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海南省溫郁金兩種病害的病原鑒定、生物學(xué)特性及室內(nèi)藥劑篩選

發(fā)布時(shí)間:2020-05-28 01:13
【摘要】:溫郁金(Curcuma wenyujinn Y H.Chen et C.Ling),姜科(Zingiberaceae)姜黃屬(Curcuma L.)草本植物,在中國(guó)擁有悠久的藥用歷史,原產(chǎn)于浙江瑞安,1997年海南省開始引進(jìn)種植溫郁金,近幾年因溫郁金白絹病和溫郁金炭疽病導(dǎo)致產(chǎn)量和質(zhì)量均有所下降,目前國(guó)內(nèi)外對(duì)溫郁金的研究主要集中在化學(xué)成分及藥理作用方面,對(duì)溫郁金病害的研究非常少,因此本文首次對(duì)上述兩種病害進(jìn)行了初步研究,包括病原鑒定、生物學(xué)特性測(cè)定及室內(nèi)藥劑篩選,主要結(jié)果如下:溫郁金白絹病主要為害莖基部和葉鞘,發(fā)病初期,莖基部形成暗褐色、水漬狀、不定形的病斑,隨后病斑逐漸向上擴(kuò)展,病部表面覆蓋白色絹絲狀菌絲層及茶褐色的菌核,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致全株萎蔫枯死。經(jīng)過(guò)病原菌的分離純化、致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特征觀察和ITS基因系統(tǒng)學(xué)分析將溫郁金白絹病的病原菌鑒定為齊整小核菌Sclerotium rolfsii Sacc.。生物學(xué)特性試驗(yàn)結(jié)果表明,病原菌菌絲生長(zhǎng)和菌核形成的最適溫度范圍為30~32 ℃,菌絲和菌核的致死溫度分別是51 ℃和53℃,菌絲生長(zhǎng)的最適pH范圍為5.0~6.0,菌核形成的最適pH是7.0,菌絲生長(zhǎng)和菌核形成的最佳碳源均為蔗糖,最佳氮源均為硝酸鈉,燕麥培養(yǎng)基和玉米培養(yǎng)基更適合病原菌的生長(zhǎng),黑暗條件有利于菌絲的生長(zhǎng),12 h光暗交替有利于菌核的形成。采用含毒介質(zhì)法測(cè)定10種殺菌劑對(duì)病原菌的室內(nèi)毒力,結(jié)果表明三唑類殺菌劑烯唑醇、毗唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑和氟硅唑的抑菌效果較強(qiáng),EC50均小于1μg/mL。溫郁金炭疽病主要為害葉片,偶見為害葉鞘。發(fā)病初期形成淡黃色水漬狀的橢圓形病斑,隨后病斑進(jìn)一步擴(kuò)展,中心呈灰白色至灰褐色,邊緣為深褐色,最外層環(huán)繞明顯的黃色暈圈,病斑正面生出許多黑色小點(diǎn),嚴(yán)重時(shí)可造成葉片卷縮和枯死。經(jīng)過(guò)病原菌的分離純化、致病性測(cè)定、形態(tài)學(xué)特征觀察和多基因(ITS、AC TUB2、CHS-1、GAPDH和HIS3)系統(tǒng)學(xué)分析將溫郁金炭疽病的病原菌鑒定為郁金炭疽菌Colletotrichum curcumae(Syd.)E.J.ButlerBisby。生物學(xué)特性試驗(yàn)結(jié)果表明,病原菌菌絲生長(zhǎng)及孢子產(chǎn)生對(duì)培養(yǎng)條件的要求基本一致,最適溫度均為27 ℃,最適pH均為6.0,最佳培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基,最佳碳源和氮源分別是麥芽糖和硝酸鉀,黑暗條件有利于菌絲的生長(zhǎng),12 h光暗交替有利于孢子的形成。采用含毒介質(zhì)法測(cè)定10種殺菌劑對(duì)病原菌的室內(nèi)毒力,結(jié)果表明三唑類殺菌劑烯唑醇、氟硅唑、丙環(huán)唑、苯醚甲環(huán)唑和咪唑類殺菌劑咪鮮胺對(duì)病原菌的抑菌效果較強(qiáng),EC50均小于1 μg/mL。以上研究成果為溫郁金病害的田間防治提供了理論依據(jù),對(duì)海南省溫郁金產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。
【圖文】:

溫郁金,癥狀


3.1.1田間癥狀與為害情況逡逑溫郁金白絹病主要為害近地面的莖基部和葉鞘。發(fā)病初期,莖基部先出現(xiàn)暗褐色、逡逑水漬狀、不規(guī)則狀的病斑,稍微有些凹陷(圖1邋A),隨后病斑逐漸擴(kuò)大向上蔓延到逡逑葉鞘,邊緣呈現(xiàn)暗褐色至黑褐色(圖1B),經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后受害部位顏色變得更深,逡逑表面呈波紋狀并覆蓋著一些絹絲狀的白色菌絲,用手觸碰莖部能感覺(jué)到變軟腐爛,拔逡逑起時(shí)易折斷,有時(shí)病株附近的土地上也會(huì)布滿白色菌絲(圖1邋C),后期發(fā)病部位產(chǎn)逡逑生大量菌核,顏色開始為白色,之后變?yōu)辄S色,成熟后又變?yōu)椴韬稚,形狀如同油菜逡逑籽一般,表面光滑(圖1邋D)。病斑可環(huán)繞莖部橫向擴(kuò)展,使植物體內(nèi)水分及養(yǎng)分的逡逑運(yùn)輸受到影響,進(jìn)而導(dǎo)致上部葉片生長(zhǎng)不良,變黃凋萎,當(dāng)植物剩余的營(yíng)養(yǎng)成分被消逡逑耗殆盡時(shí)就會(huì)引起整株枯死倒伏。海南省溫郁金白}y病的發(fā)病盛期在7?9月,所調(diào)查逡逑的6個(gè)溫郁金種植基地中均有該病害發(fā)生

溫郁金,癥狀


逑隨后莖部表面生出大量的白色菌絲和茶褐色油菜籽狀菌核,與自然環(huán)境下發(fā)病的溫郁逡逑金癥狀相同(圖2邋A ̄D),而接種了PDA培養(yǎng)基的對(duì)照組植株均沒(méi)有感病癥狀出現(xiàn)(圖逡逑2邋E)。從病株莖基部再一次分離純化的病原菌,,與接種用的菌株有一樣的形態(tài)特征,逡逑符合柯赫氏法則。由此確定,菌株JN0610是引起溫郁金白絹病的病原菌。逡逑二娭」、逡逑圖2溫郁金白絹病菌接種癥狀逡逑Fig.邋2邋Inoculation邋symptoms邋of邋C.邋wenyujin邋southern邋blight邋pathogen逡逑A.無(wú)傷接種初期;B.無(wú)傷接種后期;C.刺傷接種初期;D.刺傷接種后期;E.對(duì)照植株逡逑A.邋Initial邋stage邋of邋unwounded邋inoculation;邋B.邋Late邋stage邋of邋unwounded邋inoculation;逡逑C.邋Initial邋stage邋of邋wounded邋inoculation;邋D.邋Late邋stage邋of邋wounded邋inoculation;邋E.邋Control邋plant逡逑3.1.3病原菌的形態(tài)學(xué)鑒定逡逑菌株JN0610在PDA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)2?3d后,形成圓形的菌落,菌絲氣生為白色逡逑羽毛狀,隨后逐漸茂盛并向四周輻射狀擴(kuò)展,4 ̄5d后菌落長(zhǎng)滿整個(gè)平皿(圖3A),逡逑培養(yǎng)10邋d后菌落表面形成乳白色的菌核(圖3邋B),之后漸變?yōu)榈S色,成熟后為茶逡逑褐色(圖3C)。逡逑菌絲無(wú)色透明,有隔膜(圖4A),具分枝,呈放射狀生長(zhǎng),菌絲之間有融合現(xiàn)逡逑象(圖4B,C)。菌核表面平滑而有光澤,大多為圓球形或橢球形,個(gè)別為不規(guī)則球逡逑形
【學(xué)位授予單位】:海南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:S435.672

【參考文獻(xiàn)】

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