【摘要】：煙草黑脛病是煙草生產(chǎn)上的重要病害之一,每年均會造成巨大的經(jīng)濟損失。煙草疫霉(Phytophthora nicotianae)是引起煙草黑脛病的病原菌,因此篩選出對煙草疫霉具有高拮抗活性的生防菌,對煙草黑脛病的防治,有效控制病害造成的損失具有重要意義。本論文從煙草疫霉高效拮抗菌的篩選、抑菌活性的測定、菌種鑒定、抑菌譜測定、發(fā)酵條件優(yōu)化及盆栽生防試驗等方面進行研究,主要研究結果如下:1、拮抗菌篩選及抑菌活性測定。利用稀釋涂布和平板對峙法從土壤中篩選出16株拮抗細菌與13株拮抗放線菌,其中F-7菌株對煙草疫霉菌絲生長的抑制效果最好,抑菌率達到75.00%;采用抑制菌絲生長速率法,測定29株拮抗菌發(fā)酵代謝液對煙草疫霉菌絲生長的抑制活性,其中F-7的抑菌活性最高,菌絲生長抑制率達81.41%。2、對F-7菌株進行了鑒定。結合形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,初步鑒定該菌株屬于鏈霉菌屬(Streptomyces sp.)。3、抑菌譜測定。F-7菌株與17種供試植物病原菌菌株平板對峙試驗表明,F-7菌株對其中6種供試植物病原菌菌株的菌絲生長抑制率均達到60.00%以上,對疫霉屬病原菌均具有較高的拮抗活性,且對煙草疫霉拮抗活性最高,菌絲生長抑制率達75.00%,而對其余11株植物病原菌菌絲生長的抑制作用較差或無抑制作用。4、F-7菌株發(fā)酵條件研究。通過對6個單因素變量控制,實驗得出F-7菌株最適發(fā)酵條件為:培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液,接種量為1mL,初始pH為6.0,培養(yǎng)溫度為28°C,搖床轉(zhuǎn)速180 r/min,培養(yǎng)時間為5d。5、研究了發(fā)酵代謝液的熱穩(wěn)定性和pH耐受性。結果表明溫度在30°C左右最穩(wěn)定,超過70°C時發(fā)酵液抑菌活性明顯下降直至為零;發(fā)酵液在pH 6-10時,抑菌率變化較小,耐受性較好。6、盆栽生防試驗。結果表明,在煙苗3-5葉期F-7菌株發(fā)酵液對煙草黑脛病的生防作用不明顯,而在8-10葉期則具有較好的防治作用。
【圖文】：

圖 4-1 土壤微生物稀釋涂布Fig.4-1 Dilution coating of soil microorganismsA、B：涂布圖；C、D：初篩圖A, B: coating diagram; C, D: primary screen煙草疫霉抑菌活性測定對煙草疫霉菌絲生長的抑制作用峙方法測得，29 株對煙草疫霉具有拮抗作用的草疫霉菌絲的抑制率均達到 55.00%以上，分別、60.00 %、63.75%、58.75%、75.00%、72.50 %、和 66.25%，其中，，放線菌 F-7 對煙草疫霉菌絲效果最好；而 16 株拮抗細菌中抑菌效果達到下表 4-1。

F-7 81.41 Y-2 43.21F-8 35.25 Y-7 51.38F-9 56.45 Y-11 27.96F-10 65.00 Y-13 38.42F-11 56.32 Y-14 49.53F-12 70.55 Y-16 48.36F-13 28.56 Y-17 22.75H-1 34.57 Y-19 28.53H-2 39.844.2 放線菌 F-7 菌種鑒定4.2.1 放線菌 F-7 形態(tài)學觀察放線菌株 F-7 在高氏一號培養(yǎng)基上生長狀況較好，其單菌落呈現(xiàn)灰白色，表面干燥、緊致，頂端圓心隆起，見圖 4-2；通過插片法將 F-7 放在光學顯微鏡下可發(fā)現(xiàn)，氣生菌絲發(fā)達，相互交織，基內(nèi)菌絲細長，分支較少。
【學位授予單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S435.72

【參考文獻】

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本文編號：2649170