【摘要】：馬鈴薯晚疫病是由致病疫霉引起的一種對馬鈴薯具有毀滅性破壞的卵菌病害,一旦爆發(fā),會造成馬鈴薯大幅度減產(chǎn)甚至絕收。作為世界第四大糧食作物,如何有效防治馬鈴薯晚疫病是保證馬鈴薯品質(zhì)和產(chǎn)量的首要問題。目前,利用拮抗微生物對馬鈴薯晚疫病進(jìn)行生物防治已受到廣泛的關(guān)注,因其具有綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),而且研究應(yīng)用潛力巨大。本實(shí)驗(yàn)室前期篩選得到一株活體對致病疫霉有顯著抑制作用的放線菌株Sy11,抑菌率達(dá)到86.47%,但其無菌體發(fā)酵液無論是原液還是濃縮液對致病疫霉均無抑制作用,該菌株經(jīng)鑒定為細(xì)黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus)。猜想Sy11只有在致病疫霉存在的情況下才分泌抑制致病疫霉的物質(zhì)。本研究首先驗(yàn)證了此猜想的正確性,建立了致病疫霉和Sy11在固體培養(yǎng)基上共培養(yǎng)的模型,在液體培養(yǎng)基混合發(fā)酵中分析了感應(yīng)分子的大小,并探討了常用農(nóng)藥、殺菌劑和黃酮類化合物對感應(yīng)現(xiàn)象是否有抑制作用,為今后Sy11在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用提供參考。本試驗(yàn)取得的主要結(jié)果如下:1、驗(yàn)證了Sy11對致病疫霉的抑制作用是由活體致病疫霉誘導(dǎo)才具有的,死亡的致病疫霉菌體沒有這樣的誘導(dǎo)作用。建立了致病疫霉和Sy11的共培養(yǎng)模型,致病疫霉和Sy11菌餅(7mm)在黑麥培養(yǎng)基上相距72mm、20℃條件下共培養(yǎng)10d,Sy11產(chǎn)生的抑菌作用最強(qiáng)。2、致病疫霉在共培養(yǎng)過程中分泌了誘導(dǎo)Sy11抑菌作用的誘導(dǎo)物質(zhì)或信號分子,在20℃共培養(yǎng)5d時信號分子的活性最高。3、致病疫霉和Sy11在液體培養(yǎng)基中混合發(fā)酵時,先接種致病疫霉菌餅(7mm*3)單獨(dú)培養(yǎng)5d,再接種Sy11菌餅(7mm*3),混合發(fā)酵10d后將發(fā)酵液除去菌體,無菌體發(fā)酵液的上清具有明顯抑菌活性。進(jìn)一步分別將致病疫霉或Sy11放入透析袋(10kD),對二者進(jìn)行共培養(yǎng),得到的無菌體發(fā)酵液上清沒有抑菌作用,說明致病疫霉和Sy11產(chǎn)生的感應(yīng)分子的分子量均大于10kD,不能通過透析袋而發(fā)揮誘導(dǎo)作用。4、探討了部分化學(xué)制劑對致病疫霉誘導(dǎo)因子發(fā)揮作用的影響,50μg/mL和5μg/mL的甲霜靈·錳鋅、苯甲酸鈉和乙酸鈉都會抑制誘導(dǎo)因子的活性,降低Sy11對致病疫霉的抑制作用,而100μg/mL的馬鈴薯黃酮粗提液對誘導(dǎo)因子的活性有促進(jìn)作用,可明顯提高Sy11對致病疫霉的抑制作用。5、對馬鈴薯黃酮的提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,選擇時間、溫度、料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)4個條件進(jìn)行單因素試驗(yàn),根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果選擇了溫度、料液比和乙醇體積分?jǐn)?shù)3個因素進(jìn)行響應(yīng)面分析,最終得到馬鈴薯黃酮的最佳提取條件為:料液比1:36,溫度79℃,乙醇體積分?jǐn)?shù)55%,得到的黃酮提取率為1.304%。
【圖文】：

第 1 章 引言1.1 馬鈴薯晚疫病概述馬鈴薯屬茄科多年生草本植物，是全球第四大重要的糧食作物。2015 年，我國啟動了馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略，即用馬鈴薯加工成適合中國人消費(fèi)習(xí)慣的面條、饅頭等一系列主食產(chǎn)品，將馬鈴薯作為我國稻米、小麥、玉米等三大主糧的補(bǔ)充，逐漸成為第四大主糧作物。預(yù)計 2020 年 50%以上的馬鈴薯將作為主糧消費(fèi)[1]。我國是世界上馬鈴薯種植面積最大的國家,年均種植面積約540萬hm,但平均單產(chǎn)僅為1.54萬kg/hm,低于世界平均水平[2]，馬鈴薯晚疫病是重要的制約因素之一。馬鈴薯晚疫病是典型的氣候性流行性病害，在馬鈴薯病害中是造成損失最大、最嚴(yán)重的的一種，主要發(fā)生在我國北方的內(nèi)蒙古、河北、山西甘肅、陜西、寧夏、黑龍江、吉林等省（自治區(qū)），以及南方的貴州、四川、重慶、云南等�。ㄖ陛犑校3]。

河北大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文(Pythiaceae)疫霉屬(Phytophthora)的一種卵菌[4]。喜日暖夜涼的高濕條件度 18-22℃之間、濕度達(dá)到 95%以上時最容易形成。孢子囊從帶病植株上進(jìn)入土壤中，進(jìn)而侵染馬鈴薯塊莖。在白天溫度不超過 24℃，夜晚溫度大霧、陰雨等天氣最容易發(fā)病，，一般 10-14 天就會大面積爆發(fā)，甚至?xí)霈F(xiàn)象。在歷年統(tǒng)計中可以發(fā)現(xiàn)，干旱環(huán)境下馬鈴薯晚疫病不易發(fā)病，而在013 年雨水較多，分別占播種面積 47.24%和 46.71%的馬鈴薯土地受到晚病株率最高可達(dá) 80-100%[5]。而且，由于致病疫霉侵染塊莖，受到病菌有可能被儲存下來，播種之后會成為中心病株，并隨著土壤中的水分?jǐn)U整塊薯田發(fā)病[6]，由此，馬鈴薯晚疫病的患病情況也會愈演愈烈。
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S435.32;S476

【參考文獻(xiàn)】

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1 馬振川;疫霉菌一個新病原相關(guān)模式分子PsXEG1的鑒定和功能分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

本文編號：2649733