【摘要】：放線菌是一類資源豐富的微生物類群,能夠產(chǎn)生多種次生代謝產(chǎn)物,其中抗生素是在生產(chǎn)實踐中應用最廣泛的,并且鏈霉菌是目前產(chǎn)生抗生素最多,研究最深入的。小麥紋枯病和小麥根腐病是近年來農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上發(fā)生嚴重的土傳病害,危害程度及范圍也呈逐年擴大的趨勢。本實驗室前期分離篩選獲得一株放線菌菌株FX-H-2,本研究對該菌株進行了系統(tǒng)鑒定,以小麥紋枯病菌、根腐病菌等病原真菌為靶標,測定了該菌株的抑菌活性,優(yōu)化其液態(tài)發(fā)酵條件,測定發(fā)酵濾液抑菌活性,并在溫室盆栽條件下測定發(fā)酵濾液的防病效果以及對小麥植株防御酶系活性的影響。主要研究結果如下:1、放線菌分類地位鑒定對菌株FX-H-2進行形態(tài)特征、培養(yǎng)特征觀察、生理生化特性測定以及16SrDNA序列分析,確定其分類地位。結果表明:FX-H-2的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征及生理生化特性均與鏈霉菌屬一致,16SrDNA序列共有1395 bp,利用GenBank數(shù)據(jù)庫進行相關序列比對,菌株FX-H-2與絲裂霉素鏈霉菌(Streptomyces mutomycini)的同源性為99%,在系統(tǒng)發(fā)育樹中的親緣關系最近,鑒定放線菌菌株FX-H-2為絲裂霉素鏈霉菌。2、放線菌菌株FX-H-2抑菌活性測定采用平板對峙法觀察到菌株FX-H-2對禾谷絲核菌(Rhizoctonia cerealis)、麥根腐平臍蠕孢菌(Bipolaris sorokiniana)等病原真菌有較好的抑制作用。3、液態(tài)發(fā)酵條件的優(yōu)化采用L9(3~4)正交表,以禾谷絲核菌為靶標菌,對菌株FX-H-2的液體發(fā)酵條件進行優(yōu)化。利用方差分析法和極差分析法,得到最優(yōu)的發(fā)酵培養(yǎng)條件是發(fā)酵時間7d、裝液量體積比3/10、發(fā)酵溫度28℃,在此條件下獲得的發(fā)酵濾液對病原菌的抑菌效果最好。4、發(fā)酵濾液抑菌活性測定采用菌絲生長速率法測定發(fā)酵濾液對禾谷絲核菌和麥根腐平臍蠕孢菌的抑制活性。當發(fā)酵濾液與培養(yǎng)基體積比為1/50時,抑菌率分別達到54.47%、64.10%。同時在顯微鏡下觀察到病原菌的菌絲形態(tài)發(fā)生了變化,菌絲顏色變深,細胞隔膜間縮短,末端細胞壁增厚膨大。5、溫室盆栽試驗在溫室條件下,用菌株FX-H-2的發(fā)酵濾液處理小麥植株幼苗,再接種小麥紋枯病菌和小麥根腐病菌,兩種病害的發(fā)病率分別降低了43.34%、30.00%。測定發(fā)酵濾液處理和清水處理條件下小麥植株過氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶5種防御酶活性大小及丙二醛含量。和清水對照相比,菌株FX-H-2發(fā)酵濾液處理使小麥植株體內5種防御酶活性全部提高。其中過氧化物酶和多酚氧化酶兩種酶活性的提高發(fā)生較快,在前期就達到了高峰,苯丙氨酸解氨酶、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶三種酶活性的提高以及丙二醛含量的降低發(fā)生較慢,在后期達到了高峰。表明:放線菌菌株FX-H-2發(fā)酵濾液能激活小麥植株的防御酶系,誘導小麥產(chǎn)生抗病性。
【圖文】：

拮抗放線菌 FX-H-2 的鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化及生防效果評價果與分析線菌菌株 FX-H-2 菌落及孢子形態(tài)觀察據(jù)《鏈霉菌鑒定手冊》中鏈霉菌屬的形態(tài)及培養(yǎng)特征觀察放線菌菌株 FX 1 號培養(yǎng)基平板上劃線，25 ℃恒溫培養(yǎng)菌株，7 d 后觀察。結果發(fā)現(xiàn)：菌呈白色，不產(chǎn)生色素，，表面隆起且干燥不透明，邊緣不規(guī)則向四周擴散；生不規(guī)則形狀的孢子，表面光滑，在 20 倍顯微鏡下觀察大小約 2.0 μm（見圖

FX-H-2 的鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化及生gical and biochemical characterisolidification and peptonization); starch);D 纖維素水解(Hydrolyliquefaction).子生物學鑒定 FX-H-2 的 16SrDNA，并圖 3.3。M 1 2
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S476

【參考文獻】

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本文編號：2682773