發(fā)布時(shí)間：2020-05-31 19:28

【摘要】：本文以生產(chǎn)上危害嚴(yán)重的大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病為主要的防治對(duì)象,利用生防菌發(fā)酵液包衣處理大豆種子的方式,篩選出兼防大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病的生防菌株,并對(duì)篩選所獲得的高效菌株Snef66與實(shí)驗(yàn)室前期篩選獲得的Sneb207巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)和Sneb253委內(nèi)瑞拉鏈霉菌(Streptomyces venezuelae)按照一定的比例進(jìn)行復(fù)配,同時(shí)添加助劑制成新型的多功能的生物種衣劑SN103,并進(jìn)行大田試驗(yàn)的驗(yàn)證,旨在安全有效的方式解決大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病在生產(chǎn)上的防治問(wèn)題。在其高效防治大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病的基礎(chǔ)上,對(duì)篩選出的有效菌株的分類地位,誘抗作用物質(zhì)和作用機(jī)理進(jìn)行了研究,其主要的研究成果如下:1.誘導(dǎo)大豆抗胞囊線蟲病和灰斑病的生防菌株的篩選以大豆胞囊線蟲和大豆灰斑病菌為靶標(biāo),通過(guò)4600株菌株發(fā)酵液包衣大豆種子在大田進(jìn)行初篩試驗(yàn),初步獲得8株有效菌株,其中真菌6株,細(xì)菌2株。第二年將初篩獲得的8株菌株進(jìn)行溫室盆栽試驗(yàn)和大田驗(yàn)證試驗(yàn),最終篩選出的Snef66菌株不但能誘導(dǎo)大豆抗胞囊線蟲和灰斑病,同時(shí)又具有促進(jìn)生長(zhǎng)和增加產(chǎn)量的作用。2.誘導(dǎo)大豆抗胞囊線蟲病和灰斑病的生防菌株鑒定有效細(xì)菌菌株的鑒定:鑒定結(jié)果顯示,細(xì)菌Sneb13為芽孢菌屬,蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus);細(xì)菌Sneb16為沙雷氏菌屬,普城沙雷氏菌(Serratia plymuthica)。有效真菌菌株的鑒定:依靠傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)鑒定的方法,結(jié)合現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),對(duì)篩選出的6株生防真菌進(jìn)行鑒定。鑒定結(jié)果顯示,真菌SnefL7為鐮刀菌屬,尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum);真菌Snef66為青霉菌屬,草酸青霉菌(Penicillium oxalicum);3株真菌SnefX1、SnefX4、SnefX10均為木霉屬真菌,分別為綠色木霉(Trichoderma viride)、擬康氏木霉(T.pesudokoningii)、長(zhǎng)孢木霉(T.longipile);真菌SnefW31為曲霉菌屬,黃曲霉(Aspergillus flavus)。利用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)菌株內(nèi)東莨菪素的含量,結(jié)果顯示,草酸青霉Snef66中含有東莨菪素,且含量較高。3.新型抗大豆胞囊線蟲病和灰斑病的生物種衣劑的研制利用實(shí)驗(yàn)室前期篩選獲得的2株對(duì)大豆胞囊線蟲病有抗性的菌株與篩選獲得草酸青霉Snef66進(jìn)行混配,通過(guò)線蟲觸殺試驗(yàn)確定了最終的復(fù)配比例為Sneb207:Sneb253:Snef66=2×10~9:10~9:10~9=2:1:1。然后將復(fù)配制成的生物菌劑,添加助劑后進(jìn)行一系列的室內(nèi)試驗(yàn)和大田試驗(yàn)驗(yàn)證了其防效的穩(wěn)定性,最終將其命名為SN103,SN103不僅對(duì)大豆胞囊線蟲病和灰斑病防效顯著,且對(duì)大豆發(fā)芽以及幼苗均有一定的促進(jìn)作用。4.東莨菪素包衣種子誘導(dǎo)大豆抗灰斑病的研究經(jīng)過(guò)檢測(cè)在篩選獲得的生防菌株Snef66草酸青霉菌的發(fā)酵液中含有東莨菪素,且與對(duì)照相比,東莨菪素含量較高。所以利用東莨菪素直接包衣處理大豆種子,通過(guò)平板對(duì)峙,種子萌發(fā),促生,盆栽和大田等試驗(yàn),證明了東莨菪素處理過(guò)的種子顯著提高了對(duì)大豆灰斑病的抗性,且同時(shí)還能促進(jìn)生長(zhǎng)和增加產(chǎn)量。
【圖文】：

圖 1-1 大豆灰斑病病斑A. 不同時(shí)期病斑 B.D..顯微圖片正面；C.E.顯微圖片背面Figure 1-1Soybean gray spot disease spotA. The lesions in different periods B.D..microscopic picture front;C.E.microscopic picture back斑病的病原菌及侵染菌屬大豆褐斑短胖孢菌，半知菌類尾孢屬。分生孢子梗不分枝，淡褐色狀，無(wú)色透明 ，基部鈍圓 ，頂端尖細(xì)，具 1~9 個(gè)隔 ，（19~80）μm×（邵波，2012；丁俊杰，2009；丁俊杰等，2012；馬淑梅，2011；顧鑫等黃桂潮，1984）。圖 1-2 大豆灰斑病菌形態(tài)特征

圖 1-1 大豆灰斑病病斑A. 不同時(shí)期病斑 B.D..顯微圖片正面；C.E.顯微圖片背面Figure 1-1Soybean gray spot disease spotA. The lesions in different periods B.D..microscopic picture front;C.E.microscopic picture back1.2.2 大豆灰斑病的病原菌及侵染大豆灰斑病菌屬大豆褐斑短胖孢菌，半知菌類尾孢屬。分生孢子梗不分枝，淡褐色。分生孢子圓柱形或倒棍棒狀，無(wú)色透明 ，基部鈍圓 ，頂端尖細(xì)，具 1~9 個(gè)隔 ，，（19~80）μm×（3.5~8.0）μm，無(wú)色透明（邵波，2012；丁俊杰，2009；丁俊杰等，2012；馬淑梅，2011；顧鑫等，2010；曹越平等，2003；黃桂潮，1984）。
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S435.651

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本文編號(hào)：2690352