發(fā)布時間：2020-06-14 10:47

【摘要】：植物U-box蛋白(Plant U-box protein,PUB)是泛素化系統(tǒng)中一種負責識別底物蛋白的重要組分,與植物抗性反應,信號傳導、轉錄調控等過程相關。為了明確大豆與大豆胞囊線蟲(Heterodera glycines,SCN)互作中與抗線蟲相關的PUB蛋白基因(GmPUBs)。本文選用感病品種遼豆15和抗病品種灰皮支黑豆,接種大豆胞囊線蟲3號生理小種(SCN3),通過qRT-PCR測定了GmPUBs家族中的GmPUB1、GmPUB5、GmPUB6、GmPUB7、GmPUB8和GmPUB9在胞囊線蟲侵染抗感品種后的表達量變化,研究這6個基因是否參與了大豆對胞囊線蟲的抗病過程。為了明確水楊酸(Salicylic Acid,SA)和茉莉酸(Jasmonie acid,JA)信號物質對GmPUBs表達影響變化,用外源激素水楊酸和茉莉酸甲酯(MeJA)分別處理大豆抗感品種后測定這6個基因的表達量變化,統(tǒng)計線蟲不同齡期數(shù)量變化,研究這6個基因是否參與SA或JA抗線蟲信號途徑。主要結果如下:1.大豆中GmPUBs基因表達試驗結果表明GmPUB1和GmPUB6在大豆與胞囊線蟲互作中與抗性相關,GmPUB8、GmPUB5和GmPUB9與大豆抗胞囊線蟲發(fā)育的調控有關。將抗感品種接種大豆胞囊線蟲3號生理小種1d、3d、5d、10d、15d后取樣,qRT-PCR測定6個GmPUBs基因的表達情況發(fā)現(xiàn),抗病品種中,GmPUB1和GmPUB6在接種SCN3后始終顯著上調�？垢衅贩N中,GmPUB8在接種SCN3 10d和15d后表達顯著上調,GmPUB5和GmPUB9在接種SCN3 15d后表達顯著上調。2.根據(jù)SA處理大豆后GmPUBs基因表達變化,明確了GmPUB6和GmPUB8參與了SA抗SCN發(fā)育信號途徑。連續(xù)噴施SA于抗感大豆葉片三天后接種SCN3,根染色發(fā)現(xiàn)二齡幼蟲侵入數(shù)目無顯著差異,接種SCN3 10d和15d后根中三齡四齡線蟲數(shù)目均顯著降低,說明SA可抑制根中SCN的發(fā)育。采用qRT-PCR技術檢測基因表達變化,發(fā)現(xiàn)在抗感品種中,GmPUB6和GmPUB8在SA處理并接種SCN3 10d和15d后的基因表達與只用SA處理和只接種SCN3比均顯著上調。3.根據(jù)MeJA處理大豆后GmPUBs基因表達變化,明確了GmPUB1、GmPUB7和GmPUB9參與JA抗SCN侵入信號途徑。連續(xù)噴施MeJA于抗感大豆葉片三天后接種SCN3,根染色發(fā)現(xiàn)接種SCN3 1d和3d后根中二齡線蟲數(shù)目顯著降低,說明JA抑制SCN的侵入。采用qRT-PCR技術檢測基因表達變化,發(fā)現(xiàn)在抗感品種中,GmPUB1、GmPUB7和GmPUB9在MeJA處理并接種SCN3 1d和3d后基因表達與只用MeJA處理和只接種SCN3比均顯著上調。
【學位授予單位】：沈陽農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S435.651
【圖文】：

沈陽農業(yè)大學碩士學論文部，以便找雌蟲進行受精。雌蟲繼續(xù)取食，它在一個黃色凝膠狀基質中產下 200 到 40個卵，形成一個卵囊留在體內。然后雌蟲死去，變成一個含有大量卵的深褐色胞囊。當土壤條件適宜時，卵可能孵化，幼蟲在包囊內發(fā)育，生物周期不斷重復。通常一年有三代人。在秋季或不利條件下，含有休眠幼蟲的包囊可能會在土壤中保存數(shù)年（鄭雅楠2009；Bird，2011）。

圖 1-3 泛素化系統(tǒng)示意圖（Vierstra, 2009）3 The schematic diagram of the ubiquitin-26S proteasome system (Vierstr白結構特點 E3 連接酶的特征在于約 70 個氨基酸的保守 U-box 基序。 缺失支架的修飾的 RING-指結構域和在典型的 RING結構域和組氨酸殘基。在擬南芥中有大約 64 個預測的 PUB（植物 U，2009）。對來自幾種不同植物物種的 PUB 的研究表明，這些發(fā)揮一系列功能，包括植物自交不親和性，種子萌發(fā)，開花時多非生物脅迫響應。 E3 泛素連接酶屬于大家族，在擬南芥基因組中有 64 個預測的UB 基因已經在水稻基因組中被注釋（Wiborg et al，2008；Zeng了模型微藻萊茵衣藻和大白菜中PUB基因的全基因組分析（L

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本文編號：2712667