【摘要】：根腫病,是一種由蕓薹根腫菌侵染引起的土傳性病害。植株苗期感病,繼而主根腫大,最終導(dǎo)致植株斷壟絕收,且病原菌有傳播速度快,存活時間長,危害大,防治困難等特點(diǎn),故而在全世界都“享有盛譽(yù)”。自根腫病傳入我國以來,隨著時間的推移快速的發(fā)展,對我國十字花科經(jīng)濟(jì)作物造成的損失逐年增加。隨著對十字花科根腫病的防治研究不斷的深入,目前普遍認(rèn)為,培育抗病品種是一種最經(jīng)濟(jì)、最有效、最環(huán)保的防治根腫病的方法,但對培育出的品種的抗感性強(qiáng)弱我們不得而知,因而如何快速準(zhǔn)確的鑒定出品種的抗感性至關(guān)重要。因此,本文以十字花科作物甘藍(lán)為試驗(yàn)材料,研究不同抗性品種的甘藍(lán)在接種根腫菌后,各個抗性指標(biāo)的變化,旨在找出不同抗性甘藍(lán)之間的差異,并對各個抗性指標(biāo)之間的相關(guān)性進(jìn)行分析,建立一套甘藍(lán)抗根腫病的指標(biāo)體系,為后續(xù)培育抗病品種,防治根腫病提供參考。主要研究結(jié)果如下:1.11個甘藍(lán)品種抗感性測定對11個甘藍(lán)品種進(jìn)行發(fā)病率和病情指數(shù)的測定,研究結(jié)果表明,青蓮甘藍(lán)(發(fā)病率15.4%,病情指數(shù)10.4)和綠抗九號(發(fā)病率18.6%,病情指數(shù)12.9)表現(xiàn)為抗病,西園六號(發(fā)病率28.2%,病情指數(shù)21.3)和83號(發(fā)病率42.0%,病情指數(shù)82.9)表現(xiàn)為耐病,西園四號(發(fā)病率53.6%,病情指數(shù)50.0)表現(xiàn)為感病,CR17-1(發(fā)病率100.0%,病情指數(shù)89.8)、CR17-2(發(fā)病率85.0%,病情指數(shù)72.2)、CR17-3(發(fā)病率95.0%,病情指數(shù)85.5)、CR17-5(發(fā)病率100.0%,病情指數(shù)93.2)、CR17-6(發(fā)病率81.4%,病情指數(shù)78.9)和CR17-7(發(fā)病率69.3%,病情指數(shù)56.3)表現(xiàn)為高感。2.早期篩選抗病品種方法的確立(1)不同抗性甘藍(lán)品種早期根毛和皮層侵染研究采用水培法,對12個甘藍(lán)品種在早期進(jìn)行根毛和皮層的顯微觀察,發(fā)現(xiàn)感病品種的根毛侵染率高于耐病品種,后者高于抗病品種,且感病品種的侵染高峰在第10d,而耐病和抗病品種侵染高峰在13d;感病品種接種16d后的皮層侵染數(shù)也顯著高于耐病品種,后者高于抗病品種。因此根毛侵染率和皮層侵染數(shù)可以作為評價甘藍(lán)抗感性的抗性指標(biāo)。(2)不同抗性甘藍(lán)品種早期根內(nèi)含菌量研究采用水培法,通過RT-qPCR對12個甘藍(lán)品種在早期進(jìn)行根內(nèi)含菌量的測定,測得青蓮甘藍(lán)、綠抗九號、西園六號、83號、西園四號、京豐一號、CR17-7、CR17-2、CR17-6、CR17-3、CR17-1、CR17-5的含菌量高峰都出現(xiàn)在第10d,分別為(lgPbDNA=5.35fg、5.61fg、5.95fg、6.01fg、6.06fg、6.10fg、6.11fg、6.26fg、6.60fg、6.41fg、6.76fg、6.84fg)。且在接種第4d、10d、16d三個時間點(diǎn)上,都呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢,且抗病品種、耐病品種、感病品種的根內(nèi)含菌量均有顯著性差異。因此可以通過qPCR定量根內(nèi)含菌量,追蹤根腫菌在寄主根內(nèi)早期發(fā)展?fàn)顟B(tài),作為評價甘藍(lán)抗感性的抗性指標(biāo)。3.不同抗性甘藍(lán)品種根腫病相關(guān)生理生化指標(biāo)研究以篩選出5個存在抗性梯度的甘藍(lán)品種為研究對象,采用水培法,測定甘藍(lán)在接種根腫菌后,甘藍(lán)根部的POD、SOD、CAT活性的變化,以及MDA含量和可溶性糖含量的變化差異。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)抗氧化酶活性:不同抗性的甘藍(lán)品種接種根腫菌后,POD、SOD和CAT的活性在試驗(yàn)階段,抗病品種都高于耐病品種,后者高于感病品種,且在第10d時差異最為顯著,即POD、SOD和CAT活性越大則甘藍(lán)的抗性越高,所以POD、SOD和CAT活性可以作為評價甘藍(lán)抗感性的抗性指標(biāo)。(2)丙二醛(MDA)含量:不同抗性的甘藍(lán)品種接種根腫菌后,根內(nèi)MDA含量在整個試驗(yàn)階段中,感病品種都高于耐病品種,后者高于抗病品種,且都存在著顯著的差異,即MDA含量越高則甘藍(lán)抗性越低,所以MDA含量可以作為評價甘藍(lán)抗感性的抗性指標(biāo)。(3)可溶性糖含量:不同抗性的甘藍(lán)品種接種根腫菌后,可溶性糖含量在試驗(yàn)中后期階段,抗病品種都高于耐病品種,后者高于感病品種,且隨著侵染時間的增加,差異就越顯著,即可溶性糖含量越高則甘藍(lán)抗性越高,所以可溶性糖可以作為評價甘藍(lán)抗感性的抗性指標(biāo)。4.甘藍(lán)抗根腫病指標(biāo)體系的構(gòu)建通過對不同抗性甘藍(lán)品種的抗性指數(shù)以及各個抗性指標(biāo)的相關(guān)性分析,得出了甘藍(lán)在接種根腫菌后第10d時,抗性指數(shù)以及抗性指標(biāo)之間的聯(lián)系最為緊密,相關(guān)性最高,因此我們將甘藍(lán)在接種根腫菌第10d時,根毛侵染率、皮層侵染數(shù)、根內(nèi)含菌量、POD、SOD、CAT、MDA和可溶性糖這8個抗性指標(biāo)構(gòu)建成一個體系,作為在早期篩選抗根腫病的甘藍(lán)品種。5.甘藍(lán)抗根腫病的體系在白菜上的應(yīng)用甘藍(lán)抗根腫病的體系應(yīng)用在不同抗性的白菜上,通過對抗性體系中的指標(biāo)進(jìn)行測定,得出根毛侵染率、皮層侵染數(shù)、根內(nèi)含菌量和MDA含量與寄主的病情指數(shù)呈正相關(guān),POD、SOD、CAT和可溶性糖與寄主的病情指數(shù)呈負(fù)相關(guān)。
【圖文】：

圖 2-1 水培條件下的甘藍(lán)Fig.2-1 Cabbage seedling in solution culture病甘藍(lán)根毛和皮層侵染的觀察種根腫菌的甘藍(lán)分別在第 4d、7d、10d、13d、16d 后取出數(shù)株根部逐個在自來水下沖洗 1-2 分鐘后，將其放入 FAA 固定液固定其取出繼續(xù)在自來水下沖洗干凈后，放入培養(yǎng)皿，用 0.5%的熒在自來水下洗去浮色，最后將洗凈的根部放在玻片上，用顯微鏡記錄被根腫菌侵染的根毛，每株觀察 100 根根毛，重復(fù) 3 次，，且復(fù)，統(tǒng)計(jì)出根毛侵染率。根毛侵染率(%)=(侵染根毛數(shù)/100 根根毛腫菌侵染的皮層數(shù)，每株觀察 3 個視野，重復(fù) 3 次，且設(shè) 3 個出皮層侵染數(shù)。藍(lán)根內(nèi)根腫菌含量的實(shí)時熒光定量分析種根腫菌的甘藍(lán)分別在第 4d、10d、16d 后取出數(shù)十株，取其根

圖 2-3 12 個甘藍(lán)品種接種根腫菌后不同時間點(diǎn)的根毛侵染率Fig.2-3 The root-hair infection rate by Plasmodiophora brassicae in twelve varieties of cabbage atdifferent time注：圖中數(shù)據(jù)為平均數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)誤。同色柱上不同字母表示經(jīng) LSD 法檢驗(yàn)在 P<0.05 水平差異顯著。Note：Dateare mean±SE. Different letters on the bars indicate significant different at P<0.05 level by LSD test圖 2-4 甘藍(lán)品種接種根腫菌后的根毛侵染Fig.2-4 The root-hair infection infection by Plasmodiophora brassicae in cabbage
【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S436.35

【參考文獻(xiàn)】

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1 柴阿麗;朱發(fā)娣;王惟萍;石延霞;謝學(xué)文;李寶聚;;十字花科根腫病接種技術(shù)及發(fā)病條件研究[J];華北農(nóng)學(xué)報;2015年S1期

2 陳欣;王超;張曉p

本文編號：2622630