新林地開墾栽參,故農(nóng)田栽參將成為一種必然趨勢。農(nóng)田地雜菌繁多,人參病害加重且防治較難,進(jìn)而對人參的品質(zhì)及產(chǎn)量造成嚴(yán)重影響。木霉菌作為生防菌廣泛應(yīng)用于植物病害防治,目前國內(nèi)外關(guān)于木霉菌防治植物土傳病害已有大量報道。近年來,將具有調(diào)節(jié)植物生長、改良土壤特性、拮抗土傳病原微生物等功能的一種或多種微生物與傳統(tǒng)有機(jī)肥復(fù)配,經(jīng)二次發(fā)酵制得的生物有機(jī)肥廣受好評。本文對生防菌哈茨木霉Psn86的主要生物學(xué)特性、對人參銹腐病菌抑制作用、GFP標(biāo)記及定殖示蹤及在土壤和有機(jī)肥中的定殖示蹤、與有機(jī)肥混合對人參防御酶系的影響進(jìn)行了研究,為生防菌哈茨木霉Psn86的防病機(jī)制和推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。1.生防菌哈茨木霉Psn86的主要生物學(xué)特性。對生防菌哈茨木霉Psn86主要生物學(xué)特性研究表明,哈茨木霉Psn86菌絲生長最適培養(yǎng)基為PSA,產(chǎn)孢最適培養(yǎng)基為PDA;哈茨木霉Psn86菌絲生長和產(chǎn)孢最適培養(yǎng)pH值均為6;最適培養(yǎng)溫度均為30℃,最適碳源均為蔗糖,最適氮源均為牛肉膏,最適培養(yǎng)時間均為第3d,哈茨木霉Psn86菌絲生長最適光暗條件為全黑暗培養(yǎng),產(chǎn)孢最適光暗條件為光照。2.哈茨木霉Psn86對人參銹腐菌抑制作用。通過對峙培養(yǎng),研究了生防菌哈茨木霉Psn86對人參銹腐病菌的拮抗作用。結(jié)果表明,溫度影響生防菌株哈茨木霉菌Psn86對人參銹腐病菌的抑制作用,20℃下哈茨木霉菌Psn86對人參銹腐病菌的抑制率為75.82%,25℃下哈茨木霉菌Psn86對人參銹腐病菌的抑制率為81.33,升高了7.27%。通過室內(nèi)盆栽試驗(yàn)防效測定結(jié)果表明,預(yù)防試驗(yàn)處理組的防治效果明顯好于治療試驗(yàn)處理組,轉(zhuǎn)代培養(yǎng)對哈茨木霉Psn86的抑制能力沒有較大影響。3.生防菌哈茨木霉Psn86的GFP標(biāo)記及定殖示蹤及在土壤和有機(jī)肥中的定殖示蹤。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的真菌遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),成功地將帶潮霉素基因和gfp基因的質(zhì)粒AGL-1轉(zhuǎn)到了生防菌哈茨木霉菌Psn86菌株內(nèi),得到了轉(zhuǎn)化子菌株P(guān)sn86-g。本試驗(yàn)中獲得的轉(zhuǎn)化子菌株P(guān)sn86-g,遺傳穩(wěn)定且熒光性強(qiáng)。將轉(zhuǎn)化子菌株P(guān)sn86-g與菌株P(guān)sn86在培養(yǎng)時間、pH、溫度和對人參銹腐病菌的抑菌作用等條件下菌絲和產(chǎn)孢的情況進(jìn)行了比較,試驗(yàn)結(jié)果表明:與菌株P(guān)sn86相比,轉(zhuǎn)化子菌株P(guān)sn86-g菌絲生長和產(chǎn)孢均略低,但菌絲最適生長條件和產(chǎn)孢最適生長條件沒有發(fā)生變化,抑菌能力由84.00%下降到81.60%,但是差異不顯著。4.生防菌哈茨木霉Psn86與有機(jī)肥混合對人參防御酶系的影響。通過對土肥混合以及土肥混合接種人參銹腐病對人參7種防御酶活性及ASAFR和H_2O_2含量測定,結(jié)果表明,與對照相比,土肥混合以及土肥混合接種人參銹腐病均會誘導(dǎo)人參氧化物酶(POD),超氧化物歧化酶(SOD),過氧化氫酶(CAT),丙苯氨酸解氨酶(PAL),多酚氧化酶(PPO)等多種防御酶活性上升,防御酶活性維持在較高的水平,可以使人參植株的抗病性增強(qiáng)。由以上結(jié)論可以推測,哈茨木霉Psn86主要抗病機(jī)制為誘導(dǎo)人參植株防御酶系活性的增加。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S476;S435.675
【圖文】：

圖 2-1 不同培養(yǎng)基對哈茨木霉 Psn86 菌絲生長的影響Fig.2-1 Effect of culture media on colony growth of Psn86圖 2-2 不同培養(yǎng)基對哈茨木霉 Psn86 產(chǎn)孢量的影響Fig.2-2 Effect of culture media on conidia number of Psn86

圖 2-2 不同培養(yǎng)基對哈茨木霉 Psn86 產(chǎn)孢量的影響Fig.2-2 Effect of culture media on conidia number of Psn86圖 2-3 不同培養(yǎng)基培養(yǎng)下哈茨木霉 Psn86 菌落形態(tài)Fig. 2-3 Cultural characteristics on different culture media of Psn86H 對哈茨木霉 Psn86 菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響-4 和圖 2-5 可知，哈茨木霉 Psn86 在 pH 為 3~11 培養(yǎng)條件下均可生和產(chǎn)孢量在不同 pH 條件下具有顯著性差異。其中哈茨木霉 PsnH 條件為 pH=6，其次為 pH=7、pH=5、pH=4，產(chǎn)孢最適 pH 條件=7、pH=8、pH=5。

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本文編號：2724973