【摘要】：桑(Morus spp.)葉不僅是蠶的飼料,還因其粗蛋白含量高、各類(lèi)礦物營(yíng)養(yǎng)、維生素豐富、適口性好及消化率高等特點(diǎn)作為一種新型優(yōu)勢(shì)的飼草資源。植物內(nèi)生真菌有著多樣的生態(tài)學(xué)作用,包括促進(jìn)植物生長(zhǎng)、提高植物抗逆性等。紫花苜蓿(Medicago Sativa)是世界上種植面積最廣、最重要的一種多年生豆科牧草,其具有粗蛋白含量高,產(chǎn)量高的特點(diǎn)。隨著栽培面積的不斷擴(kuò)大,病害發(fā)生成為限制紫花苜蓿產(chǎn)量及品質(zhì)的重要影響因素。明確這兩種飼料植物病原菌及內(nèi)生菌的種類(lèi)和危害是產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)和健康養(yǎng)殖的重要基礎(chǔ),具有重要的理論和應(yīng)用價(jià)值。本研究于2015年~2017年從陜西省4縣區(qū)(楊凌區(qū)、彬縣、定邊縣和榆陽(yáng)區(qū))采集紫花苜蓿病害樣本和健康桑樹(shù)樣本,采用組織分離法進(jìn)行分離和純化,對(duì)分離物結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法進(jìn)行種屬鑒定,采用平皿法和灌根法確定其致病性。主要內(nèi)容和結(jié)論如下:1.利用組織塊分離法對(duì)采集自楊凌區(qū)的紅果二號(hào)桑樹(shù)品種健康枝條和葉片進(jìn)行內(nèi)生菌分離與純化,并采用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定方法對(duì)分離純化得到的內(nèi)生菌菌株進(jìn)行鑒定,共分離純化得到10株內(nèi)生真菌,隸屬于7個(gè)屬,分別是刺盤(pán)孢屬(Colletotrichum sp.)、莖點(diǎn)霉屬(Phoma sp.)、擬莖點(diǎn)霉屬(Phomopsis sp.)、派倫霉屬(Peyronellaea sp.)、鐮刀菌屬(Fusarium sp.)、毛霉屬(Mucor sp.)和炭角菌屬(Xylaria sp.)。研究表明:楊凌區(qū)紅果二號(hào)桑樹(shù)品種內(nèi)生菌分布于7個(gè)屬,且擬莖點(diǎn)霉屬、刺盤(pán)孢屬和鐮刀菌屬分離率較高。2.2015~2017年在彬縣苜蓿種植地病害調(diào)查中,褐斑病和葉斑病于2015年發(fā)生最為嚴(yán)重,發(fā)病率分別達(dá)43.89%和54.09%;2015~2016年定邊縣苜蓿病害調(diào)查中,褐斑病危害最為嚴(yán)重,2016年9月發(fā)病率高達(dá)55.29%;榆陽(yáng)區(qū)2015年褐斑病發(fā)生最為嚴(yán)重,發(fā)病率高達(dá)55.50%;苜蓿銹病、根腐病、黑莖病、白粉病及菟絲子害等亦有發(fā)生,但發(fā)生頻率及危害程度較褐斑病和葉斑病低。研究表明:陜西省苜蓿病害發(fā)生呈現(xiàn)出病害種類(lèi)多,發(fā)生時(shí)間長(zhǎng),以褐斑病和葉斑病為主要病害,其余病害雖有發(fā)生但為害程度較小的特點(diǎn)。3.從彬縣、楊凌區(qū)、定邊縣及榆陽(yáng)區(qū)4個(gè)地點(diǎn)采集的紫花苜蓿根腐病病樣的分離物中共鑒定出4種鐮刀菌,即燕麥鐮刀菌(Fusarium avenaceum),腐皮鐮刀菌(Fusarium solani),變紅鐮刀菌(Fusarium incarnatum),尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)。4個(gè)地點(diǎn)均分離出燕麥鐮刀菌,彬縣、定邊縣及榆陽(yáng)區(qū)分離出腐皮鐮刀菌,彬縣和楊凌區(qū)分別分離出變紅鐮刀菌和尖孢鐮刀菌。平皿法致病性試驗(yàn)表明所有菌株均有致病性,采集自定邊縣的腐皮鐮刀菌DB2菌株病情指數(shù)顯著高于該縣的燕麥鐮刀菌DB1菌株,其余菌株的病情指數(shù)差異不顯著;灌根法致病性試驗(yàn)同樣驗(yàn)證了4種菌株BX1、BX2、BX3和YL2對(duì)苜蓿的致病性。同時(shí),這四種苜蓿根腐病致病鐮刀菌也是陜西省首次報(bào)道。研究表明:陜西省紫花苜蓿根腐病致病菌優(yōu)勢(shì)種群為燕麥鐮刀菌,其次是腐皮鐮刀菌。4.2017年于楊凌區(qū)苜蓿種植地發(fā)現(xiàn)一種往年未發(fā)現(xiàn)病害--苜蓿葉枯病,采集病樣后進(jìn)行病原菌分離、純化、致病性測(cè)定及生物學(xué)特性研究。獲得具有致病力的立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)菌株,其生物學(xué)特性研究結(jié)果為:該菌最適pH值為7;黑暗條件下有利于該菌生長(zhǎng);對(duì)碳源的利用效果中以可溶性淀粉最好,對(duì)果糖利用效果最差;最適氮源為硝酸鉀,對(duì)硝酸銨利用效果最差。研究表明:引起紫花苜蓿葉枯病的病原菌為立枯絲核菌
【圖文】：

圖 2-1 分離自桑葉的內(nèi)生菌Fig.2-1 Endophytes isolated from mulberry leafA:HGA1;B:HGA2;C:HGA3;D:HGA4;E:HGA5;F:HGA6GB1 呈白色，具大量毛絨狀氣生菌絲，，生長(zhǎng)速度快（圖 2-2A）毛絨狀氣生菌絲（圖 2-2B）；菌株 HGB3 具有致密白色氣生菌絲

圖 2-2 分離自桑枝條的內(nèi)生菌Fig.2-2 Endophytes isolated from mulberry shootA: HGB1; B: HGB2; C: HGB3; D: HGB4
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S435.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2635652