【摘要】：在我國(guó),糙皮側(cè)耳以塑料大棚栽培為主,易受環(huán)境條件變化影響,不時(shí)發(fā)生大面積的木霉侵染。生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為,大面積木霉侵染的爆發(fā)可能與高溫有關(guān)。但是,未經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí),高溫引發(fā)木霉侵染爆發(fā)的機(jī)理也尚未見報(bào)道。本研究以糙皮側(cè)耳主栽品種CCEF 89(CCMSSC 00389)和從侵染菌袋分離的棘孢木霉(Trichoderma asperellum,ACCC 32725)為材料,探究高溫引發(fā)糙皮側(cè)耳木霉侵染爆發(fā)的機(jī)理。獲得的主要結(jié)果如下:1.高溫脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲抵御木霉侵染的能力下降。表現(xiàn)為(1)對(duì)棘孢木霉分生孢子的吸附力增強(qiáng)。(2)產(chǎn)生胞外液差異代謝物141個(gè),主要為有機(jī)酸類、氨基酸類、胺類、苷類、酯類、多糖、醇類等,胞外液和各類差異代謝物均顯著促進(jìn)棘孢木霉菌絲生長(zhǎng)和分生孢子萌發(fā)。(3)高溫破壞糙皮側(cè)耳的胞壁完整性,導(dǎo)致細(xì)胞壁表面大量幾丁質(zhì)沉積,胞壁加厚,但結(jié)構(gòu)疏松。分析表明連接β-葡聚糖糖苷鍵的紅外吸收峰下降,且β-葡聚糖自身結(jié)構(gòu)受損,導(dǎo)致交聯(lián)疏松,胞壁易碎;胞壁中甘露糖含量顯著下降,導(dǎo)致胞壁孔隙度增大;對(duì)胞壁干擾劑(CFW、SDS、CR)的敏感性顯著增加,胞壁發(fā)生皺縮,表面結(jié)構(gòu)粗糙,不完整。(4)抵御木霉溶壁酶降解的能力顯著下降。2.高溫后棘孢木霉的相對(duì)侵染力顯著增強(qiáng)。表現(xiàn)為(1)分生孢子萌發(fā)率顯著升高。(2)分生孢子形成的時(shí)間大大縮短。(3)糙皮側(cè)耳菌絲對(duì)木霉分泌的幾丁質(zhì)酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶等胞壁降解酶活性具有增強(qiáng)作用,高溫條件下生長(zhǎng)的糙皮側(cè)耳菌絲這種作用更強(qiáng)。3.糙皮側(cè)耳和棘孢木霉對(duì)高溫引發(fā)的機(jī)體傷害程度差異顯著,棘孢木霉對(duì)高溫的耐受性顯著強(qiáng)于糙皮側(cè)耳。高溫下的侵染過程中,產(chǎn)生大量胞外H_2O_2,高濃度H_2O_2進(jìn)一步抑制糙皮側(cè)耳菌絲生長(zhǎng)。對(duì)糙皮側(cè)耳高溫產(chǎn)生的各類胞外代謝物實(shí)驗(yàn)表明,高溫中濃度升高的種類幾乎都可促進(jìn)棘孢木霉菌絲生長(zhǎng)和分生孢子萌發(fā)。結(jié)論:明確了糙皮側(cè)耳菌袋批量木霉侵染的關(guān)鍵因素--發(fā)菌期的高溫,明確了高溫引發(fā)糙皮側(cè)耳木霉病爆發(fā)的三個(gè)生理機(jī)制:糙皮側(cè)耳抵抗力下降,易被侵染;木霉菌的侵染力增強(qiáng);高溫增強(qiáng)木霉對(duì)糙皮側(cè)耳的抑制和侵染作用。
【圖文】：

中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述木霉對(duì)宿主的侵染，需要經(jīng)歷“病原與宿主的接觸-病原菌萌發(fā)和生長(zhǎng)-宿主細(xì)胞壁被降解-病原菌繁殖（形成大量分生孢子）”的過程。本研究擬根據(jù)侵染的整個(gè)生物學(xué)過程分析高溫加快木霉菌侵染，導(dǎo)致木霉病爆發(fā)的生理機(jī)制，以期為木霉病的有效防控提供理論依據(jù)。本論文擬從三個(gè)方面來探究高溫與糙皮側(cè)耳木霉病爆發(fā)之間的聯(lián)系。（1）高溫脅迫是否導(dǎo)致糙皮側(cè)耳對(duì)木霉的抵抗力下降，高溫影響了糙皮側(cè)耳的哪些結(jié)構(gòu)或生理過程降低了對(duì)木霉的抵抗力。（2）高溫是否增強(qiáng)棘孢木霉的侵染能力，是通過哪些功能來增強(qiáng)侵染力。（3）棘孢木霉和糙皮側(cè)耳相互作用時(shí)的關(guān)系，及其對(duì)高溫反應(yīng)有無差異，這些差異是否促進(jìn)了侵染的發(fā)生。1.6 技術(shù)路線

水浴鍋處理 2.5 h。在光學(xué)顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板記數(shù)釋放的原生質(zhì)體，每 0.5 h 一次。2.2.20 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用 SPSS version 20.0(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)進(jìn)行處理分析，方差分析采用 ANOVA 和 Duncan’s 多范圍檢驗(yàn)（P≤0.05）。誤差線代表三個(gè)重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。2.3 結(jié)果與分析2.3.1 高溫脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲易感性平板對(duì)峙試驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)，28 ℃培養(yǎng)的糙皮側(cè)耳抵御木霉侵染的能力較強(qiáng)，只在交界處的菌絲表面形成少量的分生孢子（圖 2.1）。隨著脅迫溫度的升高，糙皮側(cè)耳抵御木霉侵染的能力不斷下降，32 ℃脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲與木霉菌絲的交界處形成的分生孢子數(shù)量增多。36 ℃脅迫 2 d 后，，木霉菌絲覆蓋糙皮側(cè)耳大部分菌落，并形成大量分生孢子。40 ℃脅迫 2 d后，木霉菌絲和分生孢子幾乎將糙皮側(cè)耳菌落完全覆蓋（圖 2.1）
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S436.46

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2673055