【摘要】：在我國,糙皮側(cè)耳以塑料大棚栽培為主,易受環(huán)境條件變化影響,不時發(fā)生大面積的木霉侵染。生產(chǎn)經(jīng)驗認(rèn)為,大面積木霉侵染的爆發(fā)可能與高溫有關(guān)。但是,未經(jīng)實驗證實,高溫引發(fā)木霉侵染爆發(fā)的機理也尚未見報道。本研究以糙皮側(cè)耳主栽品種CCEF 89(CCMSSC 00389)和從侵染菌袋分離的棘孢木霉(Trichoderma asperellum,ACCC 32725)為材料,探究高溫引發(fā)糙皮側(cè)耳木霉侵染爆發(fā)的機理。獲得的主要結(jié)果如下:1.高溫脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲抵御木霉侵染的能力下降。表現(xiàn)為(1)對棘孢木霉分生孢子的吸附力增強。(2)產(chǎn)生胞外液差異代謝物141個,主要為有機酸類、氨基酸類、胺類、苷類、酯類、多糖、醇類等,胞外液和各類差異代謝物均顯著促進(jìn)棘孢木霉菌絲生長和分生孢子萌發(fā)。(3)高溫破壞糙皮側(cè)耳的胞壁完整性,導(dǎo)致細(xì)胞壁表面大量幾丁質(zhì)沉積,胞壁加厚,但結(jié)構(gòu)疏松。分析表明連接β-葡聚糖糖苷鍵的紅外吸收峰下降,且β-葡聚糖自身結(jié)構(gòu)受損,導(dǎo)致交聯(lián)疏松,胞壁易碎;胞壁中甘露糖含量顯著下降,導(dǎo)致胞壁孔隙度增大;對胞壁干擾劑(CFW、SDS、CR)的敏感性顯著增加,胞壁發(fā)生皺縮,表面結(jié)構(gòu)粗糙,不完整。(4)抵御木霉溶壁酶降解的能力顯著下降。2.高溫后棘孢木霉的相對侵染力顯著增強。表現(xiàn)為(1)分生孢子萌發(fā)率顯著升高。(2)分生孢子形成的時間大大縮短。(3)糙皮側(cè)耳菌絲對木霉分泌的幾丁質(zhì)酶、β-葡聚糖酶和蛋白酶等胞壁降解酶活性具有增強作用,高溫條件下生長的糙皮側(cè)耳菌絲這種作用更強。3.糙皮側(cè)耳和棘孢木霉對高溫引發(fā)的機體傷害程度差異顯著,棘孢木霉對高溫的耐受性顯著強于糙皮側(cè)耳。高溫下的侵染過程中,產(chǎn)生大量胞外H_2O_2,高濃度H_2O_2進(jìn)一步抑制糙皮側(cè)耳菌絲生長。對糙皮側(cè)耳高溫產(chǎn)生的各類胞外代謝物實驗表明,高溫中濃度升高的種類幾乎都可促進(jìn)棘孢木霉菌絲生長和分生孢子萌發(fā)。結(jié)論:明確了糙皮側(cè)耳菌袋批量木霉侵染的關(guān)鍵因素--發(fā)菌期的高溫,明確了高溫引發(fā)糙皮側(cè)耳木霉病爆發(fā)的三個生理機制:糙皮側(cè)耳抵抗力下降,易被侵染;木霉菌的侵染力增強;高溫增強木霉對糙皮側(cè)耳的抑制和侵染作用。
【圖文】：

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述木霉對宿主的侵染，需要經(jīng)歷“病原與宿主的接觸-病原菌萌發(fā)和生長-宿主細(xì)胞壁被降解-病原菌繁殖（形成大量分生孢子）”的過程。本研究擬根據(jù)侵染的整個生物學(xué)過程分析高溫加快木霉菌侵染，導(dǎo)致木霉病爆發(fā)的生理機制，以期為木霉病的有效防控提供理論依據(jù)。本論文擬從三個方面來探究高溫與糙皮側(cè)耳木霉病爆發(fā)之間的聯(lián)系。（1）高溫脅迫是否導(dǎo)致糙皮側(cè)耳對木霉的抵抗力下降，高溫影響了糙皮側(cè)耳的哪些結(jié)構(gòu)或生理過程降低了對木霉的抵抗力。（2）高溫是否增強棘孢木霉的侵染能力，是通過哪些功能來增強侵染力。（3）棘孢木霉和糙皮側(cè)耳相互作用時的關(guān)系，及其對高溫反應(yīng)有無差異，這些差異是否促進(jìn)了侵染的發(fā)生。1.6 技術(shù)路線

水浴鍋處理 2.5 h。在光學(xué)顯微鏡下用血球計數(shù)板記數(shù)釋放的原生質(zhì)體，每 0.5 h 一次。2.2.20 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用 SPSS version 20.0(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)進(jìn)行處理分析，方差分析采用 ANOVA 和 Duncan’s 多范圍檢驗（P≤0.05）。誤差線代表三個重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)偏差。2.3 結(jié)果與分析2.3.1 高溫脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲易感性平板對峙試驗可以發(fā)現(xiàn)，28 ℃培養(yǎng)的糙皮側(cè)耳抵御木霉侵染的能力較強，只在交界處的菌絲表面形成少量的分生孢子（圖 2.1）。隨著脅迫溫度的升高，糙皮側(cè)耳抵御木霉侵染的能力不斷下降，32 ℃脅迫后的糙皮側(cè)耳菌絲與木霉菌絲的交界處形成的分生孢子數(shù)量增多。36 ℃脅迫 2 d 后，，木霉菌絲覆蓋糙皮側(cè)耳大部分菌落，并形成大量分生孢子。40 ℃脅迫 2 d后，木霉菌絲和分生孢子幾乎將糙皮側(cè)耳菌落完全覆蓋（圖 2.1）
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S436.46

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2673055